植物乳杆菌苯乳酸产量优化及合成关键基因的功能研究

发布时间：2021-03-02 00:57

　　苯乳酸是近年来发现的一种新型天然生物防腐剂,它具有广泛的抑菌性,不但可以抑制革兰氏阴性细菌,而且对革兰氏阳性细菌以及真菌的生长都有抑制作用。本论文以植物乳杆菌YM-4-3为研究对象,利用高效液相色谱方法测定了在MRS培养基中不同葡萄糖浓度对植物乳杆菌PLA产量的影响。结果发现随着培养基中葡萄糖浓度的增加,PLA产量先增加后下降,当葡萄糖浓度为30 g/L时PLA产生最高为74.5391 mg/L。为了探究以葡萄糖为原料合成PLA的分子机制,本研究选取了2个表达水平受葡萄糖正调控的基因—预苯酸脱氢酶基因（Prephenate dehydrogenase gene,Pdh）和柠檬酸转运蛋白基因（Citrate transporter protein gene,Citp）为研究对象,分别进行异源表达和基因敲除研究。异源表达结果表明,Pdh能在乳酸乳球菌NZ9000中诱导表达。当诱导剂Nisin浓度为20ng/m L,底物预苯酸钡盐浓度为0.1 mg/m L,氯霉素浓度为10μg/m L时,工程菌NZ9000/p NZ8048-Pdh的预苯酸酸脱氢酶蛋白的异源表达效果最好,PLA和OH-PLA... 

【文章来源】：昆明理工大学云南省

【文章页数】：87 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

标准品色谱图

图 2.3 OH-PLA 标准曲线Fig 2.3 OH-PLA standard curve line.1.3 样品测定在 MRS 培养基中，PLA 和 OH-PLA 的含量随着葡萄糖含量的增加，表加再减少的趋势，葡萄糖浓度为 30 g/L 时达到峰值，PLA 的产量为 74/L，OH-PLA 产量为 49.489 mg/L。当葡萄糖浓度为 0 g/L 时，产量最少42.6515 mg/L，OH-PLA 的产量为 4.8576 mg/L，与葡萄糖浓度为 30 g/LA 产量相差近 2 倍，OH-PLA 相差约 10 倍。在葡萄糖浓度为 60 g/L 时，量为 63.14265 mg/L，OH-PLA 为 41.38 mg/L 介于两者之间（图 2.4），。

图 2.2 PLA 标准曲线Fig 2.2 PLA standard curve line图 2.3 OH-PLA 标准曲线Fig 2.3 OH-PLA standard curve line1.3 样品测定在 MRS 培养基中，PLA 和 OH-PLA 的含量随着葡萄糖含量的增加，表


本文编号：3058292