基于GWAS支持HDAC9基因多态性与缺血性卒中及其中医证候易感性相关性研究

发布时间：2020-03-31 14:25

【摘要】：目的:蛋白去乙酰化酶9基因(Histone deacetylases 9 Gene,HDAC9)为全基因组关联分析(Genome-wide association study,GWAS)在欧洲人群体(3548名IS患者及5972名对照)中筛选出的与缺血性卒中的易感性具有相关性的基因。国内有针对北方人群的研究提示其多态性与缺血性卒中的发作有显著的相关性,但是没有以南方人群为研究人群的相关研究,也没有关于该基因多态性与中医证候易感性的相关性研究,所以本研究通过研究HDAC9基因的2个位点rs2240419及rs2389995的多态性在广东汉族人群中与缺血性卒中及其中医证候易感性的相关性,从而探讨广东汉族人群HDAC9基因单核苷酸多态性与缺血性卒中及其中医证候的易感性的关系,并希望能为进一步研究遗传机制对缺血性卒中的影响提供一定的思路及基础,为中风病中医证候的辨别提供一定的遗传学方面的科学解释。方法:本研究采用前瞻性研究的方法,选择HDAC9基因位点rs2240419及rs2389995作为研究位点,并依据纳入排除标准纳入IS组184例(缺血性卒中组,病例组)及对照组116例。对所有研究对象进行血样采集,然后基于Sanger基因分型技术的运用对该血样提取DNA后对所进行基因分型。与此同时,请经过培训的调查者及医务工作者对所有研究对象进行资料采集,主要包括一般资料、既往史、过敏史、个人史、家族史、神经功能缺损相关评分、中医证候(仅IS组进行中医证候分型)及实验室数据结果,并通过自行设计的研究对象观察表(CRF表)进行记录。最后,将基因分型的结果和CRF表的信息录入Excel软件中建立数据库,并导入SPSS 17.0软件中进行统计分析。结果:1.本研究共纳入IS组184例,其中男性112名,女性72名;对照组116例,其中男性55名,女性61名。2.中医证候方面,对IS组研究对象进行辨别证候得到风证141例,火证13例,痰证121例,血瘀证149例,气虚证82例。3.所有研究对象中,rs2240419位点(n=300)共检测出CC、CT、TT 3种基因型,rs2389995位点(n=291)共检测出AA、AG、GG 3种基因型,由前往后三种基因型分别代表为野生纯合子、杂合子、突变纯合子。4.对所有研究对象进行哈温平衡(Hardy-Weinberg Equilibrium,HWE)检验,最终结果提示IS组与对照组HDAC9基因SNP位点rs2240419及rs2389995的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P0.05)。提示本研究所使用的对照组的对象为随机人群分布,为同一孟德尔群体人群,具有该基因位点群体代表性。5.IS组和对照组基本特征组间比较结果:(1)性别构成比较,差异有统计学意义(P0.02);年龄、年龄分段与BMI构成比较差异无统计学意义(P0.05)。(2)既往史及个人史分组比较中,可见既往脑卒中、既往高血压病、既往糖尿病、既往冠心病、既往高HCY(同型半胱氨酸)、饮酒史和吸烟史这7个项目的差异有统计学意义(P0.05),且均与缺血性卒中出现成正相关;既往TIA(短暂性脑缺血发作)和既往血脂异常、过敏史这3个项目的差异无统计学意义(P0.05)。(3)实验室检验结果分组比较中,可见SBP(收缩压)、DBP(舒张压)、HB(血红蛋白)、TG(甘油三酯)、HDL(高密度脂蛋白)、HCY这6个项目的差异有统计学意义(P0.05);其余项目的差异无统计学意义(P0.05)。(4)多因素分析结果提示年龄、HDL及SBP这3项组间差异有统计学意义(P0.05),年龄和HDL与脑卒中发病呈负相关,SBP与脑卒中发病呈正相关关系,但年龄及SBP这2项可信区间范围均较小,相关程度可能不大。6.IS组和对照组基因多态性组间差异比较结果:(1)单因素及多因素分析结果均提示各基因型的组间差异均无统计学意义(P0.05)(2)通过构建5个遗传模型对缺血性卒中患者(IS组)及对照组进行Logistic回归分析,结果显示位点rs2240419及rs2389995位点的多态性与缺血性卒中的关联性差异无统计学意义(P0.05)。7.非风证组(n=43)和风证组(n=141)基本特征组间比较结果:(1)性别、年龄、年龄分段、BMI、既往史、个人史及实验室检验结果比较差异均无统计学意义(P0.05)。(2)多因素分析方面,所构建模型无统计学意义(P0.05)。8.非痰证组(n=63)和痰证组(n=121)基本特征组间比较结果:(1)性别、年龄、年龄分段及BMI、既往史及个人史组间比较差异均无统计学意义(P0.05)。(2)实验室检验分组比较中,可见HB、TG、TC这3个项目的差异有统计学意义(P0.05);其余9个项目的差异无统计学意义(P0.05)。(3)多因素分析结果提示TG、过敏史这2项的组间差异有统计学意义(P0.05),其中TG与出现痰证呈正相关,且具有一定的具有一定相关程度,而过敏史与出现痰证呈负相关关系。9.非血瘀证组(n=35)和血瘀证组(n=149)基本特征组间比较结果:(1)性别、年龄和年龄分段、既往史、个人史和实验室检验结果组间差异均无统计学意义(P0.05);BMI组成比较,差异有统计学意义(P0.05)。(2)多因素分析结果提示BMI的组间差异有统计学意义且呈正相关关系,但可信区间范围均较小,相关程度可能不大。10.各证候分组之间基因多态性组间差异比较结果:(1)单因素及多因素分析结果均提示各证候分组(非风证组与风证组、非痰证组与痰证组、非血瘀证组与血瘀证组)基因型的组间差异均无统计学意义(P0.05)(2)通过构建5个遗传模型对中风病各证候分组(非风证与风证、非痰证与痰证、非血瘀证与血瘀证)的研究对象进行Logistic回归分析结果显示HDAC9基因的位点rs2240419及rs2389995的多态性在各证候分组(非风证组与风证组、非痰证组与痰证组、非血瘀证组与血瘀证组)的差异均无统计学意义(P0.05)。结论:对于广东汉族人群来说:1.性别为男性、既往脑卒中、高血压病、糖尿病、冠心病、高HCY、饮酒史、吸烟史均可能为缺血性脑卒中发作危险因素。2.实验室检验结果方面,SBP、DBP、HB、TG、HDL、HCY指标均可能是缺血性脑卒中的影响因素。其中HDL可能为缺血性卒中发作的保护因素。3.缺血性卒中患者的中医证候是否为痰证可能与HB、TG和TC指标存在关联。其中TG升高可能增加痰证出现的可能性。4.缺血性卒中患者的中医证候是否为血瘀证与可能BMI指标存在关联,越肥胖的人可能越易出现血瘀证。5.HDAC9基因的rs2240419位点及rs2389995位点的多态性与缺血性卒中发病易感性可能无关。6.HDAC9基因SNP位点rs2240419及rs2389995的多态性与中风病中医证候(风证、痰证、血瘀证)的易感性可能无关。7.本研究的研究结果与欧洲地区及我国北方区域同类基因位点的研究所报道的结果不同,未见其阳性发现,但是并不能据此就明确否认该基因位点的多态性与缺血性卒中及其中医证候的易感性不存在关联性。不排除是本研究与所参考的研究在研究对象、干扰因素控制等方面的研究方案不同,或者本研究本身存在的一定的局限与不足导致阴性结果的产生。8.目前从基因层面对于证候的研究仍处于初始发展阶段,下一步有必要针对这些局限与不足完善方案,为将来进一步研究基因多态性与缺血性卒中及其中医证候的易感性的相关性提供更优质有效的研究方案。
【学位授予单位】：广州中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R277.7

【参考文献】