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水稻DNA甲基转移酶基因CMT2/3抑制材料的构建和效应研究

发布时间:2021-08-21 19:17
  DNA甲基化是一种非常重要而且保守的表观修饰,它可维持基因组中重复序列和转座子元件的沉默,并抑制它们的转录。植物DNA甲基化主要发生在CG,CHG和CHH(H代表A,C或者T)三种类型序列上。CMT2和CMT3是植物特有的DNA甲基转移酶,共同维持non-CG(CHG和CHH)序列的DNA甲基化修饰。在本研究中,我们主要构建了水稻中OsCMT2、OsCMT3a和OsCMT3b的转基因材料并完成表型观察统计工作以及初步探讨了它们对水稻基因组DNA甲基化的调控机制。主要研究结果如下:1.获得OsCMT2 RNAi转基因材料30个家系,对各自家系的OsCMT2 mRNA表达量进行分析,但未发现表型差异。获得有效应Oscmt2 T-DNA插入突变体,对Oscmt2突变体进行回交两次清除转基因引起的变异,发现该突变体表现为花粉育性显著降低,这说明DNA甲基化酶参与水稻花粉的发育。利用CRISPR-Cas9技术获得HY(Hwayoung)背景的Oscmt2敲除材料,发现T0代幼苗有较高比例的黄化苗和早开花苗出现。2.获得OsCMT3a RNAi转基因材料24个家系,对各自家系的OsCMT3a mR... 

【文章来源】:华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:67 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

水稻DNA甲基转移酶基因CMT2/3抑制材料的构建和效应研究


动植物DNA甲基化分布特征

重头,DNA甲基化,位点,哺乳动物


乳动物中非 DNA 甲基化的 H3K4 位点招募重头甲基化的复合体(Lawsen 2010) Model of recruitment of the de novo methylation machinery by unmethe 3 lysine 4 tail in mammals.植物特有 RdDM 途径中,RNA 聚合酶 Pol IV 转录单链长 RNA(long色 质 变 构 因 子 CLSY1 的 协 助 下 经 由 RDR2(RNA-DEOENDENMERASE 2)完成双链 RNA,然后 DCL3(DICER-LIKE 3)对长链双大量 24nt 的 siRNA,siRNA 与 AGO4(ARGONAUTE4)整合成复合体,NA 找到由 RNA 聚合酶 Pol V 转录出和 siRNA 互补匹配的非编码 R 作用下对靶位点完成 DNA 甲基化修饰(Haag and Pikaard 2011; Matr 2014)(图 4)。

甲基转移酶,结构模式,双链,聚合酶


图 2 哺乳动物中非 DNA 甲基化的 H3K4 位点招募重头甲基化的复合体(Law andJacobsen 2010)Fig. 2 Model of recruitment of the de novo methylation machinery by unmethylatedhistone 3 lysine 4 tail in mammals.在植物特有 RdDM 途径中,RNA 聚合酶 Pol IV 转录单链长 RNA(long RNA),在 染 色 质 变 构 因 子 CLSY1 的 协 助 下 经 由 RDR2(RNA-DEOENDENT RNAPOLYMERASE 2)完成双链 RNA,然后 DCL3(DICER-LIKE 3)对长链双链 RNA剪切成大量 24nt 的 siRNA,siRNA 与 AGO4(ARGONAUTE4)整合成复合体,最后通过 siRNA 找到由 RNA 聚合酶 Pol V 转录出和 siRNA 互补匹配的非编码 RNA,在DRM2 作用下对靶位点完成 DNA 甲基化修饰(Haag and Pikaard 2011; Matzke andMosher 2014)(图 4)。


本文编号:3356184

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