黄瓜叶色黄化突变基因yf的精细定位及候选基因分析
发布时间：2021-11-18 21:53
黄瓜（Cucumis sativus L.）叶片是光合作用的重要器官,也是植株形态建成和果实生长的重要基础。黄瓜叶色常常发生突变,人们常常利用叶色突变体进行相关基因及光合作用机理的研究,对明确黄瓜相关基因功能乃至光合作用都具有重要意义。本实验以发现的一种黄瓜叶色黄化突变体yf为研究对象,对其叶色、相关表型显微结构观察进行分析,并利用突变体yf和Gy14构建F2分离群体,通过BSA筛选与候选基因紧密连锁的分子标记,并进行精细定位和进行候选基因的预测分析,为黄瓜叶黄突变基因的克隆奠定基础。主要研究结果如下。1.对黄瓜叶黄突变体yf的色素含量、光合性能及光合相关物质的含量进行了测定。突变体子叶期、幼苗期与成苗期植株叶绿素含量均处于较低水平。在幼苗期与成苗期,突变体净光合速率（Pn）、胞间二氧化碳浓度（Ci）、最小初始荧光（F0）等均显著低于Gy14,非光化学猝灭系数（NPQ、qN）显著高于Gy14。Gy14中叶绿素合成途径上的5-氨基乙酰丙酸（ALA）含量、Mg-原卟啉Ⅸ（Mg-ProtoⅨ）、粪卟啉原Ⅲ（CoprogenⅢ）和原叶绿素酸酯（Pchlide）显著低于Gy...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 引言
1.1 叶色突变体的来源与类型
1.1.1 叶色突变体的来源
1.1.2 叶色突变体的分类
1.2 叶色突变体的生理生化研究
1.2.1 叶色突变体的形态特征
1.2.2 叶色突变体叶绿素合成代谢
1.2.3 叶绿体结构特征
1.3 叶色突变遗传模式的研究
1.3.1 细胞核遗传
1.3.2 细胞质遗传
1.4 叶色突变的分子机制
1.4.1 叶绿素合成途径
1.4.2 叶绿素降解途径
1.4.3 血红素合成途径
1.4.4 叶绿体发育途径
1.5 叶色突变的应用
1.6 SSR分子标记概述及在蔬菜叶色突变体的研究
1.6.1 SSR分子标记概述
1.6.2 蔬菜叶色突变体及基因克隆研究进展
1.7 叶绿素信号粒子43KDA的研究进展
第二章 材料与方法
2.1 试验材料
2.1.1 试验材料
2.1.2 主要试剂和仪器
2.2 试验方法
2.2.1 叶黄突变体的叶色等性状调查
2.2.2 叶片叶绿素含量测定
2.2.3 光合参数测定
2.2.4 叶绿素荧光动力学参数测定
2.2.5 叶绿素生物合成前体物质相对含量测定
2.2.6 石蜡切片
2.2.7 透射电镜观察
2.3 黄瓜叶色突变体突变性状分子定位
2.3.1 突变性状遗传规律分析
2.3.2 基因组DNA提取
2.3.3 PCR扩增及聚丙烯凝胶电泳
2.3.4 多态性引物的筛选
2.3.5 基因的初定位
2.3.6 基因的精细定位
2.3.7 多态性条带的统计和连锁分析
2.3.8 突变体和Gy14候选基因克隆
2.3.9 候选基因及叶绿素前体物质相关基因表达
第三章 结果与分析
3.1 叶黄突变体的形态特征和生理特征
3.1.1 突变体在各个生长期的表型
3.1.2 黄绿叶色突变体叶绿素含量分析
3.1.3 光合特性及叶绿素荧光动力学参数分析
3.1.4 黄绿叶色突变体与Gy14 叶绿素前体物质相对含量的比较
3.1.5 黄绿叶色突变体与Gy14 叶片显微结构比较
3.1.6 黄绿叶色突变体与Gy14 叶片超微结构观察
3.2 黄绿叶色性状的遗传规律
3.3 黄绿叶色性状的定位及候选基因预测
3.3.1 黄绿叶色性状的初定位
3.3.3 黄绿叶色性状的精细定位
3.4 黄绿叶yf候选基因预测及克隆
3.5 候选基因及叶绿素合成相关基因表达分析
3.6 系统进化树分析
第四章 讨论
4.1 该叶黄色突变体和已有黄瓜叶黄色突变体的区别
4.2 yf突变体光合色素含量及光合特性分析
4.3 yf突变体叶绿素合成前体物质与相关基因表达分析
4.4 yf突变体石蜡切片及显微结构观察
4.5 yf突变体图位克隆及候选基因筛选
第五章 结论
参考文献
附录
致谢
个人简历
本文编号：3503682
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 引言
1.1 叶色突变体的来源与类型
1.1.1 叶色突变体的来源
1.1.2 叶色突变体的分类
1.2 叶色突变体的生理生化研究
1.2.1 叶色突变体的形态特征
1.2.2 叶色突变体叶绿素合成代谢
1.2.3 叶绿体结构特征
1.3 叶色突变遗传模式的研究
1.3.1 细胞核遗传
1.3.2 细胞质遗传
1.4 叶色突变的分子机制
1.4.1 叶绿素合成途径
1.4.2 叶绿素降解途径
1.4.3 血红素合成途径
1.4.4 叶绿体发育途径
1.5 叶色突变的应用
1.6 SSR分子标记概述及在蔬菜叶色突变体的研究
1.6.1 SSR分子标记概述
1.6.2 蔬菜叶色突变体及基因克隆研究进展
1.7 叶绿素信号粒子43KDA的研究进展
第二章 材料与方法
2.1 试验材料
2.1.1 试验材料
2.1.2 主要试剂和仪器
2.2 试验方法
2.2.1 叶黄突变体的叶色等性状调查
2.2.2 叶片叶绿素含量测定
2.2.3 光合参数测定
2.2.4 叶绿素荧光动力学参数测定
2.2.5 叶绿素生物合成前体物质相对含量测定
2.2.6 石蜡切片
2.2.7 透射电镜观察
2.3 黄瓜叶色突变体突变性状分子定位
2.3.1 突变性状遗传规律分析
2.3.2 基因组DNA提取
2.3.3 PCR扩增及聚丙烯凝胶电泳
2.3.4 多态性引物的筛选
2.3.5 基因的初定位
2.3.6 基因的精细定位
2.3.7 多态性条带的统计和连锁分析
2.3.8 突变体和Gy14候选基因克隆
2.3.9 候选基因及叶绿素前体物质相关基因表达
第三章 结果与分析
3.1 叶黄突变体的形态特征和生理特征
3.1.1 突变体在各个生长期的表型
3.1.2 黄绿叶色突变体叶绿素含量分析
3.1.3 光合特性及叶绿素荧光动力学参数分析
3.1.4 黄绿叶色突变体与Gy14 叶绿素前体物质相对含量的比较
3.1.5 黄绿叶色突变体与Gy14 叶片显微结构比较
3.1.6 黄绿叶色突变体与Gy14 叶片超微结构观察
3.2 黄绿叶色性状的遗传规律
3.3 黄绿叶色性状的定位及候选基因预测
3.3.1 黄绿叶色性状的初定位
3.3.3 黄绿叶色性状的精细定位
3.4 黄绿叶yf候选基因预测及克隆
3.5 候选基因及叶绿素合成相关基因表达分析
3.6 系统进化树分析
第四章 讨论
4.1 该叶黄色突变体和已有黄瓜叶黄色突变体的区别
4.2 yf突变体光合色素含量及光合特性分析
4.3 yf突变体叶绿素合成前体物质与相关基因表达分析
4.4 yf突变体石蜡切片及显微结构观察
4.5 yf突变体图位克隆及候选基因筛选
第五章 结论
参考文献
附录
致谢
个人简历
本文编号：3503682
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3503682.html
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