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表达中国对虾含单一乳清酸性蛋白结构域抗菌肽的转基因果蝇的生理功能与免疫力研究

发布时间:2022-09-27 16:36
  中国对虾含单一乳清酸性蛋白结构域抗菌肽(whey acidic protein,WAP)具有广谱抗菌和蛋白酶抑制双重功能,显示出很好的抗生素替代品研发潜力。我们实验室前期研究发现,用UAS-wap/Gal4转基因果蝇制备的产品不仅比大肠杆菌与酵母表达的WAP抗菌肽有更高的抗菌活性与抑蛋白酶活性,而且在动物实验中有比抗生素更好的抗菌和祛炎效果。但是,有关UAS-wap/Gal4转基因果蝇具有高抗菌活性的分子机制还不清楚。基于此,本论文对UAS-wap/Gal4转基因果蝇进行了两个方面的研究。一方面,研究了UAS-wap/Gal4转基因果蝇的生理功能。具体内容包括两部分:第一,观察UAS-wap/Gal4转基因果蝇与对照果蝇在正常与菌刺培养条件下的生长周期、形态与体重;第二,观察UAS-wap/Gal4转基因果蝇与对照果蝇在正常与菌刺培养条件下的产卵量、化蛹率、羽化率与寿命。结果显示:第一,在正常与菌刺两种培养条件下,UAS-wap/Gal4转基因果蝇的生长周期、形态与体重没有明显变化,但菌刺使对照果蝇的生长周期延长了约4天、体重降低了约23%;第二,在正常与菌刺两种培养条件下,UAS-w... 

【文章页数】:68 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 抗菌肽
        1.1.1 抗菌肽发现的紧迫性
        1.1.2 抗菌肽的特点
        1.1.3 抗菌肽的功能
        1.1.4 抗菌肽的应用前景及存在问题
    1.2 WAP抗菌肽
    1.3 转基因果蝇
        1.3.1 果蝇简介
        1.3.2 果蝇的免疫系统
        1.3.3 wap转基因果蝇
    1.4 研究意义与内容
        1.4.1 研究意义
        1.4.2 研究内容
        1.4.3 技术路线
第二章 UAS-wap/Gal4转基因果蝇的生理功能研究
    2.1 引言
    2.2 实验材料与仪器
        2.2.1 实验材料
        2.2.2 试剂和仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 果蝇培养
        2.3.2 果蝇扩繁
        2.3.3 处女蝇收集
        2.3.4 果蝇杂交
        2.3.5 UAS-wap/Gal4转基因果蝇的生长周期观察
        2.3.6 UAS-wap/Gal4转基因果蝇的形态与体重观察
        2.3.7 UAS-wap/Gal4转基因果蝇的生殖力观察
        2.3.8 UAS-wap/Gal4转基因果蝇的寿命观察
    2.4 结果与分析
        2.4.1 UAS-wap/Gal4转基因果蝇的生长周期分析
        2.4.2 UAS-wap/Gal4转基因果蝇蛹和成蝇的形态分析
        2.4.3 UAS-wap/Gal4转基因果蝇的体重分析
        2.4.4 UAS-wap/Gal4转基因果蝇的生殖力分析
        2.4.5 UAS-wap/Gal4转基因果蝇的寿命分析
    2.5 讨论
第三章 UAS-wap/Gal4转基因果蝇的免疫力研究
    3.1 引言
    3.2 实验材料与仪器
        3.2.1 实验材料
        3.2.2 试剂和仪器
        3.2.3 试剂的配制
    3.3 实验方法
        3.3.1 UAS-wap/Gal4转基因果蝇的免疫基因表达水平检测
        3.3.2 UAS-wap/Gal4转基因果蝇的免疫力检测
    3.4 结果与分析
        3.4.1 UAS-wap/Gal4转基因果蝇的免疫基因表达水平分析
        3.4.2 UAS-wap/Gal4转基因果蝇的免疫力分析
    3.5 讨论
第四章 结论与展望
    4.1 wap基因的表达不影响UAS-wap/Gal4转基因果蝇的生理功能
        4.1.1 UAS-wap/Gal4转基因果蝇的生长周期没变
        4.1.2 UAS-wap/Gal4转基因果蝇的形态与体重没变
        4.1.3 UAS-wap/Gal4转基因果蝇的生殖力没变
        4.1.4 UAS-wap/Gal4转基因果蝇的寿命没变
    4.2 wap基因的表达不影响UAS-wap/Gal4转基因果蝇的免疫力
        4.2.1 UAS-wap/Gal4转基因果蝇的免疫基因表达没变
        4.2.2 UAS-wap/Gal4转基因果蝇的免疫力提高
    4.3 展望
参考文献
致谢
附录


【参考文献】:
期刊论文
[1]再生障碍性贫血患者B细胞及其介导的体液免疫状况研究[J]. 沈英英,武利强,王博,邓姝,林圣云.  浙江中西医结合杂志. 2017(01)
[2]病原体感染的天然免疫防御效应[J]. 刘光伟.  科学通报. 2016(27)
[3]EPSAH, an exopolysaccharide from Aphanothece halophytica GR02, improves both cellular and humoral immunity as a novel polysaccharide adjuvant[J]. ZHU Lei,ZHANG Fan,YANG Li-Jun,GE Yang,WEI Qing-Fang,OU Yu.  Chinese Journal of Natural Medicines. 2016(07)
[4]肺炎支原体感染后机体的体液免疫、外周血T淋巴细胞亚群含量的评估[J]. 黎素清.  海南医学院学报. 2017(03)
[5]抗菌肽在畜禽养殖上的应用研究[J]. 赵红梅.  饲料广角. 2014(23)
[6]抗菌肽抗肿瘤作用的研究进展[J]. 夏丽洁,张富春.  生命科学. 2014(08)
[7]抗菌肽的提取分离及抑菌机理研究进展[J]. 苗建银,柯畅,郭浩贤,刘果,高向阳,曹庸.  现代食品科技. 2014(01)
[8]抗菌肽的抗肿瘤作用研究新进展[J]. 高洁,谢操,陆伟跃.  世界临床药物. 2012(10)
[9]抗菌肽抗菌机制及其应用研究进展[J]. 王兴顺,耿艺介,李文楚,邓平建.  微生物学免疫学进展. 2012(04)
[10]环状抗菌肽cyclopsychotride在毕赤酵母X-33中的表达及其活性鉴定[J]. 林云雄,刘德辉,何俊,张承勇,黄毓茂.  黑龙江畜牧兽医. 2011(21)

博士论文
[1]SUMOylation对SCA3/MJD转基因果蝇表型的影响及机制研究[D]. 罗莹莹.中南大学 2014
[2]模式识别受体在中华绒螯蟹特异性先天免疫中的功能研究[D]. 金兴坤.华东师范大学 2014
[3]甲壳动物抗菌肽及信号转导和转录激活因子(STAT)的基因克隆与功能分析[D]. 孙晨.山东大学 2011

硕士论文
[1]基于果蝇模式生物的幼年期睡眠剥夺对其成年后睡眠的影响及基因表达的变化研究[D]. 刘美玉.黑龙江中医药大学 2016
[2]适用于单子叶植物的LIC载体的构建及动物抗菌肽在水稻抗病育种中的应用[D]. 丁志娟.山东大学 2013
[3]超量表达果蝇Drosomycin基因提高植株的抗病能力[D]. 任小东.西南大学 2012
[4]抗菌肽NK-2的分子克隆、融合表达及其抑菌活性的初步研究[D]. 巢亦成.扬州大学 2010



本文编号:3681218

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