新型壳聚糖纳米载体在肺癌基因靶向抑瘤中的应用研究

发布时间：2021-04-26 20:46

　　目的基因的靶向治疗是近年来抗肿瘤研究的热点,而制备具有高效肿瘤靶向定位能力的药物输送载体是靶向治疗的关键。壳聚糖（chitosan,CS）纳米载体凭借其优良的生物学性能在组织工程载体中备受关注。本研究利用透明质酸（hyaluronic acid,HA）受体CD44在非小细胞肺癌（NSCLC）中的高表达性,制备HA修饰的新型壳聚糖纳米载体,探讨其作为基因靶向递送载体的可行性,为NSCLC的基因靶向治疗提供新的理论依据。方法用CS和三聚磷酸钠（sodium tripolyphosphate,TPP）通过离子凝胶的方法制备壳聚糖纳米粒（chitosan nanoparticles,CS NPs）;再将CS NPs包载针对Bcl-2基因的siRNA后制备sCS NPs;将CS NPs和sCS NPs与透明质酸（hyaluronic acid,HA）结合制备CS NPs-HA和sCS NPs-HA。粒度仪检测四种纳米粒的粒径、Zeta电位、分散度（polydispersity index,PDI）等参数;并在连续6天时间内检测其在中性缓冲体系下的稳定性;扫描电镜（scanning electro... 

【文章来源】：青岛大学山东省

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
引言
材料与方法
    1 仪器与试剂
        1.1 实验仪器设备
        1.2 材料和试剂
        1.3 实验细胞
        1.4 实验动物
    2 壳聚糖纳米粒（Chitosannanoparticles,CSNPs）
        2.1 壳聚糖纳米粒制备
        2.2 壳聚糖纳米粒的参数及表面结构表征
        2.3 壳聚糖纳米粒对siRNA包载能力的评估
            2.3.1 紫外分光光度法
            2.3.2 琼脂糖凝胶电泳法
        2.4 评价壳聚糖纳米粒的稳定性
    3 评价壳聚糖纳米粒细胞毒性及抑制肿瘤细胞增殖的能力
        3.1 检测壳聚糖纳米粒细胞毒性
        3.2 检测壳聚糖纳米粒包载siRNA后抑制A549 细胞增殖的能力
    4 包载siRNA的壳聚糖纳米粒对A549 细胞转染能力的评估
    5 细胞免疫荧光检测sCSNPs-HA对 CD44 受体的激活情况
    6 检测Bcl-2 基因的表达水平
    7 体内抑瘤效果评价
        7.1 动物实验分组
        7.2 siRNA基因靶向治疗
        7.3 壳聚糖纳米粒体内毒性检测
    8 裸鼠体内治疗效果检测
        8.1 壳聚糖靶向纳米载体的肿瘤定位能力
        8.2 肿瘤组织中Bcl-2 基因表达水平检测
    9 统计学分析
结果
    1 壳聚糖纳米粒性质
        1.1 壳聚糖纳米粒的参数及表面结构
        1.2 壳聚糖纳米粒对siRNA的包载能力
        1.3 壳聚糖纳米粒的稳定性
    2 壳聚糖纳米粒细胞毒性及对肿瘤细胞的抑制作用
        2.1 壳聚糖纳米粒细胞毒性
        2.2 壳聚糖纳米粒抑制A549 细胞增殖的能力
    3 包载siRNA的壳聚糖纳米粒对A549 细胞的转染效率
    4 sCS NPs-HA在 A549 细胞内的定位与CD44 受体激活
    5 Bcl-2 基因表达水平
    6 裸鼠体内实验
        6.1 裸鼠体内肿瘤生长抑制效果
        6.2 壳聚糖纳米粒的体内毒性
        6.3 包载siRNA的壳聚糖纳米粒在裸鼠体内肿瘤的定位
        6.4 Bcl-2 基因在裸鼠肿瘤内的表达水平
讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
缩略词表（附录）
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]癌症分子靶向治疗的研究现状[J]. 董兵,朱毅敏.  癌症. 2010(03)
[2]壳聚糖的纳米化及其生物学效应[J]. 周少华,陈勇,洪艳.  中国组织工程研究与临床康复. 2007(26)
[3]壳聚糖及其衍生物作为基因递送载体的研究进展[J]. 赵雪,任慧霞.  食品与药品. 2006(02)
[4]肺癌基因治疗的研究现状[J]. 金沅武,王哲海.  医学综述. 2006(02)
[5]壳聚糖纳米粒用作基因递送载体的初步研究[J]. 黄伟,崔光华,贺俊峰,周旭,张强.  药学学报. 2002(12)
[6]肺癌的基因治疗[J]. 路兰.  武汉科技大学学报(自然科学版). 2002(01)



本文编号：3162090