TTC39B基因对生长激素缺乏的肝细胞脂肪沉积的作用及机制研究

发布时间：2021-01-30 01:03

　　目的:探讨生长激素缺乏状态下通过降低肝细胞β氧化功能加重肝细胞脂肪沉积及其可能的机制方法:构建生长激素受体（growth hormone receptor,GHR）慢病毒干扰载体下调GHR表达,用不同浓度的棕榈酸（Palmic acid,PA）及胰岛素样生长因子 1（insulin like growth factor,IGF-1）干预 L02 细胞 24h,采用油红O染色法观察细胞内甘油三酯沉积情况,蛋白免疫印迹（Western blot）、实时荧光定量 PCR（Real-time quantitative PCR）检测 PA 及 IGF-1干预后细胞内线粒体β氧化标志基因及TTC39B基因的表达变化。结果:1.PA刺激两组细胞后,转染组肝细胞脂质沉积与对照组相比增多。2.随着PA浓度的升高,β氧化相关基因的表达逐渐降低,在相同PA浓度下,转染组与对照组相比皆明显降低;TTC39BmRNA和蛋白水平表达逐渐升高,与对照组相比较,在高浓度PA水平呈明显升高。3.经400ummol/L PA与不同浓度的IGF-1共同干预24h后,转染组肝细胞随着IGF-1浓度的升高,β氧化相关基因的表达... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：44 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１：重组慢病毒转染Ｌ０２细胞抑制ＧＨＲ表达??

?重庆医科大学硕士研究生学位论文???２．２不同浓度ＰＡ对Ｌ０２细胞基因表达及油红Ｏ染色的影响??实时ＰＣＲ检测发现，用不同浓度ＰＡ干预转染组及阴性对照组细胞２４ｈ，随着??ＰＡ浓度的升高，两组细胞的线粒体卩氧化相关基因ｍＲＮＡＰＰＡＲａ、ＣＰＴ１Ａ、ＦＧＦ２１表??达降低，ＴＴＣ３９Ｂ表达增加ＯＣ０．０５）?；?Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测也有同样的发现（ＰＣ０．０５）。??同时，油红０染色发现，经ＰＡ处理后，转染组细胞内甘油三酯沉积较对照组增多。??（Ａ）?（Ｂ）??

?重庆医科大学硕士研究生学位论文???ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｗａｓ?ｕｓｅｄ?ｔｏ?ｏｂｓｅｒｖｅ?ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ?ｉｎｓｉｄｅ?ｔｈｅ?ｃｅｌｌ．?Ｔｈｅ?ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ?ｗｅｒｅ?ｉｎ?ｔｒｉｐｌｉｃａｔｅ．?＊Ｐ?＜０．０５??ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?０?ｍｍｏｌ／１?ｉｎ?ｓｈＳｃｒ?ｇｒｏｕｐ．?＃Ｐ?＜０．０５?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?０?ｍｍｏｌ／１?ｉｎ?ｓｈＧＨＲ?ｇｒｏｕｐ．?ｒ＾Ｐ??＜０．０５?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｅａｃｈ?ｏｔｈｅｒ?ａｔ?ｔｈｅ?ｓａｍｅ?ＰＡ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ．??２．３不同浓度ＩＧＦ－ｌ对Ｌ０２细胞基因表达及油红Ｏ染色的影响??实时ＰＣＲ及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测检发现，用不同浓度ＩＧＦ－１和一定浓度ＰＡ共同干??预转染组及阴性对照组细胞２４ｈ，随着ＩＧＦ－１浓度的升高，两组细胞的线粒体卩氧化??相关基因ｍＲＮＡＰＰＡＲａ、ＣＰＴ１Ａ、ＦＧＦ２１表达增加，ＴＴＣ３９Ｂ表达减少ＯＣ０．０５）。??同时，油红０染色发现，经ＩＧＦ－１处理后，两组细胞内甘油三酯沉积减少。??（Ａ）?ＣＢ）??


本文编号：3007935