SAE2基因对胆管癌细胞上皮间质转化的影响
发布时间:2021-10-01 06:01
目的:通过研究SAE2基因过表达和SAE2基因干扰表达的胆管癌细胞株的细胞增殖活性、细胞凋亡、细胞侵袭力的改变,探究SAE2基因对胆管癌细胞上皮间质化(EMT)的影响。方法:应用脂质体转染法,通过转染胆管癌系细胞,将SAE2基因重组真核表达质粒,建立稳定表达的SAE2基因细胞株。将其分为以下3组:SAE2过表达组,敲减SAE2组和空质粒组。RT-PCR及Western blot法可以通过追踪荧光来判断SAE2mRNA水平及蛋白水平的变化;各组细胞增殖MTT和流式细胞仪检测前颜色的实验后(FCM)检测各组细胞凋亡;Transwell细胞体外侵袭力实验检测肿瘤细胞入侵的变化。结果:RT-PCR检测和WB检测结果显示,SAE2过表达组细胞中,SAE2 m RNA和蛋白表达高于敲减SAE2组,SAE2 mRNA和蛋白表达高于空质粒组,两组比较差异均具有统计学意义(p<0.05)。敲减SAE2组细胞中,SAE2 mRNA和蛋白表达低于空质粒组,两组比较差异均具有统计学意义(p<0.05)。MTT比色实验测定结果显示,各组细胞在1d时,MTT OD值两组比较差异没有统计学意义(P>...
【文章来源】:青岛大学山东省
【文章页数】:43 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
各组细胞SAE2mRNA及蛋白表达比较
青岛大学硕士学位论文(P>0.05),2d 时,SAE2 过表达组细胞 MTT OD 值高于敲减 S.580, P=0.002),高于空质粒组(t=2.493, P=0.037),敲减 SAE2 组 OD 比较,差异无统计学意义(P>0.05),3d 时,SAE2 过表达组细胞 M敲减 SAE2 组(t=5.349, P=0.001),高于空质粒组(t=3.008, P=0.017)胞 MTT OD 值高于敲减 SAE2 组(t=2.327, P=0.048),差异具有统见表 2,图 2。表 2 各组细胞增殖活性比较(OD)组别 1d 2d 3dAE2 过表达组 0.33±0.08 0.58±0.10*#0.78±0.1敲减 SAE2 组 0.31±0.08 0.33±0.07 0.44±0.空质粒组 0.33±0.07 0.43±0.09 0.58±0.注:与敲减 SAE2 组比较,*P<0.05;与空质粒组比较,#P<0.05
第二章 实验结果计数的百分比低于敲减 SAE2 组(t=2.642, P=0.030),差异具有统计学意表 3,图 3。表 3 各组细胞凋亡情况比较(%)组别 1d 2d 3dSAE2 过表达组 5.13±0.92 9.62±1.73*#10.87±2.06敲减 SAE2 组 5.17±0.98 13.67±2.13 17.78±2.17空质粒组 5.16±0.89 12.93±2.18 14.38±1.89注:与敲减 SAE2 组比较,*P<0.05;与空质粒组比较,#P<0.05
【参考文献】:
期刊论文
[1]术前吉西他滨联合顺铂新辅助化疗在局部晚期非小细胞肺癌外科手术的应用价值探讨[J]. 姜军,杨晓光. 中国医药指南. 2016(30)
[2]SUMO修饰在细胞凋亡中的调控作用[J]. 吴沪军,温顺航,李昌崇. 医学研究杂志. 2015(08)
[3]肝门部胆管癌患者行肝移植和根治切除术后生存结果的对比分析[J]. 刘芙蓉,林月明,何晓顺,章诚,马毅,朱晓峰,王国栋,胡安斌. 中华医学杂志. 2015 (26)
[4]蛋白质Sumo化修饰原核表达系统的构建[J]. 唐波,杜娟,杨力侠,王小海,吴海波,吴勇延,郭泽坤. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2012(10)
[5]上皮-间质细胞转化与妇科肿瘤[J]. 李昕凌,江静,卢士燕,王振海. 中华妇产科杂志. 2012 (07)
[6]基质金属蛋白酶-2在胆管癌组织中的表达及与预后的关系[J]. 肖广发,汤恢焕. 第四军医大学学报. 2008(17)
[7]C反应蛋白对新诊2型糖尿病患者颈总动脉内中膜厚度进展的预测作用[J]. 刘玉华,周智广,宁洁,黄干,唐炜立,谭少珍,刘志文,何霞,熊斌. 中华全科医师杂志. 2006(05)
[8]胆管癌组织Smad4和转化生长因子β1及Ⅱ型受体的表达及意义[J]. 张炳远,张建余,赵凯,吴力群. 中华外科杂志. 2005(13)
[9]胆管癌组织中真核细胞翻译起始因子4E和基质金属蛋白酶-9的表达及临床意义的研究[J]. 刘子沛,朱瑾,周金莲,熊燕,王曙光. 消化外科. 2005(02)
硕士论文
[1]Wentilactone A对小细胞肺癌增殖抑制和诱导凋亡的分子机制研究[D]. 姜文丽.第二军医大学 2016
[2]海藻糖对奶山羊睾丸组织冷冻保存效果的影响[D]. 张小刚.西北农林科技大学 2016
[3]miR-192靶向TCF7基因对骨肉瘤细胞增殖和侵袭的抑制作用[D]. 关红亚.郑州大学 2016
[4]蛋白质SUMO化E2连接酶UBE2I与干扰素诱导蛋白Nmi相互作用区域的研究[D]. 刘胜烽.暨南大学 2015
[5]SIRT1、acetyl-P53、c-Myc在乳腺癌中的表达及其对预后的影响[D]. 宋新峰.山西医科大学 2013
[6]LPS诱导胆管上皮细胞Toll样受体4及上皮—间叶样表型转化相关标志物表达变化的实验研究[D]. 梁垲.遵义医学院 2013
[7]胆管癌的危险因素与发病机理研究现状综述[D]. 阎晶璐.北京中医药大学 2011
[8]E-钙粘附素及基质金属蛋白酶-9的表达与胆管癌浸润、转移和预后的相关研究[D]. 汪正广.安徽医科大学 2003
本文编号:3417285
【文章来源】:青岛大学山东省
【文章页数】:43 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
各组细胞SAE2mRNA及蛋白表达比较
青岛大学硕士学位论文(P>0.05),2d 时,SAE2 过表达组细胞 MTT OD 值高于敲减 S.580, P=0.002),高于空质粒组(t=2.493, P=0.037),敲减 SAE2 组 OD 比较,差异无统计学意义(P>0.05),3d 时,SAE2 过表达组细胞 M敲减 SAE2 组(t=5.349, P=0.001),高于空质粒组(t=3.008, P=0.017)胞 MTT OD 值高于敲减 SAE2 组(t=2.327, P=0.048),差异具有统见表 2,图 2。表 2 各组细胞增殖活性比较(OD)组别 1d 2d 3dAE2 过表达组 0.33±0.08 0.58±0.10*#0.78±0.1敲减 SAE2 组 0.31±0.08 0.33±0.07 0.44±0.空质粒组 0.33±0.07 0.43±0.09 0.58±0.注:与敲减 SAE2 组比较,*P<0.05;与空质粒组比较,#P<0.05
第二章 实验结果计数的百分比低于敲减 SAE2 组(t=2.642, P=0.030),差异具有统计学意表 3,图 3。表 3 各组细胞凋亡情况比较(%)组别 1d 2d 3dSAE2 过表达组 5.13±0.92 9.62±1.73*#10.87±2.06敲减 SAE2 组 5.17±0.98 13.67±2.13 17.78±2.17空质粒组 5.16±0.89 12.93±2.18 14.38±1.89注:与敲减 SAE2 组比较,*P<0.05;与空质粒组比较,#P<0.05
【参考文献】:
期刊论文
[1]术前吉西他滨联合顺铂新辅助化疗在局部晚期非小细胞肺癌外科手术的应用价值探讨[J]. 姜军,杨晓光. 中国医药指南. 2016(30)
[2]SUMO修饰在细胞凋亡中的调控作用[J]. 吴沪军,温顺航,李昌崇. 医学研究杂志. 2015(08)
[3]肝门部胆管癌患者行肝移植和根治切除术后生存结果的对比分析[J]. 刘芙蓉,林月明,何晓顺,章诚,马毅,朱晓峰,王国栋,胡安斌. 中华医学杂志. 2015 (26)
[4]蛋白质Sumo化修饰原核表达系统的构建[J]. 唐波,杜娟,杨力侠,王小海,吴海波,吴勇延,郭泽坤. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2012(10)
[5]上皮-间质细胞转化与妇科肿瘤[J]. 李昕凌,江静,卢士燕,王振海. 中华妇产科杂志. 2012 (07)
[6]基质金属蛋白酶-2在胆管癌组织中的表达及与预后的关系[J]. 肖广发,汤恢焕. 第四军医大学学报. 2008(17)
[7]C反应蛋白对新诊2型糖尿病患者颈总动脉内中膜厚度进展的预测作用[J]. 刘玉华,周智广,宁洁,黄干,唐炜立,谭少珍,刘志文,何霞,熊斌. 中华全科医师杂志. 2006(05)
[8]胆管癌组织Smad4和转化生长因子β1及Ⅱ型受体的表达及意义[J]. 张炳远,张建余,赵凯,吴力群. 中华外科杂志. 2005(13)
[9]胆管癌组织中真核细胞翻译起始因子4E和基质金属蛋白酶-9的表达及临床意义的研究[J]. 刘子沛,朱瑾,周金莲,熊燕,王曙光. 消化外科. 2005(02)
硕士论文
[1]Wentilactone A对小细胞肺癌增殖抑制和诱导凋亡的分子机制研究[D]. 姜文丽.第二军医大学 2016
[2]海藻糖对奶山羊睾丸组织冷冻保存效果的影响[D]. 张小刚.西北农林科技大学 2016
[3]miR-192靶向TCF7基因对骨肉瘤细胞增殖和侵袭的抑制作用[D]. 关红亚.郑州大学 2016
[4]蛋白质SUMO化E2连接酶UBE2I与干扰素诱导蛋白Nmi相互作用区域的研究[D]. 刘胜烽.暨南大学 2015
[5]SIRT1、acetyl-P53、c-Myc在乳腺癌中的表达及其对预后的影响[D]. 宋新峰.山西医科大学 2013
[6]LPS诱导胆管上皮细胞Toll样受体4及上皮—间叶样表型转化相关标志物表达变化的实验研究[D]. 梁垲.遵义医学院 2013
[7]胆管癌的危险因素与发病机理研究现状综述[D]. 阎晶璐.北京中医药大学 2011
[8]E-钙粘附素及基质金属蛋白酶-9的表达与胆管癌浸润、转移和预后的相关研究[D]. 汪正广.安徽医科大学 2003
本文编号:3417285
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