LKB1基因启动子区甲基化与Peutz-Jghers综合征息肉形成相关性的研究

发布时间：2020-06-26 18:50

【摘要】：Peutz-Jeghers综合征(Peutz-Jeghers Syndrome,PJS)是一种罕见的常染色体显性遗传病,以皮肤黏膜的色素沉着、胃肠道多发性息肉及具有遗传性和肿瘤易感性为特征。目前已经知道抑癌基因LKB1的胚系突变是大部分PJS患者致病的原因。LKB1多种突变的类型均与PJS的发病相关,也有文献报道相当一部分PJS患者的LKB1基因并未发生突变,提示除此之外,还有其他尚未阐明的机制参与了PJS的形成。家族性PJS患者中有66%~94%存在LKB1基因胚系突变失活,包括缺失、点突变或插入等多种突变方式。散发病例只有约16.7%能够找到LKB1基因突变。既往研究发现,LKB1启动子区高甲基化介导的转录沉默可能参与PJS发病机制中。而甲基化是表观遗传修饰的一种方式。表观遗传是指在不涉及DNA序列改变的前提下,使基因表达发生改变的机制或者现象。DNA甲基化作为表观遗传学的重要机制之一,在维持基因组和染色体构象的稳定、X染色体的失活、基因印记、基因沉默起着重要作用,与肿瘤的发生、发展有密切联系。我们发现在既往的研究中检测基因甲基化采用的方法是甲基化特异性PCR(MSP)法,该方法存在检测位点较少、灵敏度及特异性相对较低的问题。在本研究当使用了亚硫酸盐PCR测序法(BSP),该法可以检测一整段Cp G岛的甲基化情况,不仅能够做到定性,更能准确的定量,从而克服MSP方法的弊端。本研究通过收集50例PJS患者息肉标本(其中3例PJS息肉伴结肠黏液腺癌)和20例正常肠黏膜利用亚硫酸盐PCR测序,并进行对比。探讨LKB1基因启动子区甲基化与PJS息肉形成的关系。在我们的研究中亚硫酸盐PCR测序结果显示,50例PJS息肉组甲基化克隆总数为4701个,平均甲基化率为44.78%,标准误为0.61412;12例正常黏膜组甲基化克隆总数为148个,平均甲基化率为5.87%,标准误为0.481812;3例伴发结肠黏液腺癌甲基化克隆总数为128个,平均甲基化率为20.32%。采用t检验对息肉组和正常黏膜组平均甲基化率进行对比,差异有统计学意义(P=6.09371×10-60,P0.05)。综上所述,我们认为:一、PJS息肉组织与正常黏膜相比甲基化水平显著升高,提示DNA甲基化与PJS息肉发病相关。二、PJS息肉组织中普遍出现LKB1基因启动子区甲基化的模式主要要有三种:1、高甲基化模式,Cp G位点平均甲基化率70%的样本有9例,提示着两条等位基因均存在着高甲基化的状态;2、半甲基化模式,Cp G位点平均甲基化率介于70%到30%之间的样本有34例,提示着两条等位基因中的一条存在着高甲基化状态;3、低甲基化模式,Cp G位点平均甲基化率30%有14例,提示着两条等位基因均呈低甲基化状态。三、PJS息肉恶变组中LKB1基因启动子区呈现低甲基化状态,其发生机制尚不明确,也没有相关报道,PJS息肉恶变与甲基化机制有待进一步研究。四、正常黏膜中LKB1基因启动子区呈现未甲基化状态。
【学位授予单位】：河北北方学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R596

【参考文献】