菊花DgbZIP2和DgNF-YA1基因的克隆与转基因菊花耐寒性研究
发布时间：2021-11-26 05:05
低温是常见的环境胁迫因子,严重影响植物的生长发育。转录因子可以与多类在编码非生物胁迫相关基因启动子区域存在的顺式元件相互作用,通过植物体内信号通路调节一系列与非生物胁迫相关基因的表达,从而赋予目标植物更强的抗逆性。本实验使用“神马”菊花[Dendronthema×grandiform（Ramat.）Kitamura]CV.Jinba为实验材料,通过分析低温处理过的菊花与野生菊花的差异表达基因,使用生物技术手段获得DgbZIP2和DgNF-YA1基因过表达的转基因菊花植株,对其进行耐寒性研究鉴定,对菊花的抗低温胁迫育种提供一定的理论依据,对菊花新品种的选育具有重要的意义。主要研究结果如下:1.分别分析了常温和低温胁迫下DgbZIP2基因和DgNF-YA1基因在菊花各个组织中的表达量,结果表明DgbZIP2基因和DgNF-YA1基因的表达量在低温下被诱导上调,且与其他组织相比较,这两个基因在叶片中有着更高的表达水平。2.过表达DgbZIP2基因的菊花选取OE-9和OE-171株系,过表达DgNF-YA1基因的菊花选取OE-32和OE-54株系,将其和野生型菊花一起进行低温胁迫实验,观察低温...
【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
A:DgbZIP2基因的PCR扩增电泳图；B:DgNF-YA1基因的PCR扩增电泳图
26图2-2DgbZIP2基因开放阅读框的核苷酸序列和推测的氨基酸序列Fig.2-2ThenucleotidesequenceandthededucedaminoacidsequenceoftheopenreadingframeofDgbZIP234AcbZIP1239AtbZIP5339DgbZIP237NtbZIP1420PIA37023.138XP_016710680.1Consensus..M....TAA.S.SSS.A.PPS.S.EGG.SSSSS.SSDDD.DENGG.SEDDQ.DDPL..PRRRR.QQYYY.YVAAA.AVTNT.NVVLN.I.T....DDDD.DQEED.ERRRR.RKKKK.KQRRRQRKKKKRKrRRRRRRmMMMMMMLIIEILsSSSSSSnNNNNNNrRRRRRReEEEEEEsSSSSSSaAAAAAArRRRRRRrRRRRRRsSSSSSSrRRRRRRMMAMMMRRKRRRkKKKKKKqQQQQQQQKNQQK74AcbZIP1279AtbZIP5379DgbZIP277NtbZIP1460PIA37023.178XP_016710680.1ConsensusRQRHHRlLLLLLLDGDEDQEDEEEDlLLLLLLVILMLVNNGSNQQEEQQEAVIMVVATNTANRLNQQAlLLLLLLKKQQQQNNNNQKEDDQDDnNNNNNNTANVSSQKMLGQIIIWIILTMRLSMEKE
27图2-4菊花bZIP2与耧斗菜、棉花、烟草等植物中bZIP类基因进化关系Figure2-4TheevolutionaryrelationshipbetweenbZIP2andbZIPgenesinplantssuchascolumbine,cotton,andtobacco.DgNF-YA1基因的cDNA碱基序列有2460bp，开放阅读框为501bp，共计编码了166个氨基酸残基，蛋白质分子量为18.88kDa，蛋白质等电点为10.58。编码区氨基酸序列如图2-5所示。在NCBI中对DgNF-YA1的氨基酸序列进行BLAST同源性分析（图2-6），结果显示，DgNF-YA1与芝麻（SesamumindicumL.）XP_011080345.1的同源性为54％，与桑树（MorusalbaL.）ALC74585.1的同源性为51％，与茶树（PistaciachinensisBunge）XP_028083725.1的同源性为49%，与樱桃（Cerasuspseudocerasus(Lindl.)G.Don）PaNF-YA2的同源性为45％，与番木瓜（CaricapapayaL.）CpNF-YA6的同源性为41％。根据收集到的资料构建了DgNF-YA1与其他NF-YA类蛋白的系统发育树（图2-7）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]过表达SlMPK3基因提高番茄低温耐受能力[J]. 赵菁菁,吕洁,吴浪,李云洲,张颜,梁燕. 农业生物技术学报. 2016(07)
[2]植物应答低温胁迫的转录调控网络研究进展[J]. 刘辉,李德军,邓治. 中国农业科学. 2014(18)
[3]转基因育种技术在菊花性状改良中的应用进展[J]. 成丽娜,魏倩,Muhammad Imtiaz,高俊平,洪波. 园艺学报. 2013(09)
[4]AP2/ERF蛋白调控植物的非生物胁迫应答机制[J]. 杨德鑫,周时荣,权瑞党,黄荣峰. 中国农业科技导报. 2012(06)
[5]植物MYB转录因子功能及调控机制研究进展[J]. 左然,徐美玲,柴国华,周功克. 生命科学. 2012(10)
[6]大白菜耐旱相关基因BpNFYA5的克隆及功能初步分析[J]. 黄人卉,王桂香,刘凡. 园艺学报. 2012(08)
[7]bZIP转录因子与植物抗逆性研究进展[J]. 曹红利,岳川,王新超,杨亚军. 南方农业学报. 2012(08)
[8]胡杨核转录因子PeNF-YB1克隆及其干旱响应表达[J]. 严东辉,汤沙,夏新莉,尹伟伦. 中国农学通报. 2012(19)
[9]转基因地被菊品种晚粉的耐盐性研究[J]. 张路,张启翔,高亦珂,陆苗,王叶,张杰. 种子. 2012(06)
[10]以PMI为选择标记的露地菊转Lc-14-3-3基因体系的建立及功能鉴定[J]. 于利刚,解莉楠,王江,张旸,李玉花. 园艺学报. 2011(06)
博士论文
[1]芝麻素对人肝癌细胞系HepG2的抑制作用及机理研究[D]. 邓鹏裔.华中科技大学 2013
[2]苜蓿DREB类转录因子基因的研究[D]. 牛一丁.内蒙古大学 2008
[3]根癌农杆菌介导的PEAMT基因转化菊花的研究[D]. 吴月亮.北京林业大学 2006
硕士论文
[1]菊花DgWRKY5基因的耐盐性鉴定和转录组测序分析[D]. 梁倩玉.四川农业大学 2018
[2]菊花DgWRKY5及DgWRKY4基因的克隆和功能鉴定[D]. 田效琴.四川农业大学 2016
[3]不同苋菜品种的盐胁迫渗透调节响应对Cd累积的影响[D]. 徐智敏.暨南大学 2015
[4]切花菊品种遗传多样性研究与杂交育种[D]. 张冬菊.华中农业大学 2013
[5]一个拟植物转录因子家族的初步研究[D]. 王宏刚.厦门大学 2008
本文编号：3519455
【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
A:DgbZIP2基因的PCR扩增电泳图；B:DgNF-YA1基因的PCR扩增电泳图
26图2-2DgbZIP2基因开放阅读框的核苷酸序列和推测的氨基酸序列Fig.2-2ThenucleotidesequenceandthededucedaminoacidsequenceoftheopenreadingframeofDgbZIP234AcbZIP1239AtbZIP5339DgbZIP237NtbZIP1420PIA37023.138XP_016710680.1Consensus..M....TAA.S.SSS.A.PPS.S.EGG.SSSSS.SSDDD.DENGG.SEDDQ.DDPL..PRRRR.QQYYY.YVAAA.AVTNT.NVVLN.I.T....DDDD.DQEED.ERRRR.RKKKK.KQRRRQRKKKKRKrRRRRRRmMMMMMMLIIEILsSSSSSSnNNNNNNrRRRRRReEEEEEEsSSSSSSaAAAAAArRRRRRRrRRRRRRsSSSSSSrRRRRRRMMAMMMRRKRRRkKKKKKKqQQQQQQQKNQQK74AcbZIP1279AtbZIP5379DgbZIP277NtbZIP1460PIA37023.178XP_016710680.1ConsensusRQRHHRlLLLLLLDGDEDQEDEEEDlLLLLLLVILMLVNNGSNQQEEQQEAVIMVVATNTANRLNQQAlLLLLLLKKQQQQNNNNQKEDDQDDnNNNNNNTANVSSQKMLGQIIIWIILTMRLSMEKE
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【参考文献】：
期刊论文
[1]过表达SlMPK3基因提高番茄低温耐受能力[J]. 赵菁菁,吕洁,吴浪,李云洲,张颜,梁燕. 农业生物技术学报. 2016(07)
[2]植物应答低温胁迫的转录调控网络研究进展[J]. 刘辉,李德军,邓治. 中国农业科学. 2014(18)
[3]转基因育种技术在菊花性状改良中的应用进展[J]. 成丽娜,魏倩,Muhammad Imtiaz,高俊平,洪波. 园艺学报. 2013(09)
[4]AP2/ERF蛋白调控植物的非生物胁迫应答机制[J]. 杨德鑫,周时荣,权瑞党,黄荣峰. 中国农业科技导报. 2012(06)
[5]植物MYB转录因子功能及调控机制研究进展[J]. 左然,徐美玲,柴国华,周功克. 生命科学. 2012(10)
[6]大白菜耐旱相关基因BpNFYA5的克隆及功能初步分析[J]. 黄人卉,王桂香,刘凡. 园艺学报. 2012(08)
[7]bZIP转录因子与植物抗逆性研究进展[J]. 曹红利,岳川,王新超,杨亚军. 南方农业学报. 2012(08)
[8]胡杨核转录因子PeNF-YB1克隆及其干旱响应表达[J]. 严东辉,汤沙,夏新莉,尹伟伦. 中国农学通报. 2012(19)
[9]转基因地被菊品种晚粉的耐盐性研究[J]. 张路,张启翔,高亦珂,陆苗,王叶,张杰. 种子. 2012(06)
[10]以PMI为选择标记的露地菊转Lc-14-3-3基因体系的建立及功能鉴定[J]. 于利刚,解莉楠,王江,张旸,李玉花. 园艺学报. 2011(06)
博士论文
[1]芝麻素对人肝癌细胞系HepG2的抑制作用及机理研究[D]. 邓鹏裔.华中科技大学 2013
[2]苜蓿DREB类转录因子基因的研究[D]. 牛一丁.内蒙古大学 2008
[3]根癌农杆菌介导的PEAMT基因转化菊花的研究[D]. 吴月亮.北京林业大学 2006
硕士论文
[1]菊花DgWRKY5基因的耐盐性鉴定和转录组测序分析[D]. 梁倩玉.四川农业大学 2018
[2]菊花DgWRKY5及DgWRKY4基因的克隆和功能鉴定[D]. 田效琴.四川农业大学 2016
[3]不同苋菜品种的盐胁迫渗透调节响应对Cd累积的影响[D]. 徐智敏.暨南大学 2015
[4]切花菊品种遗传多样性研究与杂交育种[D]. 张冬菊.华中农业大学 2013
[5]一个拟植物转录因子家族的初步研究[D]. 王宏刚.厦门大学 2008
本文编号：3519455
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