华北豹IFN-α家族基因的克
发布时间：2021-01-22 05:16
I型干扰素（Type Ⅰ interferons）是关键的抗病毒细胞因子,在脊椎动物物种形成过程中不断进化以应对各种各样的病毒威胁。α干扰素（Interferon-α,IFN-α）是由机体白细胞对抗病毒、细菌或其他外来入侵者产生的,具有抗病毒增殖、抗肿瘤生长和免疫调节等多种生物学功能的糖蛋白。目前,有关动物干扰素的研究发展迅速,市场已有鸡、犬、猪等商用重组干扰素产品面市。然而,国内外有关于华北豹（Panthera pardus fontanierii）干扰素方面的报道寥寥无几。华北豹是我国特有的豹亚种,又称中国豹（Chinese Leopard）。由于栖息地的破坏、人类的杀戮和病毒性疾病的传播,华北豹的数量呈现急剧下降的趋势,已被列入世界自然保护联盟濒危物种红色名录。干扰素的广谱抗病毒作用很可能成为防治华北豹病毒病的新途径和新方法,也符合当前自然生态、无污染、无残留、绿色环保的标准。根据GenBank发表的金钱豹IFN-α基因序列,我们设计并合成了一对特异性引物。以华北豹的核酸DNA为模板,首次扩增得到11个华北豹IFN-α家族的亚型基因（PfIFN-α/α1/α2/α3/4/α5/α...
【文章来源】：东北林业大学黑龙江省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１典型和非典型的Ｉ型干扰素信号转导途径（摘自Ｃｈｅｎｅｔａｌ．，２０１７ｔＳ３］；Ｐｌａｔａｎｉａｓ，２００５［ｒｅ］）??Ｆｉｇ．?１－１?Ｔｙｐｉｃａｌ?ａｎｄ?ａｔｙｐｉｃａｌ?ｔｙｐｅ?Ｉ?ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ?ｓｉｇｎａｌｉｎｇ?ｐａｔｈｗａｙｓ??１．４?ｉ型干扰素的生?
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图３－］７兔抗ＰｆｌＦＮ－ａ多克隆抗体效价??
【参考文献】：
期刊论文
[1]猪α干扰素的研究进展[J]. 荣柳,沈国顺. 黑龙江畜牧兽医. 2015(17)
[2]Ⅰ型干扰素的抗病毒机制研究进展[J]. 史青竹,赵智,石新慧,韩根成. 军事医学. 2015(07)
[3]干扰素对肿瘤的抑制作用[J]. 熊辉,付丽萍,周琳. 华中科技大学学报(医学版). 2014(05)
[4]金钱豹肝炎的病例报告[J]. 张美莲. 中国畜牧兽医文摘. 2014(05)
[5]华北豹:只生活在中国[J]. 宋大昭,李继生. 森林与人类. 2012(08)
[6]动物干扰素的研究进展[J]. 王照,王磊,李天松,王胜乐,王铁锋,高玉伟,黄耕,王铁成,杨松涛,王化磊,夏咸柱. 中国动物检疫. 2012(02)
[7]干扰素（Ⅰ型α、β,Ⅱ型γ）的分子结构和生物活性的对应关系及其临床应用[J]. 李柳萍,杨胥微,王妍. 微生物学免疫学进展. 2011(02)
[8]Effects of odors on behaviors of captive Amur leopards Panthera pardus orientalis[J]. Carin HARRINGTON. Current Zoology. 2009(01)
[9]干扰素的研究进展及其在动物临床中的应用[J]. 杨东亮,林永利. 福建畜牧兽医. 2009(01)
[10]干扰素-γ对人肺腺癌SPC-A-1细胞增殖和B7分子表达的影响[J]. 王仪麟,林勇,孙思庆. 中国实用内科杂志. 2008(S2)
博士论文
[1]干扰素刺激基因15对猪瘟病毒复制的影响及机制[D]. 李程.西北农林科技大学 2019
[2]牛Ⅰ型干扰素家族新成员（IFN-ε、IFN-κ、IFN-χ）抗病毒信号转导与表达调控研究[D]. 郭永丽.东北农业大学 2017
[3]重组牛IFN-λ3的制备及其与IFN-α/IFN-β/IFN-γ抗病毒活性比较研究[D]. 张润祥.东北农业大学 2013
[4]天府肉鹅α干扰素基因克隆、表达及其生物学活性研究[D]. 刘菲.四川农业大学 2011
[5]家猪I型干扰素多基因家族的结构和特性及干扰素-alpha对口蹄疫基因工程疫苗的免疫增强作用[D]. 程功.复旦大学 2008
硕士论文
[1]三种牛干扰素融合蛋白的制备及其生物学活性鉴定[D]. 程薪同.东北农业大学 2018
[2]干扰素刺激基因USP18、OAS2在干扰素治疗慢乙肝效果预测中的临床意义研究[D]. 刘洋.厦门大学 2018
[3]犬干扰素α4、α2基因的表达及抗病毒活性分析[D]. 王晶宇.南京农业大学 2017
[4]家兔γ干扰素原核表达、抗病毒活性以及单克隆抗体的研究[D]. 彭伟.南京农业大学 2015
[5]牛IFN-α1、IFN-α7、IFN-α14的酵母表达及其理化性质与生物学活性研究[D]. 邵建伟.东北农业大学 2014
[6]鸡和鹌鹑β-干扰素基因的克隆、表达及免疫调节作用的研究[D]. 郑蓓.山东农业大学 2014
[7]犬γ干扰素的可溶表达及其产物的活性鉴定[D]. 韩阳.东北农业大学 2013
[8]大菱鲆干扰素调节因子3（IRF-3）和干扰素调节因子7（IRF-7）基因克隆与表达分析[D]. 夏军.中国海洋大学 2011
[9]猪α、γ干扰素的原核表达、纯化及抗病毒活性初步检测[D]. 赵伟鸽.上海交通大学 2010
[10]鸡、鸭和犬α干扰素全基因合成、原核表达及抗病毒活性测定[D]. 胡伟娟.南京农业大学 2009
本文编号：2992631
【文章来源】：东北林业大学黑龙江省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１典型和非典型的Ｉ型干扰素信号转导途径（摘自Ｃｈｅｎｅｔａｌ．，２０１７ｔＳ３］；Ｐｌａｔａｎｉａｓ，２００５［ｒｅ］）??Ｆｉｇ．?１－１?Ｔｙｐｉｃａｌ?ａｎｄ?ａｔｙｐｉｃａｌ?ｔｙｐｅ?Ｉ?ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ?ｓｉｇｎａｌｉｎｇ?ｐａｔｈｗａｙｓ??１．４?ｉ型干扰素的生?
?东北林业大学硕士学位论文???３结果??３．１华北豹ＩＦＮ－ａ亚型基因扩增??３．１．１华北豹ＩＦＮ－ａ全基因克隆??以提取的华北豹基因组ＤＮＡ为模板，ｆｌＦＮ－ａＳ和ｆｌＦＮ－ａＡ为上下游引物进行华北??豹ＩＦＮ－ａ全基因扩增。扩增结果经１％琼脂糖凝胶电泳分析，在５００－７５０?ｂｐ之间获得一??条特异性条带，与预期目的片段（６７７?ｂｐ）大小相符，如图３－１所示。??２０Ｑ０ｂｐ??５〇〇ｂｐＦ＾ＷＢＢ｜：：?Ｉ??，ＭｂＵ??Ｍ：?ＤＮＡ分子质量标准，１：阴性对照；２：华北豹ＩＦＮ－ａ全基因扩增??图３－１?ＰＣＲ扩增结果??Ｆｉｇ．?３－１?Ｔｈｅ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ??３．１．２华北豹ＩＦＮ－ａ亚型成熟肽基因的扩增??将扩增得到的华北豹ＩＦＮ－ａ全基因进行纯化回收，连接到克隆载体ｐＭＤ？１９－Ｔ载??体上，构建重组质粒ｐＭＤＴＭ１９－ｆ！ＦＮ－ａ。取大量重组质粒ｐＭＤ？ｌ９－ｆＩＦＮ－ａ先经价ｍＨ?Ｉ??单酶切鉴定，再经及／ｗＨ?Ｉ和／／／ａｍＭＩＩ双酶切鉴定。将单双酶切鉴定都正确的阳性重组??质粒ｐＭＤ？１９－ｆ！ＦＮ－ａ送至苏州泓迅生物公司进行测序。测序结果中取氨基酸序列不同??的各个菌株作为不同的亚型，分别命名为?ｐＭＤＴＭ１９－ｆＩＦＮ－??ａ／ａ?１?／?ａ２／ａ３?／ａ４／ａ５?／?ａ６／ａ７／ａ８／ａ９／ａｌ０〇??以?ｐＭＤＴＭ１９－ｆｌＦＮ－ａ／ａｌ／ａ２／ａ３／ａ４／ａ５／ａ６／ａ７／ａ８／ａ９／ａｌ０?为模板，ＰｆｌＦＮ－ａＳ?和?ＰｆＩＦＮ－ａＡ??为上下游引物进行华北豹ＩＦＮ－ａ亚型成熟肽基因的扩增。扩增结果如图３－２所示，在约?
图３－］７兔抗ＰｆｌＦＮ－ａ多克隆抗体效价??
【参考文献】：
期刊论文
[1]猪α干扰素的研究进展[J]. 荣柳,沈国顺. 黑龙江畜牧兽医. 2015(17)
[2]Ⅰ型干扰素的抗病毒机制研究进展[J]. 史青竹,赵智,石新慧,韩根成. 军事医学. 2015(07)
[3]干扰素对肿瘤的抑制作用[J]. 熊辉,付丽萍,周琳. 华中科技大学学报(医学版). 2014(05)
[4]金钱豹肝炎的病例报告[J]. 张美莲. 中国畜牧兽医文摘. 2014(05)
[5]华北豹:只生活在中国[J]. 宋大昭,李继生. 森林与人类. 2012(08)
[6]动物干扰素的研究进展[J]. 王照,王磊,李天松,王胜乐,王铁锋,高玉伟,黄耕,王铁成,杨松涛,王化磊,夏咸柱. 中国动物检疫. 2012(02)
[7]干扰素（Ⅰ型α、β,Ⅱ型γ）的分子结构和生物活性的对应关系及其临床应用[J]. 李柳萍,杨胥微,王妍. 微生物学免疫学进展. 2011(02)
[8]Effects of odors on behaviors of captive Amur leopards Panthera pardus orientalis[J]. Carin HARRINGTON. Current Zoology. 2009(01)
[9]干扰素的研究进展及其在动物临床中的应用[J]. 杨东亮,林永利. 福建畜牧兽医. 2009(01)
[10]干扰素-γ对人肺腺癌SPC-A-1细胞增殖和B7分子表达的影响[J]. 王仪麟,林勇,孙思庆. 中国实用内科杂志. 2008(S2)
博士论文
[1]干扰素刺激基因15对猪瘟病毒复制的影响及机制[D]. 李程.西北农林科技大学 2019
[2]牛Ⅰ型干扰素家族新成员（IFN-ε、IFN-κ、IFN-χ）抗病毒信号转导与表达调控研究[D]. 郭永丽.东北农业大学 2017
[3]重组牛IFN-λ3的制备及其与IFN-α/IFN-β/IFN-γ抗病毒活性比较研究[D]. 张润祥.东北农业大学 2013
[4]天府肉鹅α干扰素基因克隆、表达及其生物学活性研究[D]. 刘菲.四川农业大学 2011
[5]家猪I型干扰素多基因家族的结构和特性及干扰素-alpha对口蹄疫基因工程疫苗的免疫增强作用[D]. 程功.复旦大学 2008
硕士论文
[1]三种牛干扰素融合蛋白的制备及其生物学活性鉴定[D]. 程薪同.东北农业大学 2018
[2]干扰素刺激基因USP18、OAS2在干扰素治疗慢乙肝效果预测中的临床意义研究[D]. 刘洋.厦门大学 2018
[3]犬干扰素α4、α2基因的表达及抗病毒活性分析[D]. 王晶宇.南京农业大学 2017
[4]家兔γ干扰素原核表达、抗病毒活性以及单克隆抗体的研究[D]. 彭伟.南京农业大学 2015
[5]牛IFN-α1、IFN-α7、IFN-α14的酵母表达及其理化性质与生物学活性研究[D]. 邵建伟.东北农业大学 2014
[6]鸡和鹌鹑β-干扰素基因的克隆、表达及免疫调节作用的研究[D]. 郑蓓.山东农业大学 2014
[7]犬γ干扰素的可溶表达及其产物的活性鉴定[D]. 韩阳.东北农业大学 2013
[8]大菱鲆干扰素调节因子3（IRF-3）和干扰素调节因子7（IRF-7）基因克隆与表达分析[D]. 夏军.中国海洋大学 2011
[9]猪α、γ干扰素的原核表达、纯化及抗病毒活性初步检测[D]. 赵伟鸽.上海交通大学 2010
[10]鸡、鸭和犬α干扰素全基因合成、原核表达及抗病毒活性测定[D]. 胡伟娟.南京农业大学 2009
本文编号：2992631
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