4种实时荧光PCR试剂在大米转基因检测中的应用比较

发布时间：2021-08-13 06:00

　　本文比较评价了4种荧光PCR试剂在大米转基因检测中的应用效果,筛选出最适合转基因成分检测的试剂,并建立相关检测方法体系。将同一大米样品提取的核酸做5个浓度梯度,用4种不同品牌的荧光探针PCR试剂同时扩增大米内源Gos9基因,分析4种试剂检测结果的差异和相关性。4种试剂对目标基因均有特异性扩增,模板量最高（250 ng）时,编号为Ti的试剂扩增的Ct值最小（23.36）,Bi是25.19,Pr和Ta差异不明显（分别为27.76和27.35）;当模板量为25 pg时,编号为Bi的试剂扩增的Ct值最小（35.45）,其余分别为Ta（37.85）、Ti（35.85）和Pr（42.26）。由结果可以看出,Bi试剂的扩增效率、灵敏度和稳定性都优于其他试剂,特别是在模板量浓度低的情况下检测结果最佳。不同试剂对相同模板的扩增效率不同,综合评价得出Bi试剂的稳定性、灵敏度和准确度在4种试剂中最好,可稳定用于大米及其加工产品的转基因检测。 

【文章来源】：中国口岸科学技术. 2020,(07)

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
引言
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 转基因大米样品
        1.1.2 试剂和仪器
        1.1.3 引物和探针
    1.2 方法
        1.2.1 大米基因组DNA提取
        1.2.2 模板DNA准备
        1.2.3 实时荧光PCR扩增
2 结果与分析
    2.1 实时荧光PCR对大米Gos9基因的扩增结果
    2.2 实时荧光PCR结果对转基因检测影响的分析
3 讨论
4 结论


【参考文献】：
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本文编号：3339893