杨树PagD53基因的克隆表达及其与PagD14基因的相互作用的研究

发布时间：2023-02-14 16:38

　　杨树是我国重要的工业用材和造林绿化树种,提高杨树木材的生产力,培育出优良品质的杨树品种这一工作尤为重要。光能是植物积累生物量的初级能源,而树冠是树木截获光能、进行光合作用的场所,因此冠型结构和冠层密度是决定林分木材产量的重要因素。杨树的冠型结构和冠层密度主要由分枝发育决定。在木本植物中,分枝发育主要是指侧枝的发育和调控,侧枝是由叶腋处的腋芽发育而来,而侧芽与侧枝的发育是一个极为复杂的生理过程,受到植物自身的遗传性、激素调节、生长环境和营养条件等多种因素的调控。大量研究表明,植物激素对分枝发育调控具有极为重要的作用,已有报道,植物激素独角金内脂(SLs)在植物分枝发育调控中发挥着重要作用。在拟南芥和水稻的研究中表明独角金内酯信号转导通路中的关键基因D14可以调控分枝发育,D14蛋白编码了一个水解酶,其可以是感知独脚金内酯的信号,并且具备水解独脚金内酯的能力。在植物中,除了D14蛋白之外,能够接受独脚金内酯的受体还包括F-box蛋白D3和Clp蛋白酶家族蛋白D53,三者通过相互作用形成复合体参与独角金内酯的信号调控。本文以银腺杨(Populus alba×P.glandulosa)为实验材...

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
1.前言
    1.1 林木理想株型
    1.2 杨树的研究进展
    1.3 独脚金内酯调控植物分枝发育
        1.3.1 独脚金内酯的生物合成与信号传导
        1.3.2 独脚金内酯与其他激素共同调节植物分枝发育
        1.3.3 参与独角金内酯信号传导的相关基因
    1.4 D53的生物学功能
        1.4.1 D53的结构
        1.4.2 D53的功能
    1.5 本研究的目的与意义
    1.6 技术路线
2.试验材料与方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 菌种材料
        2.1.3 酶及试剂
        2.1.4 主要的仪器设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 PagD53 基因克隆与35S::PagD53 过表达载体的构建
        2.2.2 qRT-PCR检测84K杨中不同组织的PagD53 基因表达量
        2.2.3 PagD53的农杆菌介导转化84K杨
        2.2.4 PBI121-PagD53-GFP的表达载体构建及烟草亚细胞定位
        2.2.5 pGBKT7-PagD14与pGADT7-PagD53 载体的构建及酵母双杂实验
        2.2.6 pSPYNE-PagD14与pSPYCE-PagD53 表达载体的构建及烟草荧光双光子互作实验
3.结果与分析
    3.1 PagD53基因克隆及生物信息学分析
        3.1.1 PagD53基因克隆
        3.1.2 PagD53蛋白的生物信息学分析
        3.1.3 PagD53基因在不同组织部位中的表达分析
        3.1.4 35S::PagD53 超表达载体的构建与农杆菌介导的84K转化
    3.2 PagD53::GFP重组载体的构建与本生烟草瞬时转化分析
    3.3 pGBKT7-PagD14与pGADT7-PagD53 载体的构建及酵母双杂结果分析
        3.3.1 pGBKT7-PagD14与pGADT7-PagD53 载体的构建
        3.3.2 自激活检测
        3.3.3 酵母双杂交检测
    3.4 pSPYNE-PagD14与pSPYCE-PagD53 重组载体的构建及烟草荧光双光子检测结果分析
4.讨论
    4.1 杨树PagD53 蛋白是含有Clp结构域的功能蛋白
    4.2 杨树PagD53基因表达部位与其对独脚金内酯信号传导影响的推测
    4.3 杨树PagD53蛋白定位于细胞核内
    4.4 杨树PagD53 蛋白与PagD14 蛋白存在相互作用
5.结论
参考文献
致谢



本文编号：3742627