ACE2基因多态性与新疆墨玉县维吾尔族慢性肾脏病的关系

发布时间：2020-03-23 01:03

【摘要】：目的:探讨ACE2基因多态性与新疆维吾尔族成人CKD的关系。方法:在2013年03月~2014年04月新疆墨玉县农村维吾尔族成人慢性肾脏病(CKD)流行病学调查的数据库基础上,随机抽取资料完整的CKD及健康对照样本共254例,采用聚合酶连反应和限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分型技术对ACE2 G8790A、A1075G两位位点单个核酸多态性(SNPs)进行基因分型鉴定。结果:ACE2基因G8790A位点基因型及等位基因频率分布情况:在女性CKD组中AA基因型频率高于健康对照组(P0.05)。在男性CKD组中A等位基因频率高于健康对照组(P0.05)。ACE2基因A1075G位点基因型及等位基因频率分布情况:在女性CKD并高血压组中AA基因型频率高于非高血压组(P0.05)。结论:ACE2G8790A基因多态性可能与新疆维吾尔族成人CKD有关。ACE2 A1075G基因多态性可能与新疆维吾尔族女性成人CKD合并高血压有关。
【图文】：

GTCA，G8790AＲ:CATTCTCTTCAGCAAAATTTCCATTG，A1075GF:GAAAGGGAGAGAACTTTGGAAACCTG，A1075GＲ:TCCCAAAA-CAGTATCCTTAAGTGGTGA。3．2．2反应体系(10μl)2×GCbuffer5μl，25mmol/LMgCl20．2μl，2．5mmol/LdNTP0．8μl，DNA1μl，引物1μl，DNA聚合酶0．1μl，ddH201．9μl。3．2．3反应条件95℃预变性2min，94℃变性20s，退火温度在起始的11个循环中为65℃～60℃，每个循环递减0．5℃，反应40s，72℃延伸30s。在以后的24个循环中，退火温度固定在59℃，反应30s，最后72℃延伸2min终止所有反应。3．3酶切反应3．3．1反应体系(20μl)包含10×cutsmartbuffer2μl，G8790A限制性内切酶AluI1U，A1075G限制性内切酶MnlI1U，PCＲ产物10μl，ddH207μl，酶切最适温度为37℃，并在DK－8D型电热恒温水槽中过夜12h。3．3．2酶切结果将酶切产物稀释10倍，上3730XL毛细管电泳进行SNP分型。ACE2G8790APCＲ产物片段长度为431bp，用AluI酶切后，不同基因型表现出不同的裂解模式。其中含A等位基因的PCＲ产物可被切开，长度为276bp，而含G等位基因的则无法切开，长度为431bp，GA基因型可部分被切开，长度为276bp，431bp。ACE2基因A1075GPCＲ产物长度为131bp，，用MnlI切酶后，含G等位基因的PCＲ产物可被切开，长度77bp，而含A等位基因的无法切开，长度为131bp，AG基因型则部分被切开，长度为77bp，131bp(见图1～图3)。4统计学方法采用SPSS19．0软件对数据进行?

GTCA，G8790AＲ:CATTCTCTTCAGCAAAATTTCCATTG，A1075GF:GAAAGGGAGAGAACTTTGGAAACCTG，A1075GＲ:TCCCAAAA-CAGTATCCTTAAGTGGTGA。3．2．2反应体系(10μl)2×GCbuffer5μl，25mmol/LMgCl20．2μl，2．5mmol/LdNTP0．8μl，DNA1μl，引物1μl，DNA聚合酶0．1μl，ddH201．9μl。3．2．3反应条件95℃预变性2min，94℃变性20s，退火温度在起始的11个循环中为65℃～60℃，每个循环递减0．5℃，反应40s，72℃延伸30s。在以后的24个循环中，退火温度固定在59℃，反应30s，最后72℃延伸2min终止所有反应。3．3酶切反应3．3．1反应体系(20μl)包含10×cutsmartbuffer2μl，G8790A限制性内切酶AluI1U，A1075G限制性内切酶MnlI1U，PCＲ产物10μl，ddH207μl，酶切最适温度为37℃，并在DK－8D型电热恒温水槽中过夜12h。3．3．2酶切结果将酶切产物稀释10倍，上3730XL毛细管电泳进行SNP分型。ACE2G8790APCＲ产物片段长度为431bp，用AluI酶切后，不同基因型表现出不同的裂解模式。其中含A等位基因的PCＲ产物可被切开，长度为276bp，而含G等位基因的则无法切开，长度为431bp，GA基因型可部分被切开，长度为276bp，431bp。ACE2基因A1075GPCＲ产物长度为131bp，用MnlI切酶后，含G等位基因的PCＲ产物可被切开，长度77bp，而含A等位基因的无法切开，长度为131bp，AG基因型则部分被切开，长度为77bp，131bp(见图1～图3)。4统计学方法采用SPSS19．0软件对数据进行?

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