CRISPRi干扰合成代谢基因表达对四氢嘧啶生产的影响

发布时间：2021-11-18 21:49

　　四氢嘧啶是一种天然存在的相容性溶质,它存在于许多不同种类的微生物中。它既可以调节微生物胞内外渗透压平衡,又可以稳定酶活性、保护细胞抵抗外界极端环境（冻融、干燥、电离辐射、高温等）,还可以作为氧化剂防止细胞膜功能受损,并且可以用于治疗神经退行性疾病。由于其具有优良的保护特性,四氢嘧啶在生物技术、皮肤护理、生物医药等行业市场前景非常广阔。实验室前期构建了一株大肠杆菌四氢嘧啶工程菌ECT01（Escherichia coli W3110 ybeM::PT7-ectABC,tyrR::PT7-ectABC）,此菌株存在糖酸转化率低、代谢网络不够完善等问题。为了解决上述问题,本文通过CRISPRi技术干扰合成代谢基因表达,进一步提高了四氢嘧啶生产菌的转化率和产量。本研究完成了以下工作:1、为了提高四氢嘧啶产量及转化率,利用CRISPRi技术干扰合成代谢基因表达。首先将dcas9基因（表达dCas9蛋白,结合于靶位点干扰基因转录表达）整合至基因组yncI位点。由于菌株ECT01中使用PxylF,故将dcas9基因受控于PxylF,构建了菌株ECT02（ECT01,yncI::PxylF-dcas9... 

【文章来源】：天津科技大学天津市

【文章页数】：77 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１四氢卩密陡结构式??

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【参考文献】：
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本文编号：3503675