沉默EMS1/cortactin基因对肝癌HepG2细胞迁移、侵袭和细胞周期的影响

发布时间：2021-11-25 12:31

　　目的研究原发性肝癌（HCC）Hep G2细胞中EMS1/cortactin的表达与定位,探讨其功能特性。方法 RTq PCR、免疫荧光法检测EMS1基因和cortactin（EMS1编码蛋白）表达,共聚焦显微镜观察cortactin定位,并以人正常肝细胞L02为对照。将靶向EMS1的质粒EMS1-shRNA转染Hep G2,并以CCK8法、流式细胞周期检测、划痕和Transwell小室实验检测细胞增殖、周期、迁移和侵袭能力。结果 Hep G2中EMS1 mRNA水平为LO2的10.5倍;cortactin在Hep G2中高表达,并聚集于细胞膜下皮质区,L02中cortactin弥散分布在胞质中。与未处理组相比,转染EMS1-shRNA组Hep G2中EMS1 mRNA水平下降68.00%,cortactin水平下降52.80%,细胞增殖能力下降9.50%,S期比例下降37.89%,迁移能力下降45.40%,侵袭能力下降64.91%（均P<0.05）。结论 EMS1/cortactin主要与Hep G2细胞迁移和侵袭相关。 

【文章来源】：基础医学与临床. 2016,36(12)CSCD

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 细胞系:
        1.1.2 主要试剂:
    1.2 方法
        1.2.1 Rq PCR检测EMS1表达:
        1.2.2 免疫荧光法检测cortactin表达和定位:
        1.2.3 质粒构建、细胞转染和实验分组:
        1.2.4 RT-q PCR检测各组细胞EMS1表达:
        1.2.5 Western blot检测各组细胞cortactin表达:
        1.2.6 CCK-8法检测各组细胞增殖能力:
        1.2.7 流式细胞术检测各组细胞周期:
        1.2.8 划痕试验检测各组细胞二维迁移能力:
        1.2.9 Transwell小室检测各组细胞三维迁移能力:
    1.3 统计学分析
2 结果
    2.1 EMS1/cortactin的表达与定位
    2.2 RNAi后Hep G2中EMS1 mRNA和cortactin表达
    2.3 下调EMS1对细胞增殖能力和细胞周期的影响
    2.4 下调EMS1对Hep G2细胞迁移和侵袭能力的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]下调EMS1/cortactin对人高转移潜能肝癌细胞株迁移和内吞的影响[J]. 周家名,陈莉,叶蕴瑶,孙树刚,王桂兰,吴圆圆.  临床与实验病理学杂志. 2012(11)
[2]皮动蛋白及微丝相关蛋白2/3复合物介导的细胞运动的分子机制[J]. 喻丹,张培军,ZHAN.XSteven.  生命的化学. 2005(03)



本文编号：3518144