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施氏鲟Asnanos1基因序列分析及其在雌雄不同组织中表达

发布时间:2019-10-22 12:21
【摘要】:本研究首先从施氏鲟(Acipenser schrenckii)性腺转录组中获得nanos1(Asnanos1)基因全长c DNA,并对其序列的准确性和特征分别进行PCR验证和生物信息学分析。进一步利用荧光定量RT-PCR技术检测Asnanos1基因在雌、雄施氏鲟的性腺、心脏、鳃、脑、肾、肝脏、脾脏等组织中的表达量。利用荧光定量RT-PCR技术检测Asnanos1基因在雌、雄施氏鲟的性腺、心脏、鳃、脑、肾、肝脏、脾脏等组织中的表达量。结果显示:Asnanos1的c DNA全长为1 389 bp,其中,5′非编码区(UTR)为414 bp,3′UTR为279 bp,ORF为696 bp。该基因共编码231个氨基酸。Asnanos1基因在施氏鲟除心脏以外的各组织中均有表达,在雌、雄鱼的鳃、脑、肾、肝脏、脾脏等组织中表达量无显著差异,但在卵巢中的表达量显著高于其他各组织(P0.05)。所得到的结果可为人工培育全雌施氏鲟苗种提供一些基础资料。
【图文】:

氨基酸序列,全长cDNA序列,氨基酸序列


MarineSciences/Vol.41,No.4/201719图1Asnanos1全长cDNA序列及氨基酸序列Fig.1cDNAanddeducedaminoacidsequencesoftheAsnanos1gene黄色底为磷酸化位点;起始密码子atg用红色线表示;终止密码子taa用加粗表示;灰色区域为α螺旋。下划线所指示的区域为保守的-CCHC-锌指结构域,黑色加粗显示的为核心的Cys或HisPhosphorylationsitesaremarkedinyellow;Theinitiationcodon(atg)ismarkedbyredline;Thestopcodon(taa)ischaracterizedinbold;Fiveα-helixedaremarkedwithgray;Conserved-CCHC-zincfingerdomainisunderlined;CysorHisareinbold图2推测的Asnanos1氨基酸序列的三级结构Fig.2Predictedthree-dimensionalstructureoftheAsnanos1gene结果显示(图4),Asnanos1基因在施氏鲟除心脏以外的各组织中均有表达,在雌、雄鱼的鳃、脑、肾、肝脏、脾脏等组织中表达量无显著差异,但在卵巢中的表达量显著高于其他各组织(P<0.05)。3讨论与结论本研究获得了Asnanos1的cDNA全长为1389bp,其中,5′UTR为414bp,3′UTR为279bp以及696bp的ORF。该基因共编码231个氨基酸。Blast分析可知,Asnanos1与nanos2和nanos3在分类进化上的关系较远,而与nanos1聚为一大支。这些结果充分表明本研究所得到的基因序列为Asnanos1。系统进化树结果显示:在nanos1的进化中,施氏鲟与斑点雀鳝聚为一支,但与中华鲟有一定的距离,产生这个现象的原因有待于进一步研究。Asnanos1蛋白氨基酸序列的C端具有两个保守-CCHC-(-Cys-Cys-His-Cys-)锌指结构域,这一结构特征与在其他物种nanos1中也同样存在,是nanos1蛋白发挥功能所必需的。

三级结构,氨基酸序列


MarineSciences/Vol.41,No.4/201719图1Asnanos1全长cDNA序列及氨基酸序列Fig.1cDNAanddeducedaminoacidsequencesoftheAsnanos1gene黄色底为磷酸化位点;起始密码子atg用红色线表示;终止密码子taa用加粗表示;灰色区域为α螺旋。下划线所指示的区域为保守的-CCHC-锌指结构域,黑色加粗显示的为核心的Cys或HisPhosphorylationsitesaremarkedinyellow;Theinitiationcodon(atg)ismarkedbyredline;Thestopcodon(taa)ischaracterizedinbold;Fiveα-helixedaremarkedwithgray;Conserved-CCHC-zincfingerdomainisunderlined;CysorHisareinbold图2推测的Asnanos1氨基酸序列的三级结构Fig.2Predictedthree-dimensionalstructureoftheAsnanos1gene结果显示(图4),Asnanos1基因在施氏鲟除心脏以外的各组织中均有表达,在雌、雄鱼的鳃、脑、肾、肝脏、脾脏等组织中表达量无显著差异,但在卵巢中的表达量显著高于其他各组织(P<0.05)。3讨论与结论本研究获得了Asnanos1的cDNA全长为1389bp,其中,5′UTR为414bp,3′UTR为279bp以及696bp的ORF。该基因共编码231个氨基酸。Blast分析可知,Asnanos1与nanos2和nanos3在分类进化上的关系较远,而与nanos1聚为一大支。这些结果充分表明本研究所得到的基因序列为Asnanos1。系统进化树结果显示:在nanos1的进化中,施氏鲟与斑点雀鳝聚为一支,但与中华鲟有一定的距离,产生这个现象的原因有待于进一步研究。Asnanos1蛋白氨基酸序列的C端具有两个保守-CCHC-(-Cys-Cys-His-Cys-)锌指结构域,这一结构特征与在其他物种nanos1中也同样存在,是nanos1蛋白发挥功能所必需的。
【作者单位】: 莆田市水产科学研究所;集美大学水产学院;福建农林大学动物科学学院;
【基金】:国家自然科学基金资助项目(41306174) 福建省农业科技重点资助项目(2013N0024) 莆田市科技局项目(2012N16)~~
【分类号】:S917.4

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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本文编号:2551643

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