小菜蛾PxEH基因的克

发布时间：2021-03-11 02:11

　　病原体在感染昆虫的过程中会激活昆虫的免疫系统。Cry毒素是一类能在靶标昆虫中肠形成孔道的杀虫蛋白,目前昆虫对Cry毒素的免疫应答机制仍不清晰。本研究从小菜蛾中肠cDNA中克隆得到小菜蛾参与免疫应答的关键基因（Plutella xylostella poly（U）-specific endoribonuclease homolog）。该免疫基因在小菜蛾感染病原体时表达上调,通过免疫反应保护小菜蛾。序列分析结果表明该基因开放阅读框全长1053 bp,编码350个氨基酸,我们将其命名为PxEH。PxEH和NCBI上Plutella xylostella poly（U）-specnc endoribonuclease（XM₀11 563907.1）的同源性为97%。将克隆得到的PxEH免疫基因构建原核表达载体pGEX-4T-1/PxEH,在B121表达菌中表达得到以与GST标签形成融合蛋白的目的蛋白,分子量大小为66 kDa,且表达量相对较高,经western blot实验验证为带有GST标签的目的蛋白。实验并优化了诱导PxEH免疫基因表达蛋白的条件,在25℃,IPTG终... 

【文章来源】：厦门大学福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：88 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

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图４撖光共聚焦系统??Ｆｉｇ．?４?ｔｈｅ?ｓｙｓｔｅｍ?ｏｆ?ｃｏｎｆｏｃａｌ??

图５重叠ＰＣＲ原理图??Ｆｉｇ．?５?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?Ｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇ?ＰＣＲ??

【参考文献】：
期刊论文
[1]小菜蛾生物学特性及防治研究进展[J]. 常晓丽,袁永达,张天澍,滕海媛,王冬生.  上海农业学报. 2017(05)
[2]甲氨基阿维菌素苯甲酸盐药液浓度、雾滴密度及施药液量对小菜蛾防治效果的影响[J]. 曹源,邓维,李永平,李学锋,郑明奇,袁会珠.  农药学学报. 2014(01)
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博士论文
[1]褐飞虱内参基因的筛选及精氨酸激酶基因的分子特性研究[D]. 袁淼.华中农业大学 2014
[2]RNA基因干扰技术抑制草鱼呼肠孤病毒复制的研究[D]. 马杰.华中农业大学 2013
[3]大豆黄酮合成酶基因的克隆与RNA干扰调控异黄酮含量的研究[D]. 姜伊娜.上海交通大学 2013

硕士论文
[1]棉铃虫V-ATP酶A亚基在Cry1Ac杀虫及抗性演化中的作用研究[D]. 钟丰.中国农业科学院 2015



本文编号：3075680