盐/干旱胁迫下甜菜幼苗中miR160/164及其靶基因的表达与分析

发布时间：2021-04-08 04:53

　　土壤盐渍化和干旱化是影响全球作物产量和品质的重要因素。因此,作物耐盐及耐旱分子机理研究已成为农业科学的热点。近年来研究表明植物中有一些基因、转录因子参与盐和干旱胁迫应答。miRNA是普遍存在于动植物中的高度保守的基因表达调控元件,在植物胁迫应答过程中发挥重要作用,其中miR160/164家族基因在已有的报道中证明在植物中参与干旱和盐胁迫应答过程。甜菜是我国重要的糖料作物,具有耐盐碱、耐贫瘠、适应性广等优点,研究甜菜耐盐和耐旱性,从分子水平上认识甜菜耐盐耐旱机理,丰富耐盐耐旱基因资源对选育耐盐耐旱甜菜品种意义重大。本论文采用生物信息学分析与分子生物学实验相结合的手段研究了在盐/干旱胁迫下甜菜不同品种幼苗叶及根中miR160/164及其靶基因的表达量变化,并获得如下结果:1.采用高通量测序并结合生物信息学技术预测到甜菜miR160和miR164的靶基因,其中miR160的靶基因为ARF17/18,miR164的靶基因为NAC（21/22）/100。2.克隆了抗逆相关的P5CS（1-Pyrroline–5-Carboxylat Synthetase）基因c DNA序列,经测序及序列分析,该序... 

【文章来源】：哈尔滨工业大学黑龙江省 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：107 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

技术路线

待甜菜长出一对真叶时进行间苗，保持每个培养钵中有1-2株长势一致的甜菜幼苗。室内培育的甜菜幼苗生长较缓慢，2对真叶生长期约需45-50天。但是室内的幼苗长势均匀，且主、毛根发达。如图3-1是室内甜菜幼苗的培育过程。注：a）代表甜菜子叶期，b）代表甜菜一对真叶期图 3-1 室内培养的甜菜幼苗Figure 3-1 Indoor cultured beet seedlings

注：a）W6-1 品系的室外培育；b）CL6 品系的室外培育。图 3-2 室外培养的甜菜幼苗Figure 3-2 Outdoor cultured beet seedlings.1.3 盐/干旱胁迫处理甜菜幼苗待室内和室外甜菜幼苗分别长到 2 对和 3 对真叶期时，将土壤里培养的幼轻移出，洗净根上的泥土后移栽到培养液中，进行盐胁迫和干旱胁迫处理，注栽过程中保持根系不受损伤。室内培养的甜菜幼苗用于盐胁迫实验，室外培养苗用于干旱胁迫实验。盐胁迫过程使用300mM氯化钠溶液分别对盐敏感品系双6和耐盐品系”O”理 0h，12h，24h，48h 和 72h，处理过程如图 3-3，当对甜菜幼苗处理 12h 时菜幼苗开始出现干枯，萎蔫的现象。随着处理时间的延长，与对照组相比甜菜萎蔫的程度加重，枯叶增多，甜菜受到的盐胁迫程度加深。干旱胁迫过程使用 15%的 PEG6000 对耐盐品系 W6-1 和盐敏感品系 CL-6 处理 0 h，1 h，2 h，3 h 和 4 h，处理方法与盐处理相同。随着盐处理时间的

【参考文献】：
期刊论文
[1]甜菜盐胁迫相关蛋白的初步筛选[J]. 田庆斌,崔杰,李俊良,罗成飞,孙宗艳.  中国甜菜糖业. 2016 (02)
[2]VIGS技术在甜菜上的应用[J]. 龚攀,崔杰,李俊良,罗成飞,杨虎臣.  生物信息学. 2015(01)
[3]甜菜种质资源耐盐性筛选[J]. 史淑芝,崔杰,鲁兆新,程大友,罗成飞.  中国甜菜糖业. 2008(04)
[4]作物在渗透胁迫下脯氨酸积累的研究进展[J]. 齐永青,肖凯,李雁鸣.  河北农业大学学报. 2003(S1)

硕士论文
[1]干旱胁迫对幼苗期甜菜脯氨酸（Pro）代谢通路的影响[D]. 杨虎臣.哈尔滨工业大学 2016
[2]甜菜miRNA生物信息学预测及耐盐相关miRNA表达分析[D]. 李俊良.哈尔滨工业大学 2014



本文编号：3124887