棉花与烟粉虱互作相关基因的克隆及功能验证

发布时间：2021-07-07 06:45

　　棉花作为一种重要的天然纺织资源,在其生长发育过程中总是面临着各种各样植食性害虫的取食,造成大幅度减产。随着BT棉的大面积推广种植,BT非靶标害虫烟粉虱（Bemisia tabaci）、盲椿象等刺吸式昆虫已由次生害虫逐渐上升为主要害虫,因此,研究烟粉虱与棉花互作的分子机制,挖掘潜在的抗虫基因具有重要意义。本课题从棉花与烟粉虱互作的转录组数据中选择了棉花与烟粉虱互作相关的8个基因,分别是GhWRKY18、GhWRKY21、GhWRKY32、GhWRKY40、GhWRKY46、GhWRKY70、GhERF105、Gh6PGL2,通过创造这8个基因的RNAi和超表达转基因材料来验证它们在棉花抗虫信号路径中所起的作用。1、通过构建系统发育树对陆地棉中的WRKY转录因子进行分组,结果显示GhWRKY32属于第Ⅰ组,GhWRKY18和GhWRKY40都属于第II-a组,GhWRKY21属于第Ⅱ-d组,GhWRKY46和GhWRKY70属于第III组。通过分析WRKY转录因子在烟粉虱诱导下的表达模式,结果显示这6个WRKY转录因子在陆地棉中可能积极地响应烟粉虱的胁迫。本研究共构建6个RNAi载体和4个... 

【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：80 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

RNAi干涉载体和超表达载体的示意图

虫鉴定试验设计间播种试验设计获得的各株系的种子剥好用升汞杀菌后，播种于加入基中，28℃暗培养 1 天之后扶苗，放入光照培养室继养基中拿出，在光照培养室水培 5-6 天之后播种在营给与合适的生长条件；待到 5 月初，选择生长健壮入华中农业大学转基因试验基地。据情况进行防虫用药，为了客观科学地反映转基因68（对照）对于抗虫性状的变化，在田间种植时采用相间种植（如图 2-2）以及作为整个试验田的保护行3 株阳性材料作为生物学重复。

华中农业大学 2018 届硕士研究生学位（毕业）论文2）陆地棉 WRKY 转录因子的系统进化树从陆地棉基因组注释文件中共筛选出 265 个 WRKY 转录因子，除去没有完整 WRKY 结构域的的基因和锚定在 scaffold 上的 5 个基因，共筛选出 224 个WRKY 转录因子，从 TAIR 数据库中共筛选出 72 个拟南芥 WRKY 转录因子。利用 MEGA5 对陆地棉中的 224 个 WRKY 转录因子进行系统进化树分析，如图 4 所示，这 224 个 WRKY 转录因子中的按照第 I 组、第 II 组和第 III 组分别聚类到一起，第 II 组又继续可以分为Ⅱ-a、Ⅱ-b、Ⅱ-c、Ⅱ-d 和Ⅱ-e 五个亚组。

【参考文献】：
期刊论文
[1]植物转基因技术研究进展[J]. 骆翔,刘志颐,章树民,申硕,王德福,王劲松.  中国农学通报. 2014(15)
[2]国际棉花生产及贸易格局分析[J]. 杨莲娜,田秀华.  中国棉花加工. 2014(01)
[3]棉花主要害虫抗性治理技术获突破[J]. 郑庆伟.  农药市场信息. 2013(28)
[4]我国棉花生产现状与发展趋势[J]. 喻树迅.  中国工程科学. 2013(04)
[5]Q型烟粉虱在浙江局部地区大量发生危害[J]. 徐婧,王文丽,刘树生.  植物保护. 2006(04)
[6]烟粉虱生物型研究进展[J]. 褚栋,毕玉平,张友军,娄蕴萍.  生态学报. 2005(12)
[7]烟粉虱不同地理种群的mtDNA COI基因序列分析及其系统发育[J]. 褚栋,张友军,丛斌,徐宝云,吴青君,朱国仁.  中国农业科学. 2005(01)
[8]我国烟粉虱的发生危害和防治对策[J]. 张芝利,罗晨.  植物保护. 2001(02)
[9]棉子蛋白综合利用回顾与展望[J]. 杨伟华,项时康.  中国棉花. 2000(03)

博士论文
[1]海岛棉乙烯响应因子GbERF1-like在抗黄萎病反应中的功能解析[D]. 郭伟锋.华中农业大学 2016

硕士论文
[1]棉花转录因子GhWRKY40-like和GhWRKY70在抗黄萎病中的功能研究[D]. 张坤.华中农业大学 2015



本文编号：3269152