双酚A对稀有鮈鲫卵巢类固醇激素合成酶基因DNA甲基化影响的研究

发布时间：2022-04-23 16:14

　　双酚A（BPA）是一种典型的内分泌干扰物（EDCs）,常用于生产加工日常生活中的各种塑料制品。BPA具有与雌二醇（E2）相似的分子结构,因此具有弱雌激素效应,可以干扰机体正常的内分泌、生殖、免疫和神经系统等。本实验室之前的研究表明BPA能干扰机体稀有鮈鲫雌鱼的类固醇激素的合成,以及类固醇合成酶基因的表达,但其潜在的分子机制尚不明确。为了探究其潜在的分子机制,本研究以稀有鮈鲫雌鱼为试验动物,用15μg/L的BPA进行7 d和14 d的暴露试验。暴露试验结束后,HE染色切片观察其卵巢的组织学变化,ELISA试剂盒检测血清中类固醇激素含量,qRT-PCR检测卵巢类固醇合成酶基因、雌激素受体基因以及DNA甲基化相关基因的mRNA表达量,克隆稀有鮈鲫cyp11a1的5’侧翼序列,CHIP方法检测BPA对类固醇合成基因上ERE-ER相互作用的影响,亚硫酸氢盐测序法检测BPA对类固醇合成基因5’侧翼区DNA甲基化的影响。获得的主要研究结果如下:1、BPA暴露14 d后,稀有鮈鲫雌鱼的GSI和其血清中E2水平均显著升高。表明BPA能干扰稀有鮈鲫雌鱼的类固醇激素的合成。2、BPA暴露7 d后,稀有鮈鲫卵... 

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

BPA与E2的分子结构

图 1-2 类固醇激素合成通路Fig. 1-2 The sex hormone biosynthesis pathway.1.2.2 类固醇激素合成酶基因类固醇激素的生物合成是一个复杂的过程，是以胆固醇为原料，在一系列关键酶和蛋白的催化下完成的，如图 1-2 所示。1.2.2.1 StAR胆固醇是类固醇激素合成的前体，通常储存于线粒体外的脂肪滴内，必须转运至线粒体内膜才能发生进一步的反应，但线粒体外膜和内膜上的水层会阻碍胆固醇的扩散。Star 基因编码的类固醇急性调节蛋白（STAR）能克服这种障碍，完成胆固醇从线粒体外膜向线粒体内膜的转运过程（Stocco 2000），因此，该过程是类固醇激素合成过程中最为关键的调控步骤。研究表明，star 基因的正常表达能显著刺激类固醇激素的合成（Clark et al. 1994）。人的 star 基因突变以及小鼠的 star 基因敲除均会引起肾上腺病变（Lin et al. 1995；Caron et al. 1997）。目前，在大部分脊椎动物中已检测并分离得到了StAR 蛋白，且保守性较高（Bauer et al. 2000），但其在不同物种中的组织表达具有较大

BPA 等 EDCs 会干扰 cyp19a1a 的表达。在我们之前的促进稀有鮈鲫卵巢中 cyp19a1a 的表达（Liu et al. 2014a）。体（ER）子结构醇核受体超家族的成员之一，大部分脊椎动物有 ERα 和 ERβ有 6 个结构域，N-C 端依次命名为结构域 A-F，如图 1-3 所示（K结构域中，N 端结构域 A 和 B 能以基因和组织特异性的方式通1）的磷酸化调控基因的转录表达，是不依赖配体的转录激活功构域 C 是主要的 DNA 结合域（DBD），由两个功能不同的锌指al. 1994）。C 端结构域 E 是主要的配体结合域（LBD），与配体结F2）调控基因的转录表达，是依赖配体的转录激活功能（Berry et 作为 LBD 域 DBD 之间的连接肽，包含受体二聚化序列和定位蛋白（HSP）的结合位点（Ogawa et al. 1998）。结构域 F 可能通相互作用来区分雌激素激活剂与拮抗剂（Montano et al. 1995; K

【参考文献】：
期刊论文
[1]双酚A对大豆、玉米和水稻叶绿素荧光反应的影响[J]. 李曼,王庆庆,王丽红,叶亚新,周青.  环境科学学报. 2014(04)
[2]水环境中双酚A的污染及其生态毒理效应[J]. 邓红梅,梁春营,陈永亨.  环境污染与防治. 2009(07)
[3]稀有鮈鲫——一种新的鱼类实验动物[J]. 曹文宣,王剑伟.  实验动物科学与管理. 2003(S1)
[4]稀有鮈鲫的繁殖生物学[J]. 王剑伟.  水生生物学报. 1992(02)

硕士论文
[1]BPA早期暴露通过丘脑—垂体中的雌激素受体影响新生和成年大鼠的甲状腺激素水平[D]. 范时骏.南昌大学 2016



本文编号：3647535