沙柳SpsLAS基因克

发布时间：2019-11-16 02:30

【摘要】：分枝发育在植物形态构成中占有重要的地位,是影响植物枝型、光合效率、生长量、固碳效率、造林效果及景观等多方面的重要树木性状。本研究以沙柳(Salix psammophila)为材料,利用同源克隆技术获得沙柳LAS(LATERALSUPRESSOR)基因,对其进行生物信息学分析、组织特异性表达分析及超量表达载体的构建。主要研究结果如下:1.通过同源克隆技术获得沙柳LAS基因CDS序列,对其氨基酸序列进行保守区域分析发现,该蛋白具有GRAS蛋白家族典型特征,属于GRAS蛋白家族LS亚家族。2.同源蛋白系统进化分析表明,沙柳SpsLAS蛋白序列与其他物种的LAS蛋白序列的同源性较高,与木本植物中的杞柳、毛果杨亲缘关系最近。3.通过对沙柳SpsLAS基因的组织特异性表达结果分析,可知该基因在沙柳的顶芽部位表达量最高,然后在根、茎3、叶腋、成熟叶、茎1、韧皮部、茎2和木质部依次降低。4.通过酶切产物与35S超量表达载体pMDC32进行LR置换反应后转化到含卡那霉素的LB培养基筛选、测序,结果表明载体构建成功。研究结果表明克隆获得了沙柳SpsIAS基因,该基因功能可能与分枝调控有重要关系。本研究结果为进一步分析LAS基因在木本植物中的功能及探索木本植物GRAS基因家族奠定了基础。
【图文】：

图１邋ＧＲＡＳ家族保守性模体［９８］逡逑Ｆｉ．１邋Ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ邋ｍｏｔｉｆ邋ｏｆ邋ＧＲＡＳ邋ｆａｍｉｌ１９８】逡逑

图２沙柳总ＲＮＡ电泳图逡逑ｌ邋ＲＮＡ邋ｄｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｏｇｒａｍ邋ｏｆ邋Ｓａｌｉｘ的克隆逡逑反转录合成ｃＤＮＡ第一得到目标条带，如图３标条带进行切胶回收，求。将目标基因与入门５ａ大肠杆菌，最后将筛个白色菌斑条带亮度和待下一步测序。逡逑
【学位授予单位】：内蒙古农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：U213.1

【参考文献】

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本文编号：2561617