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Ezrin基因敲降对Ox-LDL及血管紧张素Ⅱ诱导Calpain活性、ABCA1降解及细胞内胆固醇含量的影响

发布时间:2021-10-11 21:35
  目的:Ezrin作为Ezrin-Radixin-Moesin(ERM)家族中的细胞骨架蛋白同时也是一种泛表达蛋白,研究表明Ezrin与calpain活性密切相关,ABCA1蛋白是胆固醇逆转运的中心蛋白,calpain可以介导其降解。Ezrin是否在动脉粥样硬化形成中发挥作用尚不清楚。本研究旨在探讨Ezrin基因在动脉粥样硬化中表达规律,进而研究下调Ezrin表达对致动脉粥样硬化因素干预下巨噬细胞Calpain-1的活性、ABCA1蛋白表达及细胞内胆固醇含量影响,以期明确Ezrin在动脉粥样硬化形成中作用。方法:1.高脂饮食喂养ApoE-/-小鼠制作动脉粥样硬化模型,HE染色证实,免疫荧光及免疫组化法检测斑块处Ezrin表达水平。为验证组织学结果,Western blotting检测不同时间、浓度Ox-LDL、血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)对RAW264.7细胞内Ezrin基因表达影响。2.构建Ezrin基因小干扰RNA(siRNA),通过脂质体转染导入RAW264.7细胞中,RT-PCR,Western blotting法检测RAW264.7细... 

【文章来源】:贵州医科大学贵州省

【文章页数】:52 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

Ezrin基因敲降对Ox-LDL及血管紧张素Ⅱ诱导Calpain活性、ABCA1降解及细胞内胆固醇含量的影响


小鼠主动脉组织染色结果(HE,×200)

免疫荧光染色,高脂饮食,动脉粥样斑块,血管内膜


a:普通饮食;b:高脂饮食图 2-2 小鼠主动脉免疫荧光染色结果Fig. 2-2 Ezrin expression in mice atherosclerotic plaques (Immunofluorescenc,×200)同时,对两组动脉切片,进行免疫组化检测,再次验证Ezrin 表达水平,结果证实,相比较普通饮食组血管内膜,高脂饮食组动脉粥样斑块内可见内皮下及泡沫细胞上Ezrin 表达上调,呈现片状棕色颗粒(光密度值:49.25±3.75 vs 8.12±2.16,P<0.05,图 2-3 )。

免疫组化,高脂饮食,动脉粥样斑块,血管内膜


a:普通饮食;b:高脂饮食图 2-2 小鼠主动脉免疫荧光染色结果Fig. 2-2 Ezrin expression in mice atherosclerotic plaques (Immunofluorescenc,×200)同时,对两组动脉切片,进行免疫组化检测,再次验证Ezrin 表达水平,结果证实,相比较普通饮食组血管内膜,高脂饮食组动脉粥样斑块内可见内皮下及泡沫细胞上Ezrin 表达上调,呈现片状棕色颗粒(光密度值:49.25±3.75 vs 8.12±2.16,P<0.05,图 2-3 )。

【参考文献】:
期刊论文
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[4]氧化低密度脂蛋白、荷叶生物碱对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1表达的影响[J]. 杨莉军,常冠楠,徐新,张社兵,马绍椿,唐良秋,何凤萍,范文茂.  心血管康复医学杂志. 2012(01)
[5]膜骨架连接蛋白Ezrin对肺癌细胞侵袭和转移能力的影响[J]. 高辉,李庆昌.  解剖科学进展. 2011(06)
[6]Ezrin及其与恶性肿瘤关系的研究进展[J]. 周敏仪,祁岩超,罗超权.  临床医学工程. 2010(05)
[7]宫颈癌中Ezrin和IL-6的表达及其相关性[J]. 王秋兰,张煦.  兰州大学学报(医学版). 2009(02)
[8]巨噬细胞凋亡与动脉粥样硬化[J]. 张艳,林玉壁,孙雷.  中国动脉硬化杂志. 2008(05)
[9]Ezrin蛋白与肿瘤转移关系的研究进展[J]. 张肖肖,辛彦.  中国肿瘤临床. 2007(23)
[10]埃兹蛋白:生物学特征及其在肿瘤转移中的作用[J]. 卢航青,郑杰.  细胞生物学杂志. 2005(03)



本文编号:3431276

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