独行菜幼苗叶片乙酰CoA酰基转移酶基因克

发布时间：2019-09-10 10:44

【摘要】：目的:研究独行菜强心苷生物合成途径的相关基因,从独行菜幼苗叶片中克隆强心苷生物合成途径关键酶乙酰CoA酰基转移酶(acetyl-CoA C-acetyltransferase,AACT)基因,进行序列分析和原核表达。方法:根据独行菜转录组数据中LaAACT基因序列设计特异性引物,克隆得到LaAACT基因的cDNA序列,构建pET-32a-LaAACT原核表达载体,诱导表达LaAACT重组蛋白。结果:LaAACT基因ORF全长为1 212 bp,编码403个氨基酸。序列分析结果显示LaAACT蛋白没有跨膜区,不含信号肽,位于细胞质中,含有硫解酶家族保守结构域。系统进化结果显示LaAACT蛋白与十字花科植物的AACT蛋白亲缘关系较近。通过IPTG诱导,在大肠埃希菌中成功表达LaAACT重组蛋白,并得到了纯化的LaAACT重组蛋白。结论:首次从独行菜幼苗叶片中克隆了LaAACT基因,建立其稳定的原核表达体系,为LaAACT蛋白抗体的制备,进一步研究LaAACT基因在独行菜强心苷生物合成途径中的功能奠定了基础。
【作者单位】： 河南中医药大学药学院;呼吸疾病诊疗与新药研发河南省协同创新中心;黑龙江中医药大学药学院;
【基金】：国家重点基础研究发展计划“973计划”项目(2013CB531802) 河南省科技攻关计划项目(162102310468) 河南中医学院博士科研基金项目(BSJJ2011-07)
【分类号】：Q943.2;S567.2

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 孙军;;浅谈原核表达的技巧[J];大学时代;2006年07期

2 金元昌;李景鹏;李会东;周建红;;重组促性腺激素释放激素基因原核表达的影响因素[J];湘潭师范学院学报(自然科学版);2006年02期

3 韩钰;王艳林;;小鼠精胺氧化酶的原核表达与鉴定[J];生物技术通讯;2007年01期

4 朱向前;杨静;丁晓然;王升启;;重组人磷脂爬行酶1的原核表达及纯化[J];生物技术通讯;2011年06期

5 哲名家;张淼涛;云涛;王玢tx;刘光清;;兔岩藻糖基转移酶基因的克隆与原核表达[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);2012年04期

6 谢海燕,郭霄峰;猪α-干扰素的原核表达[J];华南农业大学学报;2004年04期

7 孙东波;冯力;刘杰;时洪艳;佟有恩;刘胜旺;童光志;;猪传染性胃肠炎病毒n基因的原核表达及重组蛋白的免疫活性分析[J];病毒学报;2006年02期

8 孙军;王俊杰;秦波;伏秀青;高倩倩;王兴智;朱筱娟;;粘着斑激酶的原核表达、纯化及抗体的制备[J];分子科学学报;2007年02期

9 戴华;郑佳玉;陈俊华;潘志明;焦新安;;鸡α干扰素基因的原核表达及其活性测定[J];中国预防兽医学报;2009年10期

10 汤承;张兆敏;岳华;;鸡热休克蛋白70基因的克隆及原核表达[J];西南民族大学学报(自然科学版);2011年03期

相关会议论文 前10条

1 马文涛;闫若潜;吴志明;刘光辉;盛敏;谢彩华;;猪白细胞介素-6的原核表达及其生物学活性研究[A];中国畜牧兽医学会2010年学术年会——第二届中国兽医临床大会论文集(下册)[C];2010年

2 丁梦蝶;鲁丹;王红宁;田浪;阳泰;张毅;樊汶樵;郭自成;;禽传染性支气管炎病毒多基因串联表位抗原的原核表达研究[A];四川省动物学会第九次会员代表大会暨第十届学术研讨会论文集[C];2011年

3 林海波;张桂红;詹国英;廖明;任涛;罗开健;曹伟胜;徐成刚;辛朝安;;猪白细胞介素-6基因的非融合原核表达研究[A];第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会——2005中国畜牧兽医学会学术年会论文集[C];2005年

4 隋桂琴;左玲;王桂云;;人碱性成纤维细胞生长因子的原核表达[A];中国眼底病论坛·全国眼底病专题学术研讨会论文汇编[C];2008年

5 黄斯勇;梁英民;韩骅;李国辉;伍艳兰;康志杰;何飞;张萍;徐恒;刘利;;人Detla-like4ext-93-217原核表达、纯化及蛋白活性检测[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年

6 张红;刘志国;屈伸;;人源受体相关蛋白的原核表达优化及功能检测[A];湖北省暨武汉生物化学与分子生物学学会第八届会员代表大会和第十五次学术年会论文摘要汇编[C];2004年

7 袁志栋;王志亮;刘雨田;吴晓东;刘海生;;水貂朊蛋白前体基因的克隆与原核表达[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集[C];2005年

8 王士友;张耀洲;;一个新的家蚕基因的克隆、原核表达及纯化[A];华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流会论文集[C];2006年

9 伍艳兰;黄斯勇;牛晓丽;张丽;陈茹菲;何飞;张萍;梁英民;刘利;;人Delta-like4ext-93-217原核表达、纯化及蛋白活性检测[A];第12届全国实验血液学会议论文摘要[C];2009年

10 马文涛;闫若潜;吴志明;刘光辉;盛敏;谢彩华;;猪白细胞介素-6的原核表达及其生物学活性研究[A];中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病防控学术研讨会论文集[C];2010年

相关博士学位论文 前8条

1 张晓鸣;人IL-16的原核表达与其功能的初步研究[D];中国科学院研究生院（上海生命科学研究院）;2000年

2 曹秀利;杨树PtCDD基因的原核表达及酶活分析[D];南京林业大学;2008年

3 黄新河;小鼠TAp63γ的原核表达、纯化、结构及功能初步研究[D];四川大学;2007年

4 张大鹏;VP60蛋白的原核表达、抗体制备及VP60基因转化的研究[D];西北农林科技大学;2012年

5 张少斌;豌豆肌动蛋白异型体（PEAc1）的原核表达及其藻荧光探针的研制[D];中国农业大学;2004年

6 尹国华;利用Red重组系统构建dsRNA原核表达体系抗烟草花叶病毒的研究[D];山东农业大学;2009年

7 韩凌霞;猪圆环病毒2型基因的原核表达与单克隆抗体的制备及感染性分子克隆的动物接种试验[D];中国农业科学院;2003年

8 于扬;重组人源GPx4及其模拟物的原核表达、结构与功能的研究[D];吉林大学;2013年

相关硕士学位论文 前10条

1 周鹏;结核分枝杆菌特异性蛋白的原核表达、纯化及免疫原性分析[D];安徽医科大学;2015年

2 高小磊;六种结核分枝杆菌特异性抗原的原核表达及16 KD-38 KD和Ag85A血清学诊断效果的研究[D];兰州大学;2015年

3 彭传林;家蝇抗真菌肽MAF-1原核表达体系优化与活性分析[D];贵阳医学院;2015年

4 钟树怀;猪囊尾蚴膜联蛋白的原核表达及其免疫反应性分析[D];贵阳医学院;2015年

5 孙明潭;猪繁殖与呼吸综合征病毒河北地方株ORF7基因的原核表达及ELISA方法的建立[D];河北农业大学;2015年

6 张良斌;天祝白牦牛KAP家族基因克隆、原核表达及其在皮肤中的表达分析[D];西北民族大学;2015年

7 达小强;牦牛转铁蛋白基因克隆与原核表达[D];西北民族大学;2015年

8 高翠娥;飞蝗2个CYP450转基因果蝇品系对杀虫剂的敏感性及原核表达[D];山西大学;2015年

9 吴雨航;布氏杆菌病间接ELISA方法的建立及吉林省梅花鹿主要养殖地区鹿布病血清学调查[D];吉林农业大学;2015年

10 姜旭;百合无症病毒16kDα基因的克隆、原核表达及亚细胞定位[D];大连理工大学;2015年

，

本文编号：2533980