新型GABA定量方法的建立及短乳杆菌CD0817实时荧光定量PCR内参基因的筛选

发布时间：2021-03-13 11:15

　　γ-氨基丁酸（Gamma-Aminobutyric Acid,GABA）是天然存在的一种非蛋白质氨基酸,具有许多重要的生理学功能,是动植物体内主要的生物活性分子。由于乳酸菌（Lactic acid bacteria,LAB）被认为是安全的且有较高的GABA生产能力,近年来许多研究都集中于用LAB作为细胞工厂生产GABA。本课题组前期筛选到一株高产GABA的短乳杆菌CD0817,了解该菌株的基因表达模式将有助于研究其对不同培养条件(如Mn²⁺胁迫)的适应性。然而,在短乳杆菌基因规范化表达研究中,对于筛选合适内参基因的研究却很少。基于此,本论文在不同胁迫条件下筛选出了合适的内参基因;此外,由于筛选内参基因的需要,本文还建立了一种新型且实用的GABA定量方法。主要结果如下。（1）建立了一种新型且高效的GABA定量分析方法。由于谷氨酸与GABA之间存在相互作用且该作用严重阻碍了两种化合物的分离。因此,我们提出了醋酸锌辅助差异沉淀/溶解（ZA-DPD）策略,通过逐步回收GABA以除去发酵液中的干扰物谷氨酸,这主要归因于两种重要试剂（谷氨酸沉淀试剂和谷氨酸排斥试剂）的使用。在... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

GABA结构式Fig.1.1StructuralformulaofGABA

谷氨酸脱羧反应生成GABAFig.l.2GlutamatedecarboxylationreactionofGABA

GABA支路代谢示意图

【参考文献】：
期刊论文
[1]利用geNorm、NormFinder和BestKeeper软件进行内参基因稳定性分析的方法[J]. 吴建阳,何冰,杜玉洁,李伟才,魏永赞.  现代农业科技. 2017(05)
[2]实时荧光定量PCR中内参基因的选择[J]. 赵文静,徐洁,包秋华,陈永福,张和平.  微生物学通报. 2010(12)
[3]水果表面高产γ-氨基丁酸酵母菌菌株的筛选、鉴定和发酵条件优化[J]. 蒋冬花,李杰,后家衡,徐晓波.  浙江农业学报. 2008(06)
[4]荧光实时定量PCR的研究进展[J]. 张驰宇,成婧,李全双,曹威,孙金燕.  江苏大学学报(医学版). 2006(03)
[5]γ—氨基丁酸的分布和制备[J]. 白松,林向阳,阮榕生,郑丹丹,刘玉环,何承云.  现代食品科技. 2005(02)
[6]富含γ-氨基丁酸保健食品的研究与开发[J]. 张晖,姚惠源,姜元荣.  食品与发酵工业. 2002(09)
[7]DNA芯片技术研究进展[J]. 李凌,马文丽.  中国生物化学与分子生物学报. 2000(02)

硕士论文
[1]茯苓qRT-PCR内参基因筛选的研究[D]. 赵小龙.武汉轻工大学 2016
[2]生产GABA乳酸菌的筛选及其相关特性研究[D]. 高晓彤.山东大学 2015
[3]玉米在非生物胁迫和激素处理条件下实时荧光定量PCR内参基因的选择[D]. 吝月爱.四川农业大学 2012
[4]条斑紫菜（Pyropia/Porphyra yezoensis）实时荧光定量PCR内参基因的筛选[D]. 邵惠.中国海洋大学 2012
[5]极大节旋藻实时荧光定量PCR内参基因的选择[D]. 马飞.中国海洋大学 2012
[6]微生物转化法产γ-氨基丁酸[D]. 杨帆.江南大学 2008
[7]红曲霉发酵及某些生理活性物质的研究[D]. 孙佰申.浙江工业大学 2004



本文编号：3080121