HS3ST2基因对GH3细胞系中WNT通路及ECM通路的相关分子表达调控的探究

发布时间：2021-10-15 14:49

　　目的:探讨HS3ST2基因对大鼠GH3细胞系中Wnt通路及ECM-受体相互作用通路相关分子表达的调控及机制。方法:对大鼠GH3细胞中HS3ST2基因的表达进行干扰,通过蛋白质印记（Western-Blot）及荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR,RT-q PCR）法检测Wnt通路和ECM受体相互作用通路相关基因（β-catenin、WIF1、LEF1、SDC4）在m RNA转录水平及蛋白水平的表达量的不同。结果:干扰GH3细胞中HS3ST2基因表达后,HS3ST2基因的m RNA及蛋白表达水平降低,同时其修饰的硫酸乙酰肝素蛋白多糖蛋白（HSPG）表达量降低;Wnt信号通路中β-catenin、LEF1基因m RNA转录及蛋白表达水平升高（P<0.05）,而WIF1基因的m RNA及蛋白表达量下降（P<0.05）;ECM受体相互作用通路中SDC4基因的m RNA及蛋白表达量下降（P<0.05）。结论:本研究中,HS3ST2基因通过调控Wnt信号通路及ECM受体相互作用通路相关基因的表达促进GH3细胞增殖及侵袭性的发生。为寻找新的GH垂体腺... 

【文章来源】：蚌埠医学院安徽省

【文章页数】：38 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

荧光显微镜直视下128实验组细胞转染效率较高

162.RT-qPCR实验结果如下：向GH3细胞中转入可干扰HS3ST2基因表达的shRNA以后，与NC组相比，HS3ST2基因的mRNA相对表达量降低（P<0.01），说明了shRNA的有效性。WNT通路内的β-catenin与LEF1基因的mRNA相对表达量增多（P<0.01），说明HS3St2基因下调促进了Wnt通路的运转。WIF1基因的mRNA相对表达量减少（P<0.01），WIF1基因是Wnt通路的抑制基因，符合上面结果；ECM通路中SDC4基因的mRNA相对表达量减少（P<0.01）。说明ECM通路由于HS3ST2基因的下调而被部分抑制，至少SDC4这个基因的表达受到了抑制。（图3）图3：敲出HS3ST2基因后应用RT-PCR技术对Wnt通路及ECM受体相互作用通路中研究的基因mRNA相对表达量检测汇总。

【参考文献】：
期刊论文
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[3]甲状腺乳头状癌B-raf基因突变及cyclinD1、p16蛋白表达的相关性及临床病理意义[J]. 刘珊,杨蕾,程波,章方莉,权兰菊,吴西钊,丁姗姗,段恋,孙锁柱.  诊断病理学杂志. 2017(02)
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[7]Wnt2/β-catenin信号通路及其在肿瘤中的作用[J]. 李华,周德俊.  广东医学. 2015(02)

博士论文
[1]DLC-1在垂体腺瘤中的表达与侵袭性的关系及其启动子甲基化的实验研究[D]. 张风林.第二军医大学 2010



本文编号：3438155