基因在植物抵御水稻条纹病毒侵染过程中的功能研究
发布时间:2021-10-30 23:58
水稻条纹叶枯病由水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)引起,是水稻生产中重要的病毒病害之一,造成水稻产量与品质严重的经济损失,威胁农业生产安全,破坏农业可持续发展。研究RSV与寄主植物的互作机制,寻找调控RSV侵染的关键寄主因子,能够为水稻条纹叶枯病害的防治提供有效策略,减少水稻条纹叶枯病害的发生和危害。RSV通过灰飞虱(Lapdelphax striatellus,SBPH)在水稻群体中传播,并可通过机械摩擦侵染实验寄主本氏烟。在实验室前期工作中,我们利用番茄基因芯片分析了 RSV侵染后本氏烟基因的表达情况,发现芯片上番茄HIR3基因(BI923297)表达信号上调。过敏诱导反应(HIR)基因家族与过敏反应(HR)密切相关,参与植物对病原物的防御反应中。目前关于HIR的研究主要集中在HIR1参与植物抗细菌和真菌侵染过程,关于其他HIRs的功能研究较少,也不清楚HIRs是否参与植物抗病毒侵染的过程。本研究表明,RSV侵染诱导NbHIR3s表达上调。NbHIR3s沉默会加剧RSV侵染症状,并显著增加病毒积累量,伴随SA含量和SA途径关键基因EDS1、NPR1和PR1基...
【文章来源】:浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:130 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
RSV羞因组结构((Cho,Lienetal.2013)
?图2.1?Western?blot蛋白转膜示意图??Fig.2.1?Diagram?of?transfer?of?proteins?by?Western?blot??封闭及与一抗反应:??将硝酸纤维素膜放入合适平皿中,加适量封闭液,于水平摇床上室温封闭
淀为包括细胞器和质膜的总膜蛋白组份;??加入20〇MLBufferB,涡旋震荡以重悬上述总膜蛋白组份。4°C,7800Xgin?(延长离心时间可提高纯度,防止细胞器膜污染)。沉淀为细胞器;??抽取上清液至新的EP管中,加入预冷的PBS1.6mL,混勻。16,000Xgmin?(延长离心时间可提高产量)。弃上清,沉淀为质膜蛋白。??亚细胞定位??定位载体的构建??上文2.3.6所述方法,将本氏烟/、M>///幻.2和J/AWZJ基因阅读框连接到定位载体pCV-eGFP-N丨和pCV-mcherry-Nl?(载体图谱示)中,获得?pCV:NbHIR3」-eGFP、pCV:NbHIR3.2-eGFP?和?pCV:AtNHL定位载体(图2.4)。参照上文2.3.6.10所述方法,抽提阳性质粒。??XbaL??
【参考文献】:
期刊论文
[1]水稻条纹叶枯病发生规律与防治技术[J]. 杨晓婷. 黑龙江科技信息. 2014(18)
[2]黄瓜过敏性诱导反应蛋白基因(CsHIR1)原核表达及其多克隆抗体制备[J]. 毛双双,李玉红,周旋,李万青,陈菲帆,程智慧,陈鹏. 西北植物学报. 2014(05)
[3]花生HIR基因的克隆表达与进化分析[J]. 刘羽,赵传志,李长生,李翠,王兴军. 山东农业科学. 2014(05)
[4]水稻条纹叶枯病的发生及防治[J]. 翟公山. 农家参谋(种业大观). 2013(11)
[5]水稻条纹叶枯病的防治[J]. 冯同强,钱省,张君岭,王晓莹. 北京农业. 2013(27)
[6]水稻条纹叶枯病的发病规律与防治技术研究[J]. 李明桃. 农业灾害研究. 2013(09)
[7]几种重要植物次生代谢防御反应物质的生物合成途径及分子调控机制研究进展[J]. 杨欣,徐艳红,魏建和,刘娟,张岩. 生物技术通讯. 2013(02)
[8]拟南芥T1N622在抵抗Pst DC3000侵染过程中的功能分析[J]. 郝丛丛,郑会欣,贾娇,司贺龙,陈展,赵斌,张靖,邢继红,董金皋. 中国农业科学. 2013(04)
[9]中国水稻条纹叶枯病研究进展[J]. 周益军,李硕,程兆榜,周彤,范永坚. 江苏农业学报. 2012(05)
[10]水稻OsBBR1基因的白叶枯病抗性研究[J]. 董瑞仙,王栩鸣,严成其,陈剑平. 浙江农业学报. 2011(06)
硕士论文
[1]水稻条纹病毒侵染拟南芥的研究[D]. 苑侠.南京农业大学 2012
本文编号:3467661
【文章来源】:浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:130 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
RSV羞因组结构((Cho,Lienetal.2013)
?图2.1?Western?blot蛋白转膜示意图??Fig.2.1?Diagram?of?transfer?of?proteins?by?Western?blot??封闭及与一抗反应:??将硝酸纤维素膜放入合适平皿中,加适量封闭液,于水平摇床上室温封闭
淀为包括细胞器和质膜的总膜蛋白组份;??加入20〇MLBufferB,涡旋震荡以重悬上述总膜蛋白组份。4°C,7800Xgin?(延长离心时间可提高纯度,防止细胞器膜污染)。沉淀为细胞器;??抽取上清液至新的EP管中,加入预冷的PBS1.6mL,混勻。16,000Xgmin?(延长离心时间可提高产量)。弃上清,沉淀为质膜蛋白。??亚细胞定位??定位载体的构建??上文2.3.6所述方法,将本氏烟/、M>///幻.2和J/AWZJ基因阅读框连接到定位载体pCV-eGFP-N丨和pCV-mcherry-Nl?(载体图谱示)中,获得?pCV:NbHIR3」-eGFP、pCV:NbHIR3.2-eGFP?和?pCV:AtNHL定位载体(图2.4)。参照上文2.3.6.10所述方法,抽提阳性质粒。??XbaL??
【参考文献】:
期刊论文
[1]水稻条纹叶枯病发生规律与防治技术[J]. 杨晓婷. 黑龙江科技信息. 2014(18)
[2]黄瓜过敏性诱导反应蛋白基因(CsHIR1)原核表达及其多克隆抗体制备[J]. 毛双双,李玉红,周旋,李万青,陈菲帆,程智慧,陈鹏. 西北植物学报. 2014(05)
[3]花生HIR基因的克隆表达与进化分析[J]. 刘羽,赵传志,李长生,李翠,王兴军. 山东农业科学. 2014(05)
[4]水稻条纹叶枯病的发生及防治[J]. 翟公山. 农家参谋(种业大观). 2013(11)
[5]水稻条纹叶枯病的防治[J]. 冯同强,钱省,张君岭,王晓莹. 北京农业. 2013(27)
[6]水稻条纹叶枯病的发病规律与防治技术研究[J]. 李明桃. 农业灾害研究. 2013(09)
[7]几种重要植物次生代谢防御反应物质的生物合成途径及分子调控机制研究进展[J]. 杨欣,徐艳红,魏建和,刘娟,张岩. 生物技术通讯. 2013(02)
[8]拟南芥T1N622在抵抗Pst DC3000侵染过程中的功能分析[J]. 郝丛丛,郑会欣,贾娇,司贺龙,陈展,赵斌,张靖,邢继红,董金皋. 中国农业科学. 2013(04)
[9]中国水稻条纹叶枯病研究进展[J]. 周益军,李硕,程兆榜,周彤,范永坚. 江苏农业学报. 2012(05)
[10]水稻OsBBR1基因的白叶枯病抗性研究[J]. 董瑞仙,王栩鸣,严成其,陈剑平. 浙江农业学报. 2011(06)
硕士论文
[1]水稻条纹病毒侵染拟南芥的研究[D]. 苑侠.南京农业大学 2012
本文编号:3467661
本文链接:https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3467661.html
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