饮食限制对时钟基因甲基化及肝脏衰老相关标志物的影响

发布时间：2020-07-06 20:57

【摘要】：目的:本研究将通过对12月龄小鼠进行研究,探讨热量限制和隔日禁食对小鼠时钟基因甲基化及肝脏衰老相关标志物的影响。方法:12月龄雄性小鼠30只,随机分为三组:对照组(CON组)、热量限制组(CR组)、隔日禁食组(ADF组),分别给予自由饮食,热量限制(对照组每日进食量的60%)以及隔日禁食(禁食与进食各24h)16周,每周观察小鼠的一般情况以及测定小鼠的体重;分别于0、8、16周末测定小鼠的空腹血糖;饲养16周后麻醉处死小鼠,检测糖脂代谢和炎性指标:血清胰岛素、TC、TG、IL-6水平;DNA甲基化水平:Npas2、Rev-Erb;肝脏氧化应激相关指标:SOD活性、GSH-Px活性、MDA含量;肝脏β-半乳糖苷酶染色。结果:饲养16周后,各组小鼠变化情况如下:(1)体重变化:CON组体重无明显改变,CR组体重不断下降后于九周后趋于稳定,ADF组先升高后于十周小幅度下降。(2)糖脂代谢生化指标:与CON组相比,CR组空腹血糖下降(P0.05),胰岛素和TC水平显著下降(P0.01);与CON组相比,ADF组空腹血糖在第八周末下降(P0.05),但在第十六周末显著升高(P0.01),实验末胰岛素水平下降(P0.05);与ADF组相比,CR组空腹血糖在第八周末略有升高(P0.05),但在十六周末显著下降(P0.01),胰岛素水平略有下降(P0.05),TC显著下降(P0.01)。(3)IL-6:CR组IL-6较对照组显著降低(P0.01);ADF组IL-6较对照组降低(P0.05);CR组IL-6较ADF组略有降低(P0.05),但未达统计学意义。(4)DNA甲基化水平:与CON组相比,ADF组Npas2启动子区域甲基化百分比较对照组升高(P0.05);与ADF组相比,CR组Npas2启动子区域甲基化百分比显著降低(P0.01)。(5)肝脏SA-β-gal染色结果:CR组蓝色颗粒(代表衰老细胞)较CON组明显减少(P0.01);ADF组蓝色颗粒较CON组减少(P0.05);CR组蓝色颗粒较ADF组减少(P0.05),但未达统计学意义。(6)氧化应激指标的变化:与CON组相比,CR组SOD活性显著升高(P0.01),GSH活性升高,MDA含量降低(P0.05);与CON组相比,ADF组SOD和GSH活性升高(P0.05),MDA含量略有降低(P0.05),但未达统计学意义;与ADF组相比,CR组SOD和GSH活性略有升高,MDA含量略有降低(P0.05),但未达统计学意义。结论:本研究发现饮食限制可改善衰老相关标志物的水平,对时钟基因甲基化水平的影响并不大,但隔日禁食增加了时钟基因Npas2甲基化的水平。
【学位授予单位】：上海交通大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R592
【图文】：

热量限制,小鼠,实验结果,统计学

.实验数据分析和处理同第一部分 4.实验结果.1 三组小鼠肝脏组织 β-半乳糖苷酶染色结果SA-β-gal 主要在肝细胞的包浆内表达，阳性细胞为细胞质中存在，表明细胞处于衰老状态，而数量的多少可以代表机体的衰老程度。比，热量限制组小鼠的肝脏组织在平均每个高倍镜下 SA-β-gal 阳性减少[（25.67±3.06）vs（47.67±5.03）,P<0.01]，差异有显著统计学对照组相比，隔日禁食组小鼠的肝脏组织在平均每个高倍镜下 SA-β-胞数减少[（33.34±5.51）vs（47.67±5.03）,P<0.01]，差异有显著义；与隔日禁食组相比，热量限制组小鼠的肝脏组织在平均每个高A-β-gal 阳性细胞数减少[（25.67±3.06）vs（33.34±5.51）,P>0.0无统计学意义,实验结果见图 6。

【参考文献】