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中华按蚊与溴氰菊酯抗性相关ABC转运蛋白基因的鉴定、筛选及功能研究

发布时间:2021-09-12 13:34
  腺苷三磷酸结合盒转运蛋白(ATP—binding cassette transporter),ABC转运蛋白)是一类广泛存在于古细菌、细菌和真核生物中的膜蛋白。ABC转运蛋白可以参与多种内外源有毒物质的吸收、积累和排泄,在机体组织防御过程中起着重要作用,与动物或昆虫的抗药性密切相关。中华按蚊是疟疾和马来丝虫病的重要传播媒介,广泛分布于东亚及东南亚地区。由于拟除虫菊酯类杀虫剂(尤其是溴氰菊酯)的广泛使用,中华按蚊对该类药物的抗性已日趋严重,成为蚊虫防治的主要障碍。目前,尚无关于中华按蚊ABC转运蛋白基因及其与溴氰菊酯抗性的研究报道。本研究拟通过生物信息学分析方法,对中华按蚊基因组数据库中潜在的ABC转运蛋白基因进行鉴定、并对其命名、结构域、基因结构、scaffold分布和系统发育等进行研究,为进一步研究中华按蚊ABC转运蛋白基因的功能提供重要的信息基础。通过RNA-seq和qPCR对中华按蚊中与溴氰聚酯抗性相关ABC转运蛋白基因进行筛选,采用RNAi、ATPase活性检测以及分子对接对筛选基因进行功能学研究。本文的主要研究内容和结果包括:(1)基于中华按蚊基因组数据,我们在中华按蚊中鉴定... 

【文章来源】:重庆大学重庆市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:116 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

中华按蚊与溴氰菊酯抗性相关ABC转运蛋白基因的鉴定、筛选及功能研究


典型的“全分子”ABC转运蛋白结构[26]

模型图,门控,模型图,蛋白


重庆大学博士学位论文4后,ATP水解使NBD二聚体分离,TMD构象由朝外变为朝内的起始构象[14,39,40]。ABC内向转运蛋白通过交替开放模型将底物转入胞内[41,42](图1.3)。该模型在静息状态是向内的,其中NBD二聚体结构向外打开。当载有底物的结合蛋白与TMD对接时,两个ATP分子结合到NBD上,形成封闭的NBD二聚体结构。此时,静息状态转变为向外的构象,TMD从结合蛋白中接收底物。ATP水解后,NBD二聚体打开,底物释放到细胞质中。ADP和pi的释放使转运蛋白恢复到最初的构象,回到下一个转运循环的开始。图1.2ABC外向转运蛋白转运机制模型图——ATP门控模型[34,38]Fig.1.2TheATPswitchmodelforthetransportercycleofanABCexporter图1.3ABC内向转运蛋白转运模型图——交替开放模型[41,42]Fig.1.3Thealternating-accessmodelforthetransportercycleofanABCimporterCytoplasmPeriplasm

模型图,开放模型,模型图,蛋白


重庆大学博士学位论文4后,ATP水解使NBD二聚体分离,TMD构象由朝外变为朝内的起始构象[14,39,40]。ABC内向转运蛋白通过交替开放模型将底物转入胞内[41,42](图1.3)。该模型在静息状态是向内的,其中NBD二聚体结构向外打开。当载有底物的结合蛋白与TMD对接时,两个ATP分子结合到NBD上,形成封闭的NBD二聚体结构。此时,静息状态转变为向外的构象,TMD从结合蛋白中接收底物。ATP水解后,NBD二聚体打开,底物释放到细胞质中。ADP和pi的释放使转运蛋白恢复到最初的构象,回到下一个转运循环的开始。图1.2ABC外向转运蛋白转运机制模型图——ATP门控模型[34,38]Fig.1.2TheATPswitchmodelforthetransportercycleofanABCexporter图1.3ABC内向转运蛋白转运模型图——交替开放模型[41,42]Fig.1.3Thealternating-accessmodelforthetransportercycleofanABCimporterCytoplasmPeriplasm

【参考文献】:
期刊论文
[1]RNAi在昆虫基因功能研究中的应用进展[J]. 张涛,郅军锐,叶茂.  山地农业生物学报. 2018(06)
[2]RNA-Seq技术在转录组研究中的应用[J]. 孙洪计,魏慧君.  中外医学研究. 2018(20)
[3]苦参碱对人膀胱癌BIU-87/ADM细胞多药耐药的影响[J]. 左陵君,张耘新,段建敏.  中国中医药信息杂志. 2016(02)
[4]植物ATP结合盒(ABC)转运蛋白研究进展[J]. 邵若玄,沈忆珂,周文彬,方佳,郑炳松.  浙江农林大学学报. 2013(05)
[5]系统RNA干扰及在昆虫中的应用[J]. 王会冬,龚亮,胡美英,洪鹏.  生物技术通报. 2012(12)
[6]昆虫RNAi效率的影响因素研究进展[J]. 李良德,刘婕,姜春来,赖先文.  生物技术通报. 2012(11)
[7]RNA干扰在昆虫中的作用机理及应用进展[J]. 施秀珍,吴青君,王少丽,徐宝云,谢文,张友军.  生物安全学报. 2012(03)
[8]溴氰菊酯应用的研究[J]. 罗守进.  农业灾害研究. 2012(03)
[9]橡胶树一个胶乳高表达MDR型ABC转运蛋白的克隆与表达研究[J]. 聂智毅,李波,白瑞璞,黎瑜.  中国农学通报. 2011(12)
[10]ABC转运蛋白研究的新进展[J]. 马云芳,梁国鲁,裴得胜,崔宗斌.  生物技术通报. 2008(05)

博士论文
[1]药用植物ABC转运蛋白基因的克隆与特征研究[D]. 金宏滨.上海交通大学 2007



本文编号:3394315

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