ATP6AP2基因多态性与2型糖尿病肾病发病及其临床表型的相关性研究

发布时间：2020-05-07 08:23

【摘要】：目的:研究ATP6AP2基因分型、等位基因频率、单倍体型与糖尿病肾病的相关性,阐述遗传性易感位点在糖尿病肾病发生发展中的作用,为糖尿病肾病防治提供一定的帮助。方法:收集2015年12月至2016年12月期间吉林大学中日联谊医院体检中心体检的患者46例,为正常对照组(Control group);内分泌科及肾内科住院的2型糖尿病患者100例,均符合1999年WHO糖尿病诊断标准,分为2型糖尿病组(Type 2 diabetes,T2DM)和糖尿病肾病组(Diabetic nephropathy,DN)。SNP位点等位基因的识别采用连接酶连接反应的高特异性实现,然后通过引入不同长度的非特异序列在连接探针末段,并通过连接酶加接反应获得位点对应的不同长度连接产物,利用标记荧光的通用引物对连接产物进行PCR扩增,通过荧光毛细管电泳对扩增产物进行电泳分离,最后通过对电泳图谱的分析获取各个SNP位点的基因型。研究ATP6AP2基因多态性与2型糖尿病肾病发病及临床表型的相关性。结果:1.糖尿病肾病组空腹血糖、胆固醇、肌酐、胱抑素C、体重指数、收缩压、舒张压均明显高于正常对照组和糖尿病组,具有统计学意义(P0.05),糖尿病组与糖尿病肾病组甘油三酯明显高于正常对照组,具有统计学意义(P=0.002)。2.糖尿病肾病的相关危险因素进行Logistic回归分析,结果表明空腹血糖、胱抑素C、收缩压是糖尿病肾病的危险因素(P0.05)。3.ATP6AP2基因的rs1060063(C/T)CC基因分型、等位基因C频率2型糖尿病组分布频率高于正常对照组(P0.05);ATP6AP2基因的rs2971599(A/C)基因分型与等位基因分布频率2型糖尿病组与正常对照组无统计学差异。4.ATP6AP2基因的rs1060063与rs2971599单体型分析显示C-C单倍体型2型糖尿病组的分布频率高于正常对照组(P=0.013),其糖尿病发病风险系数为2.136。5.ATP6AP2基因的rs1060063(C/T)等位基因C频率糖尿病肾病组高于正常对照组(P=0.028);ATP6AP2基因的rs1060063与rs2971599单体型分析显示C-C单倍体型糖尿病肾病组的分布频率高于正常对照组(P=0.013),其糖尿病肾病发病风险系数为2.248;T-C单倍体型糖尿病肾病组的分布频率低于正常对照组(P=0.010),其糖尿病肾病发病风险系数为0.456。6.ATP6AP2基因的rs1060063与rs2971599基因分型、等位基因频率、单倍体型2型糖尿病组与糖尿病肾病组无统计学差异。7.rs1060063位点各基因分型糖尿病肾病相关生化指标差异分析,TC型患者高密度脂蛋白低于CC、TT型,具有统计学意义(P0.05)。8.rs2971599位点各基因分型糖尿病肾病相关生化指标差异分析,AA型患者甘油三酯明显高于CA、CC型,具有统计学意义(P0.05);AA型患者舒张压明显高于CA、CC型,具有统计学意义(P0.05);CA型患者肌酐水平明显高于AA、CC型,具有统计学意义(P0.05)。结论:1.ATP6AP2 rs1060063基因位点与中国东北汉族人群糖尿病的发病风险具有相关性,其基因型CC、基因C频率为发病风险基因位点。2.ATP6AP2基因的rs1060063和rs2971599单体型C-C是中国东北汉族人群糖尿病的易感因素,携带此单体型个体糖尿病的发病风险是正常人2倍。3.ATP6AP2基因的rs1060063和rs2971599与中国东北汉族人群糖尿病肾病的发病风险无相关性;但与糖尿病肾病患者的舒张压升高及甘油三酯、血肌酐水平增高具有相关性。
【图文】：

原理图,分型,原理图,筛查

S138/）进行 ATP6AP2 基因标签 SNP 筛查。筛查基因名称：ATP6AP2，筛查基因范围包括上游 2000bp 的基因全长 SNP 的标准为：（1）人群为中国汉族人；（2）MAF 值≥5%；（3）S置为上游启动子区、编码区、UTR 区；（4）标签 SNP。2.4 ATP6AP2 基因 SNP 分型基因分型方法为 SNPscanTM 多重 SNP 分型，该技术的基本原理是采用酶连接反应的高特异性实现对 SNP 位点等位基因的识别，然后通过在连接末段引入不同长度的非特异序列以及通过连接酶加接反应获得位点对应的长度连接产物，利用标记荧光的通用引物对连接产物进行PCR扩增，，通过荧光管电泳对扩增产物进行电泳分离，最后通过对电泳图谱的分析获取各个SNP 位基因型，具体检测由上海天昊生物科技有限公司完成。具体原理见图3-1。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R587.2;R692.9

【参考文献】