5-HT2A受体基因多态性及甲基化与尼古丁依赖的关联研究

发布时间：2023-03-25 02:24

　　目的探讨在中老年尼古丁依赖人群中5-HT2AR基因多态性分布特征及初步探讨尼古丁依赖人群的5-HT2AR基因启动子区甲基化水平特征。方法第一章:选择2018年06月至2019年11月间,在青岛大学附属医院保健科收集的符合本研究纳入标准的中老年吸烟和非吸烟人群共130例。根据尼古丁依赖检验量表(FTND)得分进行分组:尼古丁依赖组及对照组。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术(PCR-RFLP)和DNA直接测序两种方法共同对5-HT2AR基因的rs6311位点进行基因多态性的检测。5-HT2AR基因rs6311位点的基因多态性采用Primer3软件进行在线分析。采用SPSS 26.0软件对数据进行统计学分析。应用Shapiro-Wilk’s进行正态检验,计数资料以例数和百分比表示;计量资料以均数±标准差表示,计量资料两组间比较采用t检验,计数资料两组间比较采用卡方检验,相关性分析采用spearman相关分析,P<0.05表明有统计学意义。第二章:采用Illumina Hiseq平台,以2×150bp的双端测序模式进行高通量测序,对所有研究对象的基因组甲基化水平进行检测。检...

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【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
引言
第一部分 5-HT2AR基因多态性与尼古丁依赖
    研究对象与方法
        1 研究对象
        2 研究方法
            2.1 尼古丁依赖的测量
            2.2 主要设备
            2.3 主要试剂
            2.4 标本采集
            2.5 DNA提取
            2.6 PCR扩增
            2.7 PCR扩增产物的电泳
            2.8 PCR扩增产物的酶切和测序
            2.9 统计分析
    结果
        1 尼古丁依赖组和对照组临床资料比较
        2 5-HT2AR基因多态性分析
    讨论
第二部分 5-HT2AR基因启动子区甲基化与尼古丁依赖
    研究对象与方法
        1 研究对象
        2 研究方法
            2.1 主要设备
            2.2 主要试剂
            2.3 标本采集
            2.4 DNA提取及样品质控
            2.5 引物设计与单位点PCR条件优化
            2.6 多重PCR引物panel优化
            2.7 DNA的重亚硫酸盐处理及多重PCR反应
            2.8 定量及测序
            2.9 统计分析
    结果
        1 5-HT2AR基因甲基化状态与尼古丁依赖相关性分析
            1.1 5-HT2AR基因片段甲基化差异性分析
            1.2 5-HT2AR甲基化位点差异性分析
        2 5-HT2AR基因多态性与启动子区甲基化水平的相关性
    讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的科研成果
附录
致谢



本文编号：3770341