白藜芦醇抗衰老活性及其对Klotho基因表达的调控

发布时间：2020-09-26 21:25

　　关于衰老的研究一直是老年医学以及生物学研究的热点。衰老是一切生物发展的自然规律,是不以人类意志为转移的生物学法规。实验表明,通过服用一些具有抗衰老的药(食)物,可以有效延缓衰老的进程。Klotho基因是科学家在1997年发现的又一个与衰老相关的基因。研究表明,Klotho基因在体内的表达量与机体的衰老程度有密切关系,因此研究药物对Klotho基因的表达调控,对揭示药物的抗衰老机理具有非常重要的指导意义。白藜芦醇是一种广泛存在于植物中的非黄酮多酚类化合物,目前已经在21个科32个属72种植物中发现了白藜芦醇。白黎芦醇的生物学活性一直是研究的热点,但有关于白藜芦醇抗衰老活性,特别是对Klotho基因的调控作用缺乏系统研究。本研究通过体内外抗衰老实验,系统研究白藜芦醇的抗衰老活性以及对小鼠体内Klotho基因表达的调控。主要内容如下:1.白藜芦醇的体外抗氧化活性。本实验中通过DPPH法,ABTS法,邻二氮菲-Fe~(2+)法,以及总还原能力的测定,结果表明白藜芦醇在体外具有抗氧化活性,其中对ABTS自由基的清除能力强于Vc;2.白藜芦醇体外抗衰老作用。通过CCK-8细胞毒性实验找到适宜的用药浓度,通过酶联免疫分析(Elisa)检测白藜芦醇对小鼠肾小管上皮细胞(TCMK-1)中小鼠丙二醛(MDA),小鼠过氧化氢酶(CAT),小鼠超氧化物歧化物酶(SOD),小鼠谷胱甘肽-过氧化氢酶(GSH-PX)等抗氧化酶的调节作用;过氧化氢作用于小鼠以及大鼠的肾小管上皮细胞造氧化损伤模型,白藜芦醇作用后改善小鼠以及大鼠肾小管上皮细胞的氧化应激状态,修复过氧化氢损伤的肾小管上皮细胞;3.白藜芦醇体内抗衰老活性及其对Klotho基因的表达调控作用。D-半乳糖法造小鼠衰老模型,造模成功后给药治疗观察小鼠状态,提取小鼠肾脏以及脑组织中总RNA,检测小鼠肾组织和脑组织中Klotho基因的表达量,以及各组织中(心、肝、脾、肾)中小鼠丙二醛(MDA),小鼠过氧化氢酶(CAT),小鼠超氧化物歧化物(SOD)酶含量,结合组织病理切片观察白藜芦醇对脑组织、肾组织、肝组织的保护作用,以及降低氧化损伤、增强肾功能,提高认知能力。研究结果表明,白藜芦醇主要通过三种途径发挥抗衰老活性。首先,利用自身抗氧化功能清除体内自由基;其次,通过介导体内抗氧化酶活性增强机体清除自由基的能力,避免氧化应激损伤;在基因水平上,上调脑组织以及肾组织中Klotho基因的表达发挥抗衰老活性,具有增强肾功能,减少由衰老导致的肾功能减退以及脑组织损伤。
【学位单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R285.5
【部分图文】：

分子,认知功能障碍,二苯乙烯,认知功能

Klotho 能够激活 Nrf2 显著地认知功能障碍的重要原因，脑体缺少相应的抗氧化体系，脑部抗氧化防御体系的调控[21高，氧化损伤加剧。Klotho 基行性疾病以及其它的慢性病[22陷导致的小鼠认知功能的衰退trol）是一种具有很强生物活性羟基二苯乙烯[23]，自然界中白稳定的形式，如图 1.1 为反

结构式,白藜芦醇,定容,溶液

基的清除率测定9.2 mg 的 ABTS，加入溶液，避光，4 ℃保存纯水定容，得到浓度为8 μL 的 K2S2O4溶液混母液，使其在 734 nm8.55 mg 的白藜芦醇，的 Vc，定容至 25 mL的白藜芦醇溶液，充分

结构式,定容,氯化铁溶液,三氯乙酸

还原性测定配置：称取铁氰化钾 1 g，用双蒸水稀释钾溶液，保存，备用；的配置：称取三氯化铁 0.1 g，用双蒸水氯化铁溶液；的配制：称取三氯乙酸 10 g，用双蒸水稀氯乙酸溶液；配置：称取 28.5 mg 的白藜芦醇，定容至 2，备用；：称取 22 mg 的 Vc，定容至 25 mL，得到 5液 1 mL 于 EP 管中，再加入 2.5 mL 的磷

【参考文献】