EuCAD基因不同位置片段RNAi对烟草木质素合成的调控效果

发布时间：2021-02-02 22:52

　　为尾叶桉GLU4无性系（Eucalyptus urophylla clone GLU4）肉桂酰乙醇脱氢酶基因（EuCAD）调控其木质素的合成提供技术参考,以模式植物烟草为试验材料,采用生物信息学技术分析其EuCAD基因序列,根据保守结构域的分布情况选择EuCAD基因不同位置的4个片段（S₁、S₂、S₃和S₄）分别构建RNA干扰载体并转化烟草后获得转基因烟草植株（pS₁、pS₂、pS₃和pS₄）,检测分析转基因烟草植株中CAD基因表达水平、茎部解剖结构、木质素及纤维素的含量变化。结果表明:S₁和S₂片段对木质素的调控效果最明显,其转基因烟草植株pS₁和pS₂的基因表达水平分别较野生型降低87.48%和87.30%,木质素含量较野生型降低15.26%和11.44%;S₃和S₄片段的调控效... 

【文章来源】：贵州农业科学. 2020,48(09)

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

RNAi载体构建转化菌落的PCR验证

从图2可见，RNAi载体转化获得的4个转基因烟草植株基因组上插入RNAi载体的转基因植株中可检测到长度200bp的特异性片段，而未整合RNAi载体的植株则未扩增到目标条带。阳性植株经进一步PCR扩增产物测序结果显示，其序列与目标RNAi序列一致，获得的转基因烟草植株分别命名为pS1、pS2、pS3和pS4。2.3 转基因烟草植株CAD基因的表达水平

从图3看出，pS1、pS2、pS3和pS44个转基因烟草植株的CAD基因表达水平与野生型（WT）相比，均呈显著下降趋势，pS1与pS2间差异不显著，pS1和pS2显著低于pS3和pS4,pS3显著低于pS4。其中，pS1和pS2降幅最大，分别为87.48%和87.30%;pS3降幅其次，为67.93%;pS4降幅最小，为49.70%。从基因表达调控效果看，RNAi片段S1和S2的调控效果最好。2.4 转基因烟草植株茎部直径及木质部的厚度

【参考文献】：
期刊论文
[1]OsPUT1基因三个不同位置的RNA干扰效果[J]. 张斌,刘询,耿雅楠,阮颖.  分子植物育种. 2017(02)
[2]尾叶桉GLU4无性系肉桂酰乙醇脱氢酶基因克隆及序列分析[J]. 陈博雯,蒋华,覃鹏飞,姜伟.  西部林业科学. 2014(02)
[3]木质素合成关键酶基因与造纸植物转基因改良应用研究[J]. 谷振军,张党权,黄青云.  中南林业科技大学学报. 2010(03)
[4]云南的桉树引种及对其发展状况的剖析[J]. 张荣贵,李思广,蒋云东.  西部林业科学. 2007(03)
[5]广西桉树人工林发展现状、问题与对策[J]. 项东云,陈健波,叶露,申文辉.  广西林业科学. 2006(04)
[6]蓝桉、直干桉纤维用材林合理轮伐期的研究[J]. 张泽,张荣贵.  西部林业科学. 2004(02)
[7]中国桉树人工林可持续经营战略初探[J]. 谢耀坚.  世界林业研究. 2003(05)
[8]木质素生物合成及其基因调控研究综述[J]. 陈永忠,谭晓风,David Clapham.  江西农业大学学报(自然科学). 2003(04)
[9]耐寒桉树的纤维形态特征的变异[J]. 陈茜文,杨模华,李志辉,杜正涛.  中南林学院学报. 2002(04)
[10]桉树人工林地有机物和养分库的衰退及防治[J]. 胡曰利,吴晓芙,王尚明,陈孝,杨伟东.  中南林学院学报. 2000(04)



本文编号：3015499