高粱SbER2基因的抗旱生物学功能解析

发布时间：2020-04-18 14:49

【摘要】：类受体激酶是植物体内信号分子的重要受体,几乎参与了所有的细胞代谢过程,包括生长发育、表达调控和逆境反应等。ERECTA是从拟南芥中分离得到的一种类受体激酶基因,该基因在调控花和叶等地上器官的生长发育、权衡拟南芥光合作用和蒸腾作用、参与激素调节、识别与转导光信号以及抗病抗逆信号等生理生化过程中扮演重要角色。本研究以从高粱中分离克隆的一种ERECTA基因(SbER2)为研究对象,通过转入拟南芥原生质体进行亚细胞定位,构建VE2表达载体并进行玉米遗传转化,对获得的过表达SbER2转基因植株与对照非转基因植株进行不同程度干旱胁迫处理,分析各项抗旱性指标在不同处理之间的差异,解析SbER2基因在抗旱中的生物学功能。主要研究结果如下:(1)运用生物信息学方法对SbER2基因进行亚细胞定位预测分析,并成功构建了pE3449-SbER2载体,转导拟南芥原生质体,通过共聚焦显微镜观察GFP位置,初步确定SbER2基因蛋白在细胞膜、叶绿体、线粒体和细胞质基质中表达。(2)构建VE2表达载体,通过农杆菌介导转化法将目的基因SbER2转入玉米材料ZPM9,并进行分子检测,成功获得SbER2转基因植株;(3)将SbER2转化T2代植株SbER2-1、SbER2-2和非转基因对照植株ZPM9进行不同程度的干旱胁迫,发现过表达SbER2基因提高了植株的净光合速率和水分利用效率,降低了植株体内丙二醛的积累,增强了玉米受体材料对干旱胁迫的耐受程度。
【图文】：

25图 3.2 pE3449 载体的双酶切验证2 Verification of pE3449 carrier by double enzyMarker 1Kb 由上至下依次为（Kb）：10、8、6、5、4、ker 15Kb 由上至下依次为（Kb）：15、10、7.5、5、3、切产物的电泳条带约为4Kb，和pE3449载可以确定 6 条带均为阳性条带，将凝胶条带

图 3.1 pE3449-SbER2 表达载体的的构建流程Figure 3.1 The construction process of pE3449-SbER2 expression vectorpE3449 载体的构建E3449 载体经过转化、摇菌和提取质粒后，测得质粒浓度大部00ng/ul，满足实验要求，可以进行后续的实验操作。通过 KpnI/Xm9 载体，进行电泳、凝胶成像仪（Tanon 1600）成像分析（图 3.2）。图 3.2 pE3449 载体的双酶切验证
【学位授予单位】：山西大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S514

【参考文献】

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本文编号：2632205