草莓FvWRKY71基因的克隆与功能分析

发布时间：2020-04-16 00:48

【摘要】：WRKY是一大类转录因子,在胁迫反应和植物发育过程中很重要。到目前为止,在拟南芥中已经有许多报道,但关于草莓WRKY功能知之甚少。本研究从森林草莓(Fragaria vesca)中克隆出FvWRKY71基因编码区序列,构建了其过表达和沉默载体,获得了转基因拟南芥和草莓植株,通过转录组测序技术分析得到相关差异表达的基因,为揭示草莓WRKY71基因的功能和作用机理打下基础。主要结果如下:(1)利用RT-PCR技术从森林草莓资源‘Ruegen’中克隆出FvWRKY71基因序列,基因编码区序列全长1107 bp。转录活性分析和亚细胞定位实验证明FvWRKY71是具有转录激活活性的核定位蛋白。(2)利用qRT-PCR方法检测了‘Ruegen’草莓不同组织中的相对表达量,FvWRKY71主要在果实中表达,并且随着果实的成熟表达量显著升高。红果期的转录水平最高,其表达水平约为绿果期的6倍,而在根、叶柄、叶片和花中表达量相对较低。(3)构建了FvWRKY71基因的植物过表达载体和RNAi载体,并通过农杆菌介导的遗传转化将其转化到拟南芥和草莓中,得到过表达FvWRKY71的拟南芥转基因株系3个,过表达FvWRKY71的草莓转基因株系4个,RNAi草莓转基因株系6个。通过观察表型和统计分析说明FvWRKY71具有促进开花和增加分枝的功能。(4)通过RNA-seq分析了过表达FvWRKY71的拟南芥转基因植株与非转基因植株在开花和分枝有关基因表达上的差异。筛选到激素相关基因LBO1、AHP6、GA20ox2、GA3ox1、YUC1和CPK6等以及开花相关基因LFY、FPF1、FUL、SPL3和FLC等,为缩短蔷薇科植物的开花时间提供研究思路。
【图文】：

1 草莓的开花调控模式（Koskela 等，2012ing the control of flowering in Fragaria vesca (展中普遍存在，影响植物结构形态，因此d Muhr，2015），理想的植物结构有利是由腋生分生组织（AM）分化而来腋生分生组织的生长。AM 首先形成具成分枝结构（McSteen and Leyser，200传因子的影响，激素和环境因素主要调控植物的分枝发育。分枝或分蘖的分枝越少产量越高，这在农业生产中意种生物学手段，研究发现了许多基因可取得一定进展。另外，植物激素对分枝发

沈阳农业大学硕士学位论文的过表达转基因拟南芥地上部组织为材料，野生型作为重复和三个技术重复。采用 Illumina 技术进行转录组测分析流程分别见图 2 和图 3。
【学位授予单位】：沈阳农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S668.4

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 姜慧燕;;草莓营养品质间相关性研究[J];杭州农业与科技;2016年04期

2 宗静;王琼;马欣;齐长红;于静n\;陈庆江;王俊英;;北京市草莓产业发展现状与问题对策[J];中国蔬菜;2018年07期

3 郭正兵;冯英娜;王全智;;茉莉酸类物质在草莓果实发育中的作用及其分子机理分析[J];西北植物学报;2015年12期

4 穆太昌;;草莓的保鲜方法与深加工[J];农业知识;2018年02期

5 ;草莓的贮藏保鲜技术[J];农村科学实验;2017年12期

6 李楠;;科学解读“激素草莓”[J];中国食品;2017年05期

7 崔建玲;;关于草莓,你知道多少[J];农产品市场周刊;2017年11期

8 李楠;;使用植物激素的草莓到底能不能吃?[J];创新时代;2017年05期

9 宋佳;;草莓各类畸形果防治方法有区别[J];农村科学实验;2017年04期

10 郭婧;安承松;周路霜;;壳聚糖复合涂膜剂对草莓保鲜效果的研究[J];饮食科学;2017年06期

相关会议论文 前10条

1 孙瑞W，

本文编号：2629192