中华绒螯蟹病原弗氏柠檬酸杆菌的鉴定及其毒力基因检测

发布时间：2021-10-24 18:00

　　从发病中华绒螯蟹肝胰腺中分离出1株优势生长的致病菌（LJ1）,对分离菌进行致病性、形态与生理生化特征及16S rRNA和gyrB基因同源性与系统发育分析,结果显示引起中华绒螯蟹大量死亡的病原为弗氏柠檬酸杆菌（Citrobacter freundii）,分离菌对中华绒螯蟹的半数致死量(LD₅₀)为2.1×l0⁶ CFU/mL。为进一步明确分离菌株毒力基因的携带情况,检测了分离菌定居因子（cfa）、尿素酶基因簇（ureG、ureF、ureE、ureD）、Vi抗原（viaB）、外膜蛋白（ompX）共7个毒力相关基因携带情况。结果表明,分离菌LJ1可扩增出cfa、ureG、ureF、ureE、ureD、viaB和ompX 7个毒力相关基因,这些毒力基因可作为检测致病性弗氏柠檬酸杆菌的生物学标记。 

【文章来源】：畜牧与兽医. 2020,52(10)北大核心

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

LJ1菌株16S rRNA基因序列的系统发育树

菌株LJ1在LB培养基上菌落特征为表面湿润光滑、中央隆起、边缘整齐的淡黄色菌落,培养24 h观察直径多在2 mm左右。革兰染色后观察,菌体为革兰阴性、短杆状、两端钝圆、无芽胞及荚膜,多呈散在分布,大小为0.5～0.8 μm×0.5～1.0 μm。菌株LJ1经透射电子显微镜观察显示,该细菌为周生鞭毛(图1)。其他理化特性见表3。综合分离菌株LJ1理化特性,与弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)最接近。表3 分离菌株的生理生化特性 特性 LJ1 弗氏柠檬酸杆菌① 特性 LJ1 弗氏柠檬酸杆菌① 37 °C生长 + + 鼠李糖 + - 甘露糖 + + 木糖 + + O-F F F 蔗糖 - d 苯丙氨酸 - - 甘露醇 + + 山梨糖 - + 纤维二糖 - d 阿拉伯糖 - + 七叶苷 + d 硫化氢 + + 蕈糖 + + 乳糖 + + 醋酸盐 + + 硝酸盐(还原) + + 肌醇 - - 枸橼酸盐 + + 侧金盏花醇 - - 丙二酸盐 - - 麦芽糖 + + β-半乳糖苷 + + 山梨醇 + d 棉子糖 - d 卫矛醇 - d 酒石酸盐 + + 尿素 - d 0%Nacl胨水 + · 半固体琼脂 + + 淀粉 + - 明胶 - - 血清菊糖 - + 6%Nacl胨水 - · DNA酶 - - 阿拉伯醇 - - α-甲基-D-葡糖苷 - - 注:“+” 为阳性;“d” 为10%～90% 阳性;“-”为阴性;“F”为发酵型;“·” 为在原文中无记载。①为数据来自文献[13]

LJ1菌株gyrB序列的系统发育树

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3455724