复合杂合突变致遗传性凝血因子Ⅴ缺陷症家系的表型与基因型分析

发布时间：2022-02-22 02:03

　　目的:通过检测复合杂合突变导致遗传性凝血因子Ⅴ（FⅤ）缺陷家系的表型和基因突变分析,探讨其分子发病机制。方法:检测先证者及其家系成员（共3代10人）血浆凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（FIB）、FⅤ促凝活性（FⅤ∶C）、FⅤ抗原（FⅤ∶Ag）及其他相关凝血指标以明确诊断。采用DNA直接测序分析F5基因的所有外显子、侧翼、5’和3’非翻译区及家系成员相应的突变位点区域,发现突变位点用反向测序证实。使用ClustalX-2.1-win软件分析突变氨基酸的保守性,PROVEAN和MutationTaster在线生物信息学软件预测突变对蛋白质功能的影响,Swiss-PdbViewer软件在突变位点上进行蛋白质模型和氨基酸相互作用分析。结果:先证者PT和APTT较正常对照健康体检者显著延长,分别为34.2 vs 13.2 s和119.3 vs 36.0 s; FⅤ∶C和FⅤ∶Ag极度降低,分别为3%和6%。先证者的第二子、第三子、女儿和孙子的PT和APTT略有延长,FⅤ∶C和FⅤ∶Ag均有不同程度的降低,其他家庭成员的相关凝血参数均在正常范围内。先证者6号外显... 

【文章来源】：中国实验血液学杂志. 2020,28(06)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
材料和方法
    患者及其家系资料
    引物
    血液标本采集和凝血指标检测
    基因组DNA提取及PCR扩增
    DNA测序及分析
    氨基酸突变位点保守性和生物信息学分析
    蛋白质局部空间构型变化分析
结果
    表型分析
    基因分析
    保守性和生物信息学分析
    蛋白质局部空间构型变化分析
讨论



本文编号：3638469