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siRNA抑制Mcl-1基因表达对TRAIL诱导的人胃腺癌SGC7901/ADR细胞凋亡的影响

发布时间:2021-11-25 16:55
  目的 :研究沉默髓样细胞白血病1(myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)基因表达对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)诱导人胃腺癌耐多柔比星(adriamycin,ADR)SGC7901/ADR细胞凋亡的影响,并探讨胃癌耐药细胞株耐T RAI L凋亡效应的可能机制。方法 :不同质量浓度的TRAIL(10、50和100 ng/m L)处理SGC7901/ADR细胞后,采用MTT法和FCM法分别检测细胞活力和细胞凋亡率,实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法分别检测SGC7901/ADR细胞中Mcl-1 m RNA和蛋白的表达水平。采用脂质体转染法将Mcl-1-si RNA转染至SGC7901/ADR细胞,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测Mcl-1-si RNA对Mcl-1 m RNA及蛋白表达水平的影响。采用TRAIL(50 ng/m L)处理Mcl-1基因沉默后的SGC7901/ADR细胞,MTT法和FCM法分别检测Mcl-1基因沉默后TRAIL对... 

【文章来源】:肿瘤. 2016,36(03)北大核心CSCD

【文章页数】:10 页

【文章目录】:
1材料与方法
    1.1细胞和试剂
    1.2 细胞培养
    1.3 MTT法检测TRAIL对SGC7901/ADR细胞活力的影响
    1.4 FCM法检测TRAIL对SGC7901/ADR细胞凋亡的影响
    1.5 实时荧光定量PCR检测TRAIL对SGC7901/ADR细胞中Mcl-1 m RNA表达的影响
    1.6 蛋白质印迹法检测TRAIL对SGC7901/ADR细胞中Mcl-1 蛋白表达的影响
    1.7 细胞转染及Mcl-1-si RNA沉默效果的鉴定
    1.8 检测转染Mcl-1-si RNA后联合应用TRAIL对细胞活力、细胞凋亡和相关凋亡蛋白表达的影响
    1.9 统计学方法
2 结果
    2.1 TRAIL对SGC7901/ADR细胞活力和细胞凋亡的影响
    2.2 TRAIL上调SGC7901/ADR细胞中Mcl-1m RNA和蛋白的表达
    2.3 Mcl-1-si RNA抑制SGC7901/ADR细胞中Mcl-1 m RNA和蛋白的表达
    2.4 Mcl-1-si RNA抑制Mcl -1 基因的表达可增强TRAIL对SGC7901/ADR细胞增殖的抑制作用
    2.5 Mcl-1-si RNA抑制Mcl -1 基因表达可促进TRAIL诱导SGC7901/ADR细胞凋亡
    2.6 Mcl-1-si RNA抑制Mcl-1 表达对TRAIL诱导凋亡相关蛋白表达水平的影响
3 讨论


【参考文献】:
期刊论文
[1]TRAIL抑制胃癌多药耐药基因MDR1/P-gp的表达[J]. 王慧群,张开光.  安徽医科大学学报. 2012(01)



本文编号:3518547

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