柴胡侧根发育过程及调控基因初步筛选研究

发布时间：2021-04-23 07:23

　　柴胡以根入药,其根为常用大宗药材。柴胡根部主要药效成分为柴胡皂苷,具有抗炎、保肝、抗肿瘤等药理活性。不同品种柴胡根系结构差异显著,北柴胡根系结构表现为多支根、少支根及单支根,而狭叶柴胡根系表现为棕色根和白色根。药理成分研究表明不同根系结构柴胡药用成分含量差异显著。本研究以北柴胡（Bupleurum chineses DC.）新品种川北柴1号及狭叶柴胡（Bupleurum scorzonerifolium Willd.）新品种川红柴1号为试材,观测了侧根原基发育动态过程,添加了不同浓度生长调节物质后测定根系表型参数;克隆了参与柴胡侧根形成的基因,并分析调控基因在生长素处理时间梯度间的表达差异性。初步筛选出参与川北柴1号及川红柴1号侧根形成过程中的调控基因,为进一步探究功能基因奠定理论基础。研究结果如下:1.川北柴1号及川红柴1号侧根原基形成过程分析通过对川北柴1号和川红柴1号幼嫩主根纵向石蜡切片观测得出,川北柴1号侧根原基起源于靠近木质部中柱鞘细胞,部分内皮层细胞也参与侧根发育过程。侧根原基的发育可分为5个阶段:单细胞层阶段;2³层侧根原基阶段;多细胞层侧根原基阶段... 

【文章来源】：西南科技大学四川省

【文章页数】：95 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
1 绪论
    1.1 柴胡简介
    1.2 国内外研究现状
        1.2.1 柴胡化学成分研究现状
        1.2.2 柴胡药理作用研究现状
        1.2.3 植物侧根发育过程研究现状
        1.2.4 植物侧根发育分子机制研究现状
        1.2.5 植物侧根发育影响因素研究现状
    1.3 研究目的及意义
2 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 试验材料
        2.1.2 试验试剂
        2.1.3 试验仪器
        2.1.4 试验试剂的配制
        2.1.5 试验器具预处理
    2.2 方法
        2.2.1 柴胡幼苗的培育
        2.2.2 生长调节剂的添加
        2.2.3 川红柴1号cDNA的获取
        2.2.4 目的基因的克隆及测序
        2.2.5 生长素调控AUX/IAA、HO基因在侧根形成过程中的表达分析
3 结果分析
    3.1 侧根原基建成
        3.1.1 川北柴1号侧根原基建成
        3.1.2 川红柴1号侧根原基建成
    3.2 生长调节物质对侧根发育的影响
        3.2.1 生长调节物质对川北柴1号侧根发育的影响
        3.2.2 生长调节物质对川红柴1号侧根发育的影响
    3.3 川红柴1号目的基因的克隆及测序
        3.3.1 总RNA的提取
        3.3.2 cDNA验证
        3.3.3 目的基因的克隆及测序
    3.4 生长素调控AUX/IAA、HO基因在侧根形成过程中的表达分析
        3.4.1 总RNA的提取
        3.4.2 cDNA验证
        3.4.3 生长素处理时间梯度对AUX/IAA、HO基因的表达分析
    3.5 AUX/IAA、HO基因生物信息学分析
        3.5.1 碱基序列同源性比对分析
        3.5.2 氨基酸序列同源性比对分析
        3.5.3 氨基酸一级结构预测分析
        3.5.4 氨基酸二级结构预测分析
        3.5.5 氨基酸保守结构域、序列多重比对及进化树分析
4 讨论
    4.1 柴胡幼苗水培法条件探索
    4.2 候选AUX/IAA、LBD、HO基因的克隆及测序分析
    4.3 AUX/IAA、HO基因参与生长素调控侧根发育表达分析
        4.3.1 AUX/IAA基因参与生长素调控侧根发育表达分析
        4.3.2 HO基因参与生长素调控侧根发育表达分析
结论
致谢
参考文献
攻读学位期间发表的与学位论文内容相关的学术论文及研究成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]马尔康柴胡不同药用部位解热、保肝作用与急性毒性研究[J]. 闫婕,卫莹芳,龙飞,林波,康敏.  世界科学技术-中医药现代化. 2016(08)
[2]赤霉素对拟南芥主根分生区和伸长区的调控[J]. 石英,韩毅强,郑殿峰,冯乃杰,刘涛.  植物生理学报. 2015(01)
[3]春柴胡中柴胡皂苷a与d的含量测定[J]. 朱明恒.  云南中医中药杂志. 2014(07)
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[5]水稻的侧根发育及其影响因素[J]. 刘大同,荆彦平,陈晶晶,余徐润,王忠.  作物学报. 2014(08)
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博士论文
[1]竹叶柴胡和北柴胡品质比较研究[D]. 王砚.成都中医药大学 2014
[2]花生开花下针期生长素的极性运输及分布研究[D]. 彭琼.湖南农业大学 2013

硕士论文
[1]柴胡醋制前后的化学及药理比较研究[D]. 孙慧敏.山西大学 2015
[2]柴胡质量研究及2010年版《中国药典》柴胡质量标准制订[D]. 黄帅.石河子大学 2010



本文编号：3154897