普通野生稻根特异启动子与抗旱基因的筛选鉴定

发布时间：2022-11-10 17:48

　　组织特异型启动子指导基因在植物的特定组织或器官中表达,可以避免植物营养的不必要浪费,在基因工程中是重要的顺式作用元件。本研究选用普通野生稻（Oryza rufipogon Griff.）为材料,分析实验室前期构建的普通野生稻cDNA文库,筛选到了9个根特异表达候选基因,分别克隆这些基因的启动子,与含有β-glucuronidas（gus）报告基因的植物表达载体连接,并转化拟南芥。转基因拟南芥GUS组织化学染色与定量结果表明,OrRSGp调控gus基因仅在根部特异表达。转化水稻表达分析结果与拟南芥中一致。OrRSGp为根特异表达启动子,长度为896bp,含有CAAT-box、TATA-box等主要功能元件,还有参与茉莉酸甲酯反应的响应元件,以及抗旱、抗逆等响应元件。该根特异启动子为植物基因工程提供了新的调控元件。干旱是影响作物生产最重要的环境压力之一。植物的根系发育直接受到环境因素影响,拥有发达的根系可以吸收深层土壤中的水分。普通野生稻具有丰富的遗传多样性,而且根系发达,具有宿根性繁殖的特点。实验以前期构建的普通野生稻cDNA文库为基础,通过生物信息学分析,筛选出17个候选基因,分别构建... 

【文章页数】：78 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．２乙酸介导的植物抗旱机制??Ｆｉｇｕｒｅｌ．２?Ｐｒｏｐｏｓｅｄ?ｍｅｃｈａｎｉｓｍ?ｆｏｒ?ａｃｅｔｉｃ?ａｃｉｄ－ｉｎｄｕｃｅｄ?ｄｒｏｕｇｈｔ?ｔｏｌｅｒａｎｃｅ??

图１．３植物ＩＩ型启动子的基本结构（Ｋｏｍａｒｎｙｔｓｋｙ?ａｎｄ?Ｂｏｒｉｓｊｕｋ，?２００３）??Ｆｉｇｕｒｅ?１?．３?Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ｐｌａｎｔ?ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ?ＩＩ?ｐｒｏｍｏｔｅｒｓ．??

图３．３部分启动子片段的菌落ＰＣＲ验证??Ｆｉｇｕｒｅ?３．３?Ｃｏｌｏｎｙ?ＰＣＲ?ｖｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｐａｒｔｉａｌ?ｐｒｏｍｏｔｅｒ?ｆｒａｇｍｅｎｔｓ??

【参考文献】：
期刊论文
[1]紫花苜蓿bZIP基因家族的鉴定、 进化及表达分析[J]. 齐晓,张正社,闵学阳,孙启忠,刘文献.  草业科学. 2017(08)
[2]启动子研究进展[J]. 李法君.  生物学教学. 2017(07)
[3]普通野生稻绿色组织特异表达启动子的克隆与鉴定[J]. 赵志强,薛满德,黄珂,张静文,龙艳,裴新梧,袁潜华.  生物技术通报. 2017(08)
[4]盐、碱胁迫条件下粳稻Na+、K+浓度的QTL分析[J]. 邢军,常汇琳,王敬国,刘化龙,孙健,郑洪亮,赵宏伟,邹德堂.  中国农业科学. 2015(03)
[5]棉花种子特异表达的LEA启动子克隆及功能验证[J]. 刘峰,汪小东,赵彦鹏,孙杰.  棉花学报. 2014(04)
[6]一个水稻鞘叶特异表达启动子的克隆及功能鉴定[J]. 颜彦,林拥军.  农业生物技术学报. 2013(07)
[7]大豆硬脂酸-ACP脱饱和酶基因启动子的克隆及其表达活性分析[J]. 张庆林,赵艳,李晓薇,翟莹,张艳,王英,李景文,王庆钰.  作物学报. 2011(07)
[8]一个水稻根时空差异表达启动子的克隆及功能分析[J]. 姚秋林,林拥军.  农业生物技术学报. 2011(02)
[9]果实特异性启动子研究现状及其应用[J]. 尹涛,张上隆,刘敬梅,陈大明.  农业生物技术学报. 2009(02)
[10]烟草根特异性启动子植物表达载体的构建及其对番茄的转化[J]. 彭娟,李志邈,杨悦俭,叶青静,吴才君,张小明.  浙江农业学报. 2009(01)

硕士论文
[1]水稻组织特异启动子的克隆及功能分析[D]. 魏晶.华中农业大学 2011
[2]中国普通野生稻（Oryza rufipogon Griff.）原生境保护与未保护居群的遗传多样性比较研究[D]. 王家祥.中国农业科学院 2009



本文编号：3705033