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多抗转基因马铃薯植株的获得及农杆菌介导试管薯遗传转化体系优化

发布时间:2021-05-10 13:23
  以马铃薯品种陇薯11号试管薯为受体材料,通过农杆菌介导法,将PVX、PVS、PVY和PLRV 4种病毒CP融合基因导入马铃薯,并对影响遗传转化的因素进行了优化。结果表明,薯片分化和生根阶段的选择压分别为Kan 50、75 mg/L,薯片分化和生根阶段有效抑菌浓度分别为Cb 500、200 mg/L,农杆菌活化时间为4.5 h、侵染时间为7 min、共培养时间为2 d时利于遗传转化。通过该体系将4种病毒CP融合基因导入马铃薯,获得了具卡那霉素抗性的转化植株,经PCR检测,外源基因已导入马铃薯基因组中。 

【文章来源】:甘肃农业科技. 2020,(11)

【文章页数】:6 页

【文章目录】:
1 材料与方法
    1.1 试验材料
    1.2 培养基
    1.3 转化外植体的获得
    1.4 遗传转化体系优化
        1.4.1 诱导芽与生根选择压确定
        1.4.2 农杆菌工程菌生长曲线
        1.4.3 侵染时间
        1.4.4 共培养时间
        1.4.5 抑菌剂浓度
    1.5 转基因植株鉴定
2 结果与分析
    2.1 Kan浓度对试管薯片芽分化及生根的影响
    2.2 农杆菌工程菌活化时间确定
    2.3 侵染时间对转化的影响
    2.4 共培养时间对转化的影响
    2.5 Cb对转化的影响
    2.6 转基因植株的PCR检测
3 小结与讨论


【参考文献】:
期刊论文
[1]NaCl胁迫对马铃薯试管苗POD酶活性及同工酶的影响[J]. 裴怀弟,刘润萍,林玉红,李淑洁,吕汰.  甘肃农业科技. 2020(06)
[2]种植方式对高寒阴湿旱作区马铃薯的影响[J]. 罗爱花,陆立银,胡新元,谢奎忠,柳永强,孙小花.  甘肃农业科技. 2020(Z1)
[3]四价抗马铃薯病毒植物表达载体构建及其对烟草的转化[J]. 陈晓艳,孟亚雄,贾小霞,张武,刘石,郭玉美,齐恩芳.  广西植物. 2017(01)
[4]‘陇薯3号’和‘陇薯7号’试管结薯关键条件优化[J]. 齐恩芳,王一航,文国宏,贾小霞.  中国马铃薯. 2015(03)
[5]转录因子DREB1A基因和Bar基因双价植物表达载体的构建及对马铃薯遗传转化的研究[J]. 贾小霞,齐恩芳,王一航,文国宏,龚成文,王红梅,李建武,马胜,胡新元.  草业学报. 2014(03)
[6]CryⅢA基因植物表达载体构建及马铃薯遗传转化[J]. 尤佳,张宁,文义凯,吴家和,司怀军,王蒂.  草业学报. 2014(01)
[7]马铃薯淀粉体表达载体的构建及其转基因植物的培养[J]. 李珺,马力通.  江苏农业科学. 2013(08)
[8]马铃薯试管薯诱导及其遗传转化体系的优化[J]. 李有忠,刘海英,张宁,司怀军,王蒂.  生物技术. 2008(03)
[9]抗菌肽基因导入马铃薯“甘农薯1号”的初步研究[J]. 邢小萍.  甘肃农业科技. 2004(11)
[10]根癌农杆菌介导的马铃薯高效遗传转化体系的研究[J]. 张宁,司怀军,李学才,王蒂.  中国马铃薯. 2004(03)

博士论文
[1]利用转基因技术培育马铃薯(Solanum tuberosum L.)高淀粉及抗病新品系[D]. 贾笑英.甘肃农业大学 2006

硕士论文
[1]马铃薯再生体系的建立及遗传转化的研究[D]. 李晶.东北农业大学 2003



本文编号:3179440

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