野生型KRAS等位基因通过YAP1细胞浆阻滞从而在胰腺导管腺癌中发挥其抑癌功能

发布时间：2021-10-09 21:18

　　研究背景:KRAS 是胰腺导管腺癌（Pancreatic Ductal Adenocarcinoma,PDAC）中最常突变的癌基因（～95%）。该基因位点的突变对于人类和小鼠的胰腺肿瘤起始和发展是至关重要的。研究曾报道野生型Kras等位基因在PDAC小鼠模型（p16flox/flox;LSL-KrasG12D;Pdxl-Cremice）的原位癌和转移灶均发生了缺失,并且在转移灶缺失野生型KRAS等位基因的缺失频率显著高于原位肿瘤。然而,野生型KRAS等位基因缺失的机制,以及其在胰腺癌发生发展过程中的功能尚不明确。研究目的:1、探索野生型KRAS等位基因在胰腺肿瘤发生发展中的功能。2、探索野生型KRAS等位基因在胰腺癌细胞中对下游分子信号通路调控的机制。研究方法:1、选取已发生野生型KRAS等位基因缺失的人源胰腺癌细胞系（MIAPaCa-2,AsPC-1）,稳定转染野生型KRAS等位基因,并可由强力霉素（Doxycycline,Dox）诱导其目的基因表达的质粒,获得稳转细胞系（iWTKRASMIAPaCa-2,iWTKRASAsPC-1）。2、通过3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-... 

【文章来源】：南京医科大学江苏省

【文章页数】：115 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１．?ＸＣｅｌｌ?ＩＩ？?Ｂｌｏｔ?Ｍｏｄｕｌｅ转膜仪使用示意图??

（〇Ｈｇ／ｍｌ、ｌ＾ｉｇ／ｍｌ、２ｐ＿ｇ／ｍｌ）尝试下，２ｐｇ／ｍｌＤｏｘ对野生型ＫＲＡＳ等位的诱导效??果最佳。经过该实验，２ｆｉｇ／ｍ丨被选择为Ｄｏｘ诱导野生型ＫＲＡＳ表达的最终工作??液浓度（图２）。??４０??

Ｒ显示在诱导野生型ＫＲＡＳ表达的情况下，内源性突变型Ｋ解Ｄｏｘ诱导野生型ＫＲＡＳ等位基因表达的时间条件，我们ｏｘ?对?ｉＷＴ?ＫＲＡＳ?ＭＩＡＰａＣａ－２?和?ｉＷＴ?ＫＲＡＳ?ＡｓＰＣ－１?细胞系（〇、２、４、８、２４小时）的加药处理，并通过Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ位基因表达水平。整合在野生型ＫＲＡＳ?ｃＤＮＡ上的－ＨＡ标诱导表达的野生型ＫＲＡＳ等位基因。如图４所示，经２４

【参考文献】：
期刊论文
[1]Growth inhibitory effect of wild-type Kras2 gene on a colonic adenocarcinoma cell line[J]. Hong Li, Hou-Fa Cao, Inpatient Department of Medical Health Center, Chinese PLA General Hospital, Beijing 100853, China Jun Wan, Yuan Li, Mei-Ling Zhu, Department of Nanlou Digestion, Chinese PLA General Hospital , Beijing 100853, China Po Zhao, Department of Pathology, Chinese PLA General Hospital, Beijing 100853, China.  World Journal of Gastroenterology. 2007(06)
[2]姜黄素对K562细胞增殖的抑制作用与其下调p210bcr/abl激活的Ras信号途径有关（英文）[J]. 吴丽贤,许建华,吴国华,陈元仲.  Acta Pharmacologica Sinica. 2003(11)



本文编号：3427020