甜瓜CmHBⅡ-1及CmFER10基因的克隆及其在果实发育中功能的初步分析
发布时间：2021-11-23 19:13
甜瓜（Cucumis melo L.）是一年生匍匐或攀岩生长的双子叶草本植物,也是一种重要的经济瓜果作物,在全世界被广泛栽培。本研究以甜瓜品种河套蜜瓜（Cucumis melo L.cv Hetao）为研究材料,通过对本实验室前期获得的河套蜜瓜的果实转录组数据进行了初步分析,选择了在果实发育过程中差异表达的两个基因CmHD-ZipⅡ（HomeodomainLeucineZipper）家族转录因子和CmFER10（FERONIA receptor-like kinase）作为候选基因,对其进行克隆及果实发育中的功能分析,主要结果如下:（1）采用生物信息学的方法,在甜瓜基因组中鉴定了9个HD-ZipⅡ家族成员和15个FER家族成员。染色体定位分析发现CmHBⅡ-1和CmFER10基因分别位于甜瓜1号染色体和10号染色体。启动子分析发现CmFER10启动子包含乙烯应答元件ERE、参与胁迫应答的G-box元件和脱落酸响应元件ABRE。（2）通过实时荧光定量PCR的方法,分析两个基因在甜瓜不同组织和不同发育时期果实中的表达量。结果显示,CmHBⅡ-1和CmFER10均在果实的发育过程中差异表达,...
【文章来源】：内蒙古大学内蒙古自治区 211工程院校
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
植物转录因子的分类[48]
图 1.3 HB 超家族成员的结构图[49]Figure1.3 The members' structures of the HB super family[49]定出来同源异形域编码的同源异型盒蛋白结构是在果蝇基因上，该基因会引起一个整体部分表型的改变而得名，后来在其它无脊了相似基因[51]。编码 HD-Zip 蛋白的基因已经从拟南芥(Arabidop sative L.)[53]、苜蓿(Medicago truncatula L.)[54]、烟草(Nicotiana ianthus annuus L.)[56]、番茄(Lycopersicon esculentum M.)[49]、小立碗藓]以 及小麦(Triticeae asetivum L.)[58]等物种中被克隆。根据 HD-Zi DNA 序列、生理功能的不同，HD-Zip 基因家族可分为：HD-Zip亚类居多。 Ⅰ是最大的一类家族，其结构只包含 HD 结构域和一个与其紧密相称 的 DNA 序 列 (CAAT(A/T)ATTG) 有 特 异 的 结 合 特 性 ， 命)[49]。编码 HD-Zip I 蛋白的基因结构很保守，除 ATHB52、ATHB 5
图 2.1 构建 sgRNA 表达盒[85]Figure 2.1 Construction of sgRNA expression cassettes[85] 表达盒与双元载体 pYLCRISPR/Cas9 连接en Gate Ligation 原理，将基因编辑载体 pYLCRISPR/Cas9 和表酶将其连接。反应体系为：Reagent VolumeCas9 载体(10 ng/μL) 1 μL表达盒(30 ng/μL) 2 μL10×Cutsmart Buffer 2 μLBsa I 1 μLT4Buffer 2 μLT4连接酶 1.5 μLddH2O 至 20 μL：37℃ 10 min，10℃ 5 min，20℃ 5 min，5 个循环；37℃ 3 m
【参考文献】：
期刊论文
[1]高等植物转录因子研究进展[J]. 陈霞,罗世巧,段翠芳,曾日中. 安徽农学通报. 2008(09)
[2]植物转录因子的结构与调控作用[J]. 刘强,张贵友,陈受宜. 科学通报. 2000(14)
[3]植物同源异型基因及同源异型盒基因的研究进展[J]. 魏文辉,宋运淳,覃瑞. 生物化学与生物物理进展. 2000(02)
博士论文
[1]FERLs/SnRK2s蛋白激酶参与果实成熟调控的信号转导机理研究[D]. 贾美茹.中国农业大学 2017
硕士论文
[1]番茄种子的内源激素及活性氧的变化规律与果实成熟的关系[D]. 阮英.中国农业大学 2005
本文编号：3514490
【文章来源】：内蒙古大学内蒙古自治区 211工程院校
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
植物转录因子的分类[48]
图 1.3 HB 超家族成员的结构图[49]Figure1.3 The members' structures of the HB super family[49]定出来同源异形域编码的同源异型盒蛋白结构是在果蝇基因上，该基因会引起一个整体部分表型的改变而得名，后来在其它无脊了相似基因[51]。编码 HD-Zip 蛋白的基因已经从拟南芥(Arabidop sative L.)[53]、苜蓿(Medicago truncatula L.)[54]、烟草(Nicotiana ianthus annuus L.)[56]、番茄(Lycopersicon esculentum M.)[49]、小立碗藓]以 及小麦(Triticeae asetivum L.)[58]等物种中被克隆。根据 HD-Zi DNA 序列、生理功能的不同，HD-Zip 基因家族可分为：HD-Zip亚类居多。 Ⅰ是最大的一类家族，其结构只包含 HD 结构域和一个与其紧密相称 的 DNA 序 列 (CAAT(A/T)ATTG) 有 特 异 的 结 合 特 性 ， 命)[49]。编码 HD-Zip I 蛋白的基因结构很保守，除 ATHB52、ATHB 5
图 2.1 构建 sgRNA 表达盒[85]Figure 2.1 Construction of sgRNA expression cassettes[85] 表达盒与双元载体 pYLCRISPR/Cas9 连接en Gate Ligation 原理，将基因编辑载体 pYLCRISPR/Cas9 和表酶将其连接。反应体系为：Reagent VolumeCas9 载体(10 ng/μL) 1 μL表达盒(30 ng/μL) 2 μL10×Cutsmart Buffer 2 μLBsa I 1 μLT4Buffer 2 μLT4连接酶 1.5 μLddH2O 至 20 μL：37℃ 10 min，10℃ 5 min，20℃ 5 min，5 个循环；37℃ 3 m
【参考文献】：
期刊论文
[1]高等植物转录因子研究进展[J]. 陈霞,罗世巧,段翠芳,曾日中. 安徽农学通报. 2008(09)
[2]植物转录因子的结构与调控作用[J]. 刘强,张贵友,陈受宜. 科学通报. 2000(14)
[3]植物同源异型基因及同源异型盒基因的研究进展[J]. 魏文辉,宋运淳,覃瑞. 生物化学与生物物理进展. 2000(02)
博士论文
[1]FERLs/SnRK2s蛋白激酶参与果实成熟调控的信号转导机理研究[D]. 贾美茹.中国农业大学 2017
硕士论文
[1]番茄种子的内源激素及活性氧的变化规律与果实成熟的关系[D]. 阮英.中国农业大学 2005
本文编号：3514490
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3514490.html
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