ACADSB基因对中国荷斯坦奶牛乳脂代谢的影响研究

发布时间：2017-05-03 05:16

  本文关键词：ACADSB基因对中国荷斯坦奶牛乳脂代谢的影响研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：牛奶中含有丰富的营养物质,主要成分是蛋白质和脂肪,乳脂和乳蛋白都是牛乳中重要的营养指标。而奶中的矿物质主要呈溶解状态,丰富的钙,磷,铁,锌,铜,锰,钼等矿物质元素也是牛奶营养的一部分。最难得的是,牛奶是人体钙的最佳来源,而且钙磷比例非常适当,利于钙的吸收,被称之为“白色血液”。随着我国奶牛业迅猛发展,优质牛奶深受人们喜爱。而改善乳品质,更是成为遗传工作者研究的热点。中国荷斯坦奶牛是主要的乳用品种牛,本研究对奶牛的乳用性状进行了测定,主要是对乳脂、乳蛋白、体细胞数、奶量、乳糖、干物质等性状测定,共获得了15头中国荷斯坦奶牛乳用性状的性能测定数据,而本研究将着重点放在了对单一性状乳脂率的研究。从15头中国荷斯坦奶牛中筛选出3头高脂奶牛和3头低脂奶牛进行试验以验证其相关功能,为建立奶牛分子育种工作奠定良好的基础。ACADSB基因是在本课题组前期转录组学分析的基础上,筛选出的与奶牛乳脂代谢相关的候选基因。进一步研究及探讨ACADSB基因是否对乳脂代谢产生影响,期望为改善奶牛乳品质提供重要的指导价值。本研究构建ACADSB基因的RNAi载体和过表达载体,瞬时转染到奶牛的乳腺上皮细胞中,并在m RNA水平和蛋白水平上进行验证。同时对细胞内甘油三酯含量(TG)进行测定,结果发现:过表达ACADSB基因能显著的提高细胞内甘油三酯的含量,而沉默ACADSB基因能显著降低其含量。在此基础上,对在同一环境下生长、身体健康,并同处于泌乳期的15头中国荷斯坦奶牛的乳品质性状进行测定,然后将着重点放在对乳脂率的研究,根据对其乳脂率的分析进而筛选高脂奶牛和低脂奶牛各3头,然后进行试验。宰杀后取奶牛的乳腺组织,提取总RNA,统一浓度后反转录成c DNA,利用q PCR的方法,验证ACADSB基因在不同奶牛乳腺组织中的表达量。通过ACADSB基因对乳脂代谢的影响研究,为中国荷斯坦奶牛的分子遗传育种研究奠定基础,为构建低脂、脱脂奶牛群体指明方向。本研究系统探讨了短支链酰基辅酶A脱氢酶(ACADSB)在乳脂代谢中的作用,该基因的表达水平与脂肪含量成正相关关系,同时可能对细胞甘油三脂代谢存在调控作用。
【关键词】：ACADSB基因 甘油三酯 乳脂代谢 干扰载体 过表达载体
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S823
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 英文缩写表10-11
• 前言11-12
• 第一篇 文献综述12-23
• 第1章 牛的发展概况及奶牛乳用性能测定的意义12-19
• 1.1 牛的生产特点及发展现状12-13
• 1.2 奶牛的主要品种13-14
• 1.3 奶牛的发展趋势14-15
• 1.4 健康奶牛群体的筛选15-16
• 1.5 奶牛的生产测定指标16-19
• 第2章 短支链酰基辅酶A脱氢酶的分子生物学研究进展19-23
• 2.1 基因概况19-20
• 2.2 ACADSB基因的定位及结构20-21
• 2.3 ACADSB基因的研究进展21-23
• 第二篇 研究内容23-60
• 第1章 ACADSB基因干扰和过表达载体的构建23-36
• 1.1 材料23-24
• 1.2 方法24-31
• 1.3 结果31-33
• 1.4 讨论33-35
• 1.5 小结35-36
• 第2章 ACADSB基因对牛乳腺上皮细胞TG含量的影响36-52
• 2.1 材料36-37
• 2.2 方法37-43
• 2.3 结果43-49
• 2.4 讨论49-51
• 2.5 小结51-52
• 第3章 ACADSB基因在奶牛乳腺组织中的表达量差异分析52-60
• 3.1 材料与方法52-54
• 3.2 结果54-57
• 3.3 讨论57-59
• 3.4 小结59-60
• 结论60-61
• 参考文献61-66
• 导师简介66-67
• 作者简介67-68
• 致谢68

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