应激反应基因遗传变异与儿童注意缺陷多动障碍的关联研究

发布时间：2020-04-15 15:43

【摘要】：目的:探讨应激反应基因遗传变异与儿童ADHD的关联,为ADHD的发病机制提供新的思路和理论依据。方法:采用病例对照研究设计,在武汉地区纳入406名病例和432名对照。病例组均为经SNAP-IV确诊的新发病例,对照组为同期健康体检儿童。所有研究对象均使用韦氏智力量表进行智力评估,IQ≥70分;并通过PSQ量表、CPT注意测试和脑电图对儿童临床特征进行测评。现场填写母孕期应激情况调查表,并采集静脉血2ml,使用中通量基因分型平台Sequenom Mass ARRAY对应激反应基因的遗传变异进行基因分型检测。在SPSS 21.0软件中采用t检验和χ2检验比较一般人口学特征和候选SNP的分布特征;采用t检验、方差分析对研究对象的临床特征得分进行组间差异性检验;采用多元logistic回归模型研究分析候选SNP位点不同遗传模型与ADHD之间的关联;并采用Bonferroni校正法对多重比较结果进行校正。采用Logistic回归模型分析母孕期应激与ADHD发病风险的关联;采用相加和相乘交互作用模型分析阳性关联遗传变异之间及其与母孕期应激的交互作用在ADHD发生中的效应。结果:1.经Bonferroni校正后,发现NR3C1基因rs6191位点和SLC6A4基因rs25531位点与ADHD易感性相关。rs6191在共显性模型(突变纯合v.s.野生纯合)(OR=0.566,95%CI=0.380-0.844)、显性模型(OR=0.564,95%CI=0.389-0.819)和加性模型(OR=0.694,95%CI=0.458-0.858)中均与ADHD发病风险显著相关;rs6191还与注意缺陷临床症状(P=0.006)、ADHD-C亚型(P=0.006)和共患焦虑-抑郁障碍(P=0.007)相关。rs25531在显性模型(OR=1.573,95%CI=1.120-1.938)和加性模型(OR=1.380,95%CI=1.111-1.714)中与ADHD发病风险显著相关;rs25531还与注意缺陷临床症状(P=0.003)和ADHD-I亚型(P=0.007)相关。2.多元logistic回归分析显示母孕期应激与ADHD发病显著相关(OR=2.388,95%CI=1.575-3.620)。交互作用分析发现,两阳性关联位点rs6191与rs25531在ADHD的发生中存在显著的交互作用;它们分别与母孕期应激在ADHD发病中存在显著交互作用。同时携带rs6191(CA+AA)基因型与rs25531(AG+GG)基因型的儿童与同时携带CC和AA基因型的儿童相比发病风险显著升高(OR=2.153,95%CI=1.286-3.394);母孕期高水平应激且携带rs6191(CA+AA)基因型的儿童发病风险是母孕期低水平应激且携带CC基因型儿童的2.433倍(95%CI=1.181-1.739,P(27)0.001);母孕期高水平应激且携带rs25531(AG+GG)基因型的儿童发病风险是母孕期低水平应激且携带AA基因型儿童的2.630倍(95%CI=1.317-2.039,P(27)0.001)。结论:应激反应基因NR3C1 rs6191位点和SLC6A4 rs25531位点与儿童ADHD的易感性相关;且两位点之间,及其与母孕期应激在ADHD发病中存在显著的交互作用。发现的阳性关联位点还需在不同地区、不同人群进行验证,并对其生物学功能进行鉴定。
【图文】：

序列,琼脂糖电泳,人群,多态性

图 1 琼脂糖电泳检测部分 DNA 样本结果1.3.2 候选基因遗传变异位点筛选单核苷酸多态性（SNP）由单个核苷酸变异引起的 DNA 序列多态性，，单个碱基的改变在人群中的发生频率(等位基因频率)在 0%到 50%之间[86]。SNP 是人类可遗传变异中最常见的一种，占所有已知多态性的 90%以上。目前已发现人类基因组 SNP 总数有达 400 万各，平均每 1000 个碱基中就有 1 个[87]。部分 SNP会直接影响到蛋白质结构或基因表达水平，从而参与疾病遗传机制。本研究中综合考虑以下信息进行 SNP 位点的筛选：在 HapMap 数据库（http://hapmap.ncbi.nlm.nih.gov/cgi-perl/gbrowse/hapmap28_B36/）中公布的中国汉族人群（CHB）数据中获取 NR3C1 和 SLC6A4 两个基因全部 SNP 位点，然后通过 SNP-info 数据库（https://snpinfo.niehs.nih.gov/snpinfo/snptag.html）筛选出标签 SNP（tagSNP）和有功能注释的潜在功能 SNP，过滤条件选择 MAF 0.1，r2 0.8的 CHB 人群，结合 F-SNP 数据库[88]（http://compbio.cs.queensu.ca/F-SNP/）中各

流程图,流程图,功能注释,整合分析

图 2 F-SNP 功能预测流程图表 1 候选 SNP 功能注释整合分析基因 SNP TagSNP SNPfunc F 得分 Regulome DBNR3C1 rs41423247 N -- 0.176 5rs10052957 N -- 0.268 5rs6191 N miRNA(miRanda) 0.217 --SLC6A4 rs3813034 N -- 0.204 6rs12449783 Y -- 0.176 4rs25531 N TFBS 0.217 5rs2020939 Y -- 0.000 1f表 2 候选基因 SNP 位点基本信息
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R749.94

【参考文献】