烟曲霉内醚糖激酶基因lgk1敲除及功能初步研究

发布时间：2020-04-27 16:36

【摘要】：烟曲霉感染免疫力低下者引起侵袭性曲霉病(IA),并成为重症患者死亡的主要原因之一,然而其发病机理和毒力因子还不清楚。内醚糖激酶(LGK)是最近发现的可能与细胞壁代谢相关的真菌激酶。研究烟曲霉内醚糖激酶基因的生理功能具有重要的科学意义。生物信息学分析显示烟曲霉具有3个内醚糖激酶基因(lgk1、lgk2、lgk3),而弱致病的黄曲霉、黑曲霉,土曲霉和构巢曲霉分别具有1到2个内醚糖激酶基因。基因检测发现,烟曲霉内醚糖激酶基因组成型表达,除构巢曲霉菌外,其它曲霉菌的内醚糖激酶基因诱导型表达。在孢子萌发生长阶段,烟曲霉lgk1大量表达,lgk2,lgk3微弱表达。在菌丝生长阶段,lgk1和lgk2大量表达,lgk3微弱表达。采用同源重组技术以及CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除掉烟曲霉lgk1。PCR分别验证基于同源重组技术构建的lgk1缺失菌株ZS1和基于CRISPR/Cas9技术构建的lgk1缺失菌株ZS2。基因检测发现ZS1和ZS2的lgk1没有表达。测序ZS2菌株的lgk1,证实lgk1被完全删除。表型分析显示在含有内醚糖为唯一碳源和能源的基本培养上,ZS2不能生长,ZS1微弱生长。孢子萌发率检测发现ZS1降低14.50%,ZS2降低23.32%。菌丝生长干重检测发现较ZS1降低6.62%,ZS2降低5.44%。本研究结果初步表明烟曲霉lgk1与孢子萌发和菌丝生长相关,是潜在的致病因子。
【图文】：

烟曲霉侵染人体过程

糖类热解生成内醚糖[27]
【学位授予单位】：武汉轻工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：Q933

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 张恩远;;一例鸡烟曲霉菌病的诊治[J];畜牧兽医科技信息;2017年04期

2 邬丽红;陈一强;孔晋亮;罗劲;黄宏;侯长春;;肉桂醛对烟曲霉菌体外生物膜的影响[J];重庆医学;2016年03期

3 王晓闽;;一例鸡烟曲霉菌病的诊治[J];山东畜牧兽医;2010年05期

4 夏梅玲;符大龙;吴剑锋;;鸭烟曲霉菌病的诊治[J];上海畜牧兽医通讯;2005年06期

5 徐国光,巫善明,骆成榆,钮善福,徐伟民,陈良;重症严重急性呼吸综合征合并肺烟曲霉菌病一例[J];中华传染病杂志;2003年04期

6 马建军;鹌鹑烟曲霉菌病的诊治[J];浙江畜牧兽医;2003年02期

7 黄健晖;雏鹅烟曲霉菌病的诊断与防治[J];福建畜牧兽医;2003年05期

8 梁基肖,成蕊,徐孟丽,王德坤;雉鸡雏烟曲霉菌病的诊断[J];中国兽医科技;1996年12期

9 M.Pal;李进昌;;烟曲霉与动物眼睛感染关系的研究[J];国外兽医学.畜禽疾病;1987年04期

10 朴容铉;发霉饲料引起雏鸡烟曲霉菌病[J];中国兽医杂志;1988年04期

相关会议论文 前10条

1 冯素娥;张选钧;;烟曲霉菌致曲霉性支气管咯血1例[A];2005全国首届深部真菌感染学术会议论文集[C];2005年

2 ;致病及过敏性烟曲霉菌的基因组编码序列测定[A];第六届全国优生科学大会论文汇编[C];2006年

3 王红旗;王慧芬;李波;李永利;;左侧胸水检出烟曲霉菌一例报告[A];2005全国首届深部真菌感染学术会议论文集[C];2005年

4 陈园;陆玲;张石柱;;烟曲霉毒力因子半乳糖胺半乳聚糖的调控机制研究[A];多彩菌物 美丽中国——中国菌物学会2019年学术年会论文摘要[C];2019年

5 张玉娜;赵巧玉;张少飞;陶朝欣;邢江涛;;感冒后引起侵袭性肺烟曲霉菌肺炎1例诊治过程[A];湖南中医药大学学报2016/专集：国际数字医学会数字中医药分会成立大会暨首届数字中医药学术交流会论文集[C];2016年

6 沈洁;刘建钗;刘彦威;刘娜;史瑞雅;张欣;李博;;鸡白色念珠菌和烟曲霉双重SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR方法的建立[A];中国兽医病理学2017年学术研讨会暨兽医病理学分会第九次全国会员代表大会论文集[C];2017年

7 周云连;张园园;徐丹;陈志敏;;儿童变应性支气管肺烟曲霉菌病2例及文献复习[A];第十三届江浙沪儿科学术会议暨2016年浙江省医学会儿科学学术年会论文汇编[C];2016年

8 张元炜;Daanvan Aalten;陆玲;;基于片段的药物筛选技术鉴定烟曲霉潜在药靶PmmA和Erg10A的研究[A];中国菌物学会2018年学术年会论文汇编[C];2018年

9 张欢欢;魏昂;;可见光催化杀灭烟曲霉菌[A];2019第三届全国光催化材料创新与应用学术研讨会摘要集[C];2019年

10 蔡闯;卓超;吴璐璐;杨新云;钟淑卿;钟南山;;难治性侵袭性肺曲霉菌病的补救治疗--1例报道并文献复习[A];第8届全国抗菌药物临床药理学术会议暨北京大学临床药理研究所成立三十周年论文集[C];2010年

相关重要报纸文章 前1条

1 印继华 温晓兰 印国亮;高效养鹅应注意的几个问题[N];中国畜牧兽医报;2006年

相关博士学位论文 前10条

1 崔宁;戊唑醇诱导的烟曲霉对三唑类抗真菌药物的抗药性及其抗性机理[D];浙江大学;2018年

2 张元炜;曲霉潜在药靶PmmA、Erg10A和AkrA的生物学功能及其分子特征研究[D];南京师范大学;2017年

3 宋s，

本文编号：2642432