MTX相关药物基因多态性在儿童急性淋巴细胞白血病中的应用探讨

发布时间：2020-05-22 21:02

【摘要】：研究背景白血病(leukemia)是发生于儿童造血系统的恶性疾病,居小儿恶性肿瘤中发病率的首位,其中急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)约占2/3。叶酸拮抗剂甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)是目前治疗急性淋巴细胞白血病的重要药物之一,它主要通过竞争性抑制二氢叶酸还原酶的活性,抑制二氢叶酸向四氢叶酸转化,从而影响细胞DNA的形成,诱导细胞凋亡。同时,大剂量的甲氨蝶呤可透过血脑、血睾屏障,对髓外白血病复发有很好的预防作用。然而,甲氨蝶呤体内代谢通路较为复杂,影响因素繁多,对肿瘤细胞的选择性较差,在杀灭肿瘤细胞的同时对正常细胞也造成影响,其疗效、毒副作用的个体差异较大,限制了该药物在临床中的应用。目前认为,药物代谢酶相关基因的多态性是不同个体对药物反应及耐受性不同的根本原因,但其结论并不一致。研究目的1.检测分析急性淋巴细胞白血病患儿的谷胱苷肽S转移酶P1(GSTP1)、三磷酸腺苷结合盒转运B1(ABCB1)、亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因各基因型的分布频率。2.对各基因位点不同基因型与临床发生不良反应之间的关系进行分析,了解MTX基因多态性与甲氨蝶呤相关药物不良反应发生概率之间的相关性,为更好的指导甲氨蝶呤的临床应用提供研究基础。研究方法:1.病例资料:选取山东大学齐鲁医院儿童医疗中心自2015年6月至2017年6月收治的标危组急性淋巴细胞白血病患儿共47例,所有患儿均经形态学-免疫学-细胞遗传学-分子生物学(morphology-immunophenotype-cytogenetics-molecular biology,MICM)确诊并经过微小残留病(Minor residual disease,MRD)监测确定为标危组。2.MTX基因多态性的检测:留取ALL患儿外周血样本3ml,EDTA防凝,通过聚合酶链反应-芯片杂交技术测定其基因序列。3.MTX基因多态性与MTX不良反应的关系:所有患儿均接受CCCG-ALL-2015方案行化疗治疗,经诱导治疗(VDLD方案)、强化(CAM方案)治疗后,给予大剂量甲氨蝶呤(HDMTX)方案治疗,每14日给予甲氨蝶呤3g/m22静脉24小时持续注射,共四次。HDMTX方案治疗结束后所有患儿继续接受VD+6-MP+MTX方案维持治疗,治疗期间每周给予患儿甲氨蝶呤25mg/m2f 口服治疗。定期对患儿血常规、肝肾功、MTX血药浓度进行观察记录,按照WHO化疗副反应分级标准评价患儿不良反应发生情况及程度并进行分级,采用IBMSPSS22.0版软件对数据进行分析。研究结果:1.MTHFR基因677位点存在CC、TT、CT三个亚型,其比例分别为CC型21.3%,TT型42.5%,CT型36.2%。分析其各基因型与ALL患儿接受HDMTX方案治疗期间发生高血药浓度之间的相关性、HDMTX方案治疗期间及维持治疗期间发生肝功能异常、骨髓抑制等不良反应的相关性。结果显示:HDMTX方案治疗时,携带CC型基因的患儿发生骨髓抑制的风险明显低于CT+TT型的患儿(χ 2=4.812,P=0.028),携带CT+H基因型的患儿发生骨髓抑制的风险为携带CC型的患儿1.181 倍(95%CI:1.018-1.370)。2.GSTP1基因313位点存在从、AG、GG三个亚型,本次研究中,其比例分别为AA型70.2%,GA型29.8%,GG型0%。分析GSTP1 A313G基因各基因型与ALL患儿接受HDMTX方案治疗期间发生高血药浓度之间的相关性、HDMTX方案治疗期间及维持治疗期间发生肝功能异常、骨髓抑制等不良反应的相关性。结果显示:GSTP1 A313G基因多态性与HDMTX方案治疗期间发生高血药浓度,HDMTX方案及维持治疗期间发生肝功能异常、骨髓抑制之间的相关性无显著性差异(P0.05)。3.ABCB1基因3435位点存在CC、CT、TT三个亚型,本次研究中,其比例分别为40.4%、42.6%、17%。分析其各基因型与ALL患儿接受HDMTX方案治疗期间发生高血药浓度之间的相关性、HDMTX方案治疗期间及维持治疗期间发生肝功能异常、骨髓抑制等不良反应的相关性。结果显示:ABCB1 C3435T基因多态性与HDMTX方案治疗期间患儿出现高血药浓度之间的相关性无显著性差异(P0.05),与HDMTX方案治疗期间、维持治疗期间患儿出现骨髓抑制、肝功能异常之间的相关性无显著性差异(P0.05)。4.MTHFR基因1298位点AA、AC、CC三个基因亚型比例分别为74.4%,21.3%,4.3%。分析其各基因型与ALL患儿接受HDMTX方案治疗期间发生高血药浓度之间的相关性、HDMTX方案治疗期间及维持治疗期间发生肝功能异常、骨髓抑制等不良反应的相关性。结果显示:MTHFRA1298C基因多态性与HDMTX方案治疗期间患儿出现高血药浓度之间的相关性无显著性差异(P0.05),与HDMTX方案治疗期间、维持治疗期间患儿出现骨髓抑制、肝功能异常之间的相关性无显著性差异(P0.05)。研究结论:1.MTHFR C677T基因多态性分布与ALL患儿HDMTX方案治疗期间发生骨髓抑制有关,携带CC型基因的患儿发生骨髓抑制的风险明显低于CT+TT型的患儿。2.MTHFR、ABCB1、GSTP1基因与HDMTX方案治疗期间发生药物排泄延迟之间的相关性无显著性差异。3.MTHFR A1298C、ABCB1 C3435T、GSTP1 A313G 基因多态性分布与 ALL 患儿接受MTX治疗期间发生药物相关不良反应之间的相关性无显著性差异。
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R733.71

【参考文献】