电针对去卵巢大鼠Wnt3a和β-catenin的基因及蛋白表达影响的实验研究

发布时间：2020-06-23 17:39

【摘要】：目的探究电针对去卵巢骨质疏松模型大鼠骨密度、生物力学变化及Wnt3a和β-catenin的基因及蛋白表达的影响,从分子水平揭示电针对去卵巢大鼠的作用机制。方法1动物分组与干预方法选取60只SPF级雌性SD大鼠,日龄60d左右,体质量180~220g,随机抽取24只分为空白组和假手术组,每组12只。假手术组不切除双侧卵巢只暴露;其余行双侧切卵巢法建立骨质疏松模型大鼠,模型复制成功后,随机分成模型组、药物组、针刺组,每组12只。造模后饲养13周,检测骨密度和骨矿物含量以证实骨质疏松症模型复制成功。之后开始治疗,针刺组取“肾俞”、“脾俞”、“三阴交、“足三里”,每次电针刺激30min并灌服与药物组相同体积的蒸馏水,每日1次,连续治疗5d,间隔2d,20d为1个疗程,共治疗3个疗程;药物组大鼠以戊酸雌二醇水溶液灌胃,疗程同针刺组;空白组不予处理,常规饲养;模型组、假手术组大鼠灌服与药物组相同体积的蒸馏水,疗程同针刺组;各组大鼠每周称重1次,以便调整给药剂量。治疗期结束后麻醉处死大鼠,分离股骨、胫骨和第4腰椎,保存待用。2指标检测2.1全身骨密度及股骨、腰椎骨密度检测使用双能X线骨密度仪(DXA)检测造模13周后全身骨密度,以及治疗结束后左侧股骨和腰椎的骨密度。2.2生物力学检测(1)三点弯曲试验:将检测完骨密度的左侧股骨放置在加载平台上,检测完,记录并计算最大载荷和弹性模量。(2)压缩试验:将检测完骨密度的椎骨分离出第4腰椎,放置在加载平台上,记录并计算最大载荷和弹性模量。2.3 Wnt3a、β-catenin基因表达:RT-PCR分析法检测。2.4 Wnt3a、β-catenin蛋白表达:免疫组化法检测。结果1.大鼠全身及股骨、腰椎骨密度测定结果饲养13周时,全身骨密度检测结果显示,模型组与空白组比较,大鼠的全身骨密度和骨矿物含量显著降低(P0.05),证明骨质疏松模型建立成功。治疗3个疗程后,股骨、腰椎骨密度检测结果显示,模型组与空白组及假手术组比较,骨密度显著降低(P0.05);针刺组和药物组与模型组比较,大鼠骨密度显著增高(P0.05);针刺组、药物组与假手术组比较,差异有统计学意义(P0.05)。2.生物力学检测三点弯曲试验、压缩实验结果:模型组与假手术组比较,弹性模量、最大载荷显著降低(P0.05)。药物组和针刺组与模型组比较,药物组大鼠弹性模量、最大载荷显著增高(P0.05),针刺组和药物组与假手术组比较,差异有统计学意义(P0.05)。3.Wnt3a和β-catenin基因表达模型组Wnt3a和β-catenin蛋白表达量最低与空白组和假手术组相比Wnt3a和β-catenin基因表达量显著下降(P0.05);经过药物或针刺干预后,Wnt3a和β-catenin蛋白表达显著升高,与模型组相比具有统计学意义(P0.05)4.Wnt3a和β-catenin蛋白表达模型组Wnt3a和β-catenin基因表达量最低与空白组和假手术组相比Wnt3a和β-catenin蛋白表达量显著下降(P0.05);经过药物或针刺干预后,Wnt3a和β-catenin基因表达显著升高,与模型组相比具有统计学意义(P0.05)。结论针刺能有效增加大鼠骨密度,减少骨量流失,改善骨生物力学的性能,对绝经后骨质疏松症的治疗作用机制,可能是通过调控Wnt3a(起始因子)和β-catenin(介导因子)的蛋白及基因表达作用,来激活Wnt信号通路,这一信号转导途径在整个成骨细胞分化增殖过程中起着重要的作用,以此调节骨重建系统的平衡,从而达到治疗效果。
【学位授予单位】：甘肃中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R245
【图文】：

大鼠,基因表达,基因,针刺

比较：*P>0.05，**P＜0.05；与模型组比较：▲P＜0.0骨 Wnt3a 基因表达结果 6 所示，模型组 Wnt3a 基因表达量最低，与空白组和假P＜0.05）；经药物或针刺干预后，Wnt3a 基因表达显统计学意义(P＜0.05)。表 6 各组大鼠 Wnt3a 基因表达量比较（ X ±S）n MOD12121212121.014±0.181.093±0.260.609±0.21.505±0.512.050±0.82较，**P＜0.05。

大鼠,去卵巢大鼠,电针,针刺

电针对去卵巢大鼠 Wnt3a 和β-catenin 的基因及蛋白表达影响的实验研究表 8 各组大鼠 Wnt3a 蛋白表达量比较（ X ±S）组别 n MOD空白组假手术组模型组药物组针刺组121212121297.25±11.409**94.583±10.384**83.616±4.088132.928±6.381**129.6±5.991**注：与模型组比较，**P＜0.05。

【参考文献】