胶体金试纸条同时检测易感基因和肿瘤标志物

发布时间：2021-05-26 13:58

　　肝癌是世界上最常见的癌症之一,是消化系统常见的恶性肿瘤,早期很难察觉,一旦发现大多是晚期,死亡率极高。因此,早诊断早治疗显得尤为重要。肿瘤标志物和基因检测可用于癌症的早期筛查。基因CYP1A1与癌症的发生密切相关,肿瘤标志物甲胎蛋白（AFP）也是肝癌普查的重要指标之一,因此检测这两种物质具有重要意义。传统的检测SNP的方法依赖于凝胶电泳或基因测序技术,对仪器要求高,限制了应用范围。广泛用于临床的AFP检测方法有酶联免疫吸附测定、荧光免疫分析、质谱等,这些方法灵敏度高,均能实现对血清中肿瘤标志物的快速、准确、半定量检测,但是仪器昂贵,需专业技术人员操作,检测成本高,不能实现即时检测。因此,探索即时检测方法具有研究价值。胶体金层析试纸条是一种基于比色法的检测方法,利用胶体金的颜色深浅,实现裸眼半定量检测。胶体金层析试纸条具有操作简单、检测快速、应用成本低、能用于即时检测等优点,被广泛用于医学诊断、环境监测和食品安全检测等领域。酶信号放大技术是一种优良的信号放大手段,利用酶的催化效果,能够提高检测的灵敏度。辣根过氧化物酶（HRP）能催化底物3-氨基-9-乙基咔唑（AEC）生成红色不溶物,将H... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
    1.1 肝癌概述
    1.2 SNP及常见的检测方法
    1.3 肿瘤标志物AFP及检测
    1.4 胶体金层析试纸条
    1.5 酶信号放大技术
    1.6 本研究的目的、意义及主要内容
2 实验部分
    2.1 试剂和材料
    2.2 仪器
    2.3 制备胶体金
    2.4 制备胶体金标记核酸探针
    2.5 制备胶体金双标记AFP抗体和核酸复合探针(Anti-AFP-AuNP-A-4)
    2.6 制备胶体金双标记HRP和核酸复合探针(HRP-AuNP-T-4)
    2.7 制备胶体金双标记AFP单抗和生物化核酸探针偶联SA·HRP(Anti-AFP-AuNP-DNA-Biotin-SA·HRP)
    2.8 人类基因组DNA的提取及相关片段单链扩增
    2.9 胶体金层析试纸条的制备及组装
    2.10 样品检测过程
    2.11 本章小结
3 结果与分析
    3.1 检测策略
    3.2 胶体金双标记AFP单抗和生物化核酸偶联SA·HRP(Anti-AFP-AuNP-DNA-Biotin-SA·HRP)检测易感基因和AFP
    3.3 酶信号放大效果分析
    3.4 胶体金及金标复合探针的表征
    3.5 优化实验条件
    3.6 灵敏度
    3.7 选择性
    3.8 重现性
    3.9 实际样品的检测
    3.10 本章小结
4 总结与展望
    4.1 全文总结
    4.2 展望
致谢
参考文献
附录1 攻读硕士学位期间发表论文目录
附录2 主要缩略词表


【参考文献】：
期刊论文
[1]中国2003-2007年肝癌发病率与死亡率分析[J]. 陈建国,陈万青,张思维,郑荣寿,朱健,张永辉.  中华流行病学杂志. 2012 (06)
[2]中国人群肝癌的易感基因研究[J]. 周钢桥,贺福初,张红星.  中国科学:生命科学. 2011(10)
[3]基因-环境相互作用与人类疾病的关系[J]. 冀芳,夏昭林.  复旦学报(医学版). 2007(06)

博士论文
[1]新型血清肝脏肿瘤标志物研究及肝癌诊断模型建立[D]. 李波.中国人民解放军医学院 2016
[2]基于荧光淬灭的SNP检测方法的建立及应用[D]. 徐祎春.华东理工大学 2016

硕士论文
[1]小地域范围内肝癌的空间流行病学特征分析[D]. 曲静.山东大学 2018
[2]环境因素及母亲CYP1A1、CYP17A1基因多态性与子代单纯性尿道下裂发病研究[D]. 张康.沈阳医学院 2018
[3]基于高通量数据对宫颈癌和肝癌标志物的研究[D]. 陈谦.广西医科大学 2017
[4]甲胎蛋白与原发性肝癌患者术后预后相关性分析[D]. 王仕模.天津医科大学 2017
[5]CYP1A1基因多态性与新疆维、汉民族女性乳腺癌相关性研究[D]. 帕孜来提·阿布都热西提（Pazilat Abdurixit）.新疆医科大学 2016
[6]基于适配子的小肝癌诊断研究[D]. 黄增勇.南昌大学医学院 2015
[7]原发性肝细胞癌患者癌组织、癌旁肝组织及血清中HBV BCP区变异位点的研究[D]. 韩学文.苏州大学 2013



本文编号：3206488