塔里木马鹿茸HGF基因部分外显子克隆及表达特征

发布时间：2021-01-23 19:02

　　试验旨在对塔里木马鹿（Cervus elaphus yarkandensis）鹿茸肝细胞生长因子（Hepatocyte growth factor, HGF）基因进行部分外显子克隆、序列分析及组织表达研究。试验采用改良的Trizol法分别提取茸皮组织、间充质组织、软骨组织、骨组织的总RNA;通过RT-PCR扩增得到HGF基因,回收纯化后,基因与pMD19-T载体连接,转化到大肠杆菌DH5α感受态细胞中,鉴定后送测序;利用免疫组化法确定HGF在塔里木马鹿鹿茸顶端组织茸皮、间充质、软骨、骨组织中的表达特征。结果,获得塔里木马鹿茸HGF基因部分外显子大小为349 bp;同源性序列比对结果发现塔里木马鹿HGF与瘤牛、普通牛、白尾鹿、山羊相似性较高;免疫组化试验表明,塔里木马鹿HGF基因在茸皮组织和软骨组织中阳性反应明显,间充质组织和骨组织中阳性反应微弱。本结果为进一步研究HGF基因在塔里木马鹿茸生长中的调控作用提供基础试验数据。 

【文章来源】：塔里木大学学报. 2020,32(03)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

鹿茸不同组织总RNA检测结果

取2.1获得的RNA样品通过PCR扩增产物经1.0%琼脂糖凝胶电泳检测得到一条约349 bp的目的条带，与预期片段大小相符，可进行下一步试验。结果图2所示：2.3 测序结果与序列分析

HGF在塔里木马鹿鹿茸皮层的表达免疫组化结果见图3。在倒置显微镜下可以看到，茸皮是由表皮、真皮和皮下结缔组织组成，真皮由网状结构构成，并且存在大量毛囊和皮脂腺，皮下结缔组织中由许多血管和纤维的分布（见图3中A、B、C和D）。从图片中观察到鹿茸茸皮组织免疫组化实验组有黄褐色阳性反应出现，主要分布在鹿茸茸皮组织真皮表皮中间基底层和毛囊周围的皮脂腺上（见图3中B、C和D），对照组为阴性反应（见图3中A），说明鹿茸茸皮组织中存在肝细胞生长因子的表达，且表达明显。

【参考文献】：
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本文编号：2995760